關于多克隆抗體的抗體鑒定介紹
抗體的效價鑒定 不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應、瓊脂擴散試驗、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。 抗體的特異性鑒定 抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在 IC50時的濃度,并按下列公式計算交叉反應率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示 這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為 0,即該血清的特異性較好。 抗體的親和力 是指抗體和抗原結合的牢固程度。親和力的高低是......閱讀全文
關于多克隆抗體的抗體鑒定介紹
抗體的效價鑒定 不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應、瓊脂擴散試驗、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊
關于多克隆抗體的基本介紹
抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產生的抗體稱之為單克隆抗體(MonoclonalAntibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;除
關于多克隆抗體的抗體制備介紹
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟: 1、制備抗原。 2、選擇實驗動物。 3、動物免疫。 4、試取血進行測試,看看是否成功免疫。 5、如果成功免疫,殺死實驗動物,采集全部血清。 6、純化出抗體。 7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。 具體操作與制備原理參見中國免疫學實驗網。 (
關于多克隆抗體的組織結構介紹
抗原上那部分可以引起機體產生抗體的分子結構,叫做抗原決定簇。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,因而使機體產生好幾種不同的抗體,最終產生出抗體是漿細胞。只針對一個抗原決定簇起作用的漿細胞群就是一個純系,純系的英文為Clone,音譯就是克隆。由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體
關于多克隆抗體的免疫方法介紹
可以采用以下各種方法之一進行免疫。 (1)淋巴結注射法: ①在兔的兩后足跖部皮下(或皮內)注射活卡介苗 50mg(每側約0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴結腫大; ②于腫大的兩側淋巴結內各注射加有完全佐劑的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1
關于多克隆抗體的結果判定介紹
1.抗 Ig 的效價測定 瓊脂擴散效價達 1﹕16 或 1﹕32 者為合格。 2.純度鑒定 采用瓊擴法。中間孔加抗 Ig 血清,外周孔加 Ig 和標準品 Ig。在抗 Ig 與 I抗原上那部分可以引起機體產生抗體的分子結構,叫做抗原決定簇。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,因而使機體產生好
關于多克隆抗體免疫動物的介紹
供免疫用的動物主要是哺乳動物和禽類,常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動物的選擇常根據抗體的用途和量來決定,也與抗原的性質有關。如要獲得大量的抗體,多采用大動物;如要是獲得直接標記診斷的抗體,則直接采用本動物;如要獲得間接的標記診斷用抗體,則必須用異源動物制備抗體;如果難以獲得的抗原
關于多克隆抗體的簡介
天然的抗原分子中常含有多種不同的抗原表位,以該抗原刺激機體的免疫系統可同時激活多種B細胞克隆,產生的抗體中會含有多種針對不同抗原表位的抗體,因此稱之為多克隆抗體。多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優勢是:作用全面,具有中和抗原、免疫調理、補體依賴
多克隆抗體的功能介紹
天然的抗原分子中常含有多種不同的抗原表位,以該抗原刺激機體的免疫系統可同時激活多種B細胞克隆,產生的抗體中會含有多種針對不同抗原表位的抗體,因此稱之為多克隆抗體。多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優勢是:作用全面,具有中和抗原、免疫調理、補體依賴的細
什么是多克隆抗體,多克隆抗體的優勢?
天然的抗原分子中常含有多種不同的抗原表位,以該抗原刺激機體的免疫系統可同時激活多種B細胞克隆,產生的抗體中會含有多種針對不同抗原表位的抗體,因此稱之為多克隆抗體。多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優勢是:作用全面,具有中和抗原、免疫調理、補體依賴的細
關于多克隆抗體的抗原準備
可以作為抗原的物質有很多種,一般的科研實驗中,經常使用的抗原有:偶聯多肽、偶聯的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。 對可溶性抗原而言,為了增強其免疫原性或改變免疫反應的類型、節約抗原等目的,常采用加佐劑的方法以刺激機體產生較強的免疫應答。
關于多克隆抗體的相關內容介紹
天然的抗原分子中常含有多種不同的抗原表位,以該抗原刺激機體的免疫系統可同時激活多種B細胞克隆,產生的抗體中會含有多種針對不同抗原表位的抗體,因此稱之為多克隆抗體。多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優勢是:作用全面,具有中和抗原、免疫調理、補體依賴
多克隆抗體
Making Antibody·?????????Production of Polyclonal Antibody in Rabbit?(Walter Steffen)Provides detailed protocol for immunizatioin, bleeding procedure,
多克隆抗體的免疫方法介紹
(1)淋巴結注射法:①在兔的兩后足跖部皮下(或皮內)注射活卡介苗 50mg(每側約0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴結腫大;②于腫大的兩側淋巴結內各注射加有完全佐劑的IgG 乳化抗原?0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、鏈霉素?1 000μg/ml);③
多克隆抗體的抗體分類
抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原所產生的抗體稱之為單克隆抗體(Monoclone antibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;除了抗原決
多克隆抗體的乳化作用介紹
將抗原與佐劑混合的過程稱為乳化。乳化的方法很多,可采用研缽乳化;可直接在旋渦振蕩器上乳化;可用組織搗碎器乳化。少量時,特別是弗氏佐劑與抗原乳化時,常采用注射器乳化,用兩個注射器,一個吸入抗原液,一個吸入佐劑,兩注射器頭以膠管連接,注意一定扎緊,然后來回抽吸。當大量乳化時,可采用膠體磨進行。 乳
簡述多克隆抗體的抗體分類
抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原所產生的抗體稱之為單克隆抗體(Monoclone antibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;除了抗
多克隆抗體的制備
多克隆抗體的制備?1. 器材:?剪刀(剪兔毛用)一把、彎頭眼科手術鑷子(游離血管用)一把、直頭眼科手術剪(剪血管用)一把,手術刀架,手術刀片,注射器(1ml、10ml,25ml)附針頭,兔子固定架,滅菌三角燒瓶(200ml)或平皿(直徑 18cm)、彎頭止血鉗四把,直頭止血鉗兩把,手術縫合線,塑
多克隆抗體的定義
多個不同克隆B細胞針對多種抗原表位所產生的多種抗體的混合物稱為多克隆抗體。也稱第一代人工抗體,如免疫血清。
多克隆抗體的組織結構
抗原上那部分可以引起機體產生抗體的分子結構,叫做抗原決定簇。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,因而使機體產生好幾種不同的抗體,最終產生出抗體是漿細胞。只針對一個抗原決定簇起作用的漿細胞群就是一個純系,純系的英文為Clone,音譯就是克隆。由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目
多克隆抗體的制備方法
一、器材?剪刀(剪兔毛用)一把、彎頭眼科手術鑷子(游離血管用)一把、直頭眼科手術剪(剪血管用)一把,手術刀架,手術刀片,注射器(1ml、 10ml,25ml)附針頭,兔子固定架,滅菌三角燒瓶(200ml)或平皿(直徑18cm)、彎頭止血鉗四把,直頭止血鉗兩把,手術縫合線,塑料放血管,紗布等
多克隆抗體的制備步驟
實驗試劑生理鹽水(或PBS)弗氏完全佐劑(Freund’s complete adjuvant,FCA)弗氏不完全佐劑(Freund’s incomplete adjuvant, FIA)二甲苯,酒精棉,脫脂棉,2% NaN3實驗設備剪刀(剪兔毛用)一把、彎頭眼科手術鑷子(游離血管用)一把、直頭眼科
多克隆抗體的功能特點
抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產生的抗體稱之為單克隆抗體(MonoclonalAntibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;除了抗
多克隆抗體的制備步驟
實驗概要本實驗通過兔免疫制備了多克隆抗體。主要試劑生理鹽水(或PBS)弗氏完全佐劑(Freund’s complete adjuvant,FCA)弗氏不完全佐劑(Freund’s incomplete adjuvant, FIA)二甲苯,酒精棉,脫脂棉,2% NaN3主要設備剪刀(剪兔毛用)一把、彎
多克隆抗體的制備步驟
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟:1、制備抗原。2、選擇實驗動物。3、動物免疫。4、試取血進行測試,看看是否成功免疫。5、如果成功免疫,殺死實驗動物,采集全部血清。6、純化出抗體。7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。具體操作與制備原理參見中國免疫學實驗網。(一)抗原制備Ig 是免疫球蛋白,對異種動
多克隆抗體提取實驗
實驗材料 血清試劑、試劑盒 DEAE纖維素磷酸鹽緩沖液儀器、耗材 燒杯布氏濾斗濾紙實驗步驟 1. ?稱取DEAE-纖維素(DE32或DE52)50 g,置于1 000 ml燒杯中,先以蒸餾水漂浮除去細顆粒,再經酸堿處理后,用0.01~0.05 mol/L,pH8.0左右的磷酸鹽緩沖液(PB)平衡
多克隆抗體純化實驗
實驗材料 動物血清樣品試劑、試劑盒 正辛酸醋酸緩沖液PBS儀器、耗材 透析袋高速低溫離心機實驗步驟 一、材料和試劑?1. ? 正辛酸?2. ?60 mmol/L,pH4.0醋酸緩沖液,PBS?3. ?透析袋?4. ?高速低溫離心機?二、操作步驟?1. ?將待提取樣品用60 mmol/L,pH4.0醋
多克隆抗體制備
1. 免疫動物:兩只新西蘭兔?2. 佐劑:首先用完全弗氏佐劑(CFA),后用不完全弗氏佐劑(IFA)。?3. 免疫原:蛋白或KLH偶聯的多肽。每次免疫100-200μg免疫原。?4. 免疫:用生理鹽水稀釋免疫原,然后與相應的佐劑進行1:1混合。抗原和佐劑完全混合形成穩定的乳劑,將該乳劑在兔子雙肩周圍
多克隆抗體的抗原來源
可以作為抗原的物質有很多種,一般的科研實驗中,經常使用的抗原有:偶聯多肽、偶聯的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。對可溶性抗原而言,為了增強其免疫原性或改變免疫反應的類型、節約抗原等目的,常采用加佐劑的方法以刺激機體產生較強的免疫應答。
多克隆抗體的免疫電泳
【實驗原理】?免疫電泳又稱為γ球蛋白電泳或免疫球蛋白電泳技術,這是一種能夠判斷血液中三種免疫球蛋白IgM, IgG, IgA含量水平的實驗方法。在這項實驗技術中,首先利用蛋白質的分子量和所帶電荷的比值運用水平瓊脂糖凝膠電泳技術將蛋白質進行分離,然后將特異性的抗體引入到與電泳方向平行的凹槽中,在抗