Northern雜交試驗指導手冊DIG標記的Northern雜交試驗指導一、 RNA提取方法一、改良異硫氰酸胍提取法試劑及其配制異硫氰酸胍變性液:貯存液-在含484ml 水(經DEPC處理), 17.6ml 0.75mol/L檸檬酸鈉(pH7.0)和26.4ml10%Sarkosyl的溶液中加入250g異硫氰酸胍,加熱至60~65℃并持續攪拌使之充分溶解。貯存液室溫保存備用(不超過3個月)。工作液-在每50ml貯存液中加入0.35ml2-ME即配制成工作液。工作液于室溫下保存不超過1個月。工作液各成分的終濃度為:4mol/L異硫氰酸胍25mol/L檸檬酸鈉pH 7.00.5%(w/v)N-十二烷基肌氨酸(Sarkosyl)0.1mol/L巰基乙醇(2-ME)其它溶液:2mol/L乙酸鈉 (NaAc) 緩沖液 (pH 4.0)水飽和酚(pH 3.5)49∶1 (v/v) 氯仿/異戊醇100%異丙醇70%乙醇(用DEPC處理水配制)......閱讀全文
核酶(ribozyme ) 是一類具有酶特性的 RNA 分子,通過催化靶位點 RNA 鏈中磷酸二酯鍵的斷裂,特異性地剪切底物 RNA 分子,從而阻斷基因的表達。核酶廣泛存在于從低等到高等的多種生物中,參細胞內 RNA 及其前體的加工和成熟過程。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法
細胞中,蛋白質與 RNA 結合參與多種生理調控和發育過程。在 mRNA 的加帽,多聚腺苷酸化,剪切,核外運,翻譯起始及降解等過程中都存在著蛋白質與 RNA 的直接相互作用。在發育的各個階段,RNA 結合蛋白可以通過與 mRNA 的相互作用調控基因的表達。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛
寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解實驗是分析 RNA 蛋合復合物(RNP,核糖核蛋白顆粒)的方法,無論是對于粗提物還是提純后的樣品,對分析 RNP 的結構域的結構都非常有效。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法原理寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解實驗是分析 RNA 蛋合復合