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?PCR反應的成分和作用 總體積：一般為25μl～100 μl （一）無Mg2 buffer：由純水、kcl、Tris組成。Tris用于調節反應體系pH值，使Taq酶在偏堿性環境中反揮活性。kcl可降低退火溫度，但不能超過50 mmol/L，否則會抑制DNA聚合酶活性。 （二）Mg2 :終濃度為1.5～2.0mmol/L，其對應dNTP為200 μmol/L，注意Mg2 與dNTPs之間的濃度關系，由于dNTP與Taq酶竟爭Mg2 ，當dNTP濃度達到1 mmol/L時會抑制Taq酶的活性。 Mg2 能影響反應的特異性和產率。 （三）BSA：一般用乙酰化的BSA，起著減少PCR管對Taq酶的吸附作用，對Taq酶有保護作用。 （四）底物（dNTPs）：dNTPs具有較強酸性，其儲存液用NaOH調pH值至7.0～7.5，一般存儲濃度為......閱讀全文
基因突變(gene mutation)是遺傳病和腫瘤發生的根本原因，檢測與遺傳病及惡 性腫瘤發生有關的突變基因(mutant gene)是分子生物學，醫學遺傳學及腫瘤學研究 的熱點，它對闡明遺傳病和腫瘤發生的分子生物學基礎及其診斷和早期診斷具有重要 ＼意義，分子生物學技術的發展，尤其是PCR技術的出
摘要：隨著食品工業持續、快速地發展，傳統的方法已經不能夠 滿足當前對食品檢測的更高要求了，人們要求更為簡便快捷、靈活 性強、特異性高的先進的檢測方法，而現代的生物技術的快速發展 使食品的檢測方法更加多樣、準確、迅速及安全，也就是說生物技 術的應用滿足了現代食品檢測的更高要求。 關鍵詞：食品檢測；生物
基因突變(gene mutation)是遺傳病和腫瘤發生的根本原因，檢測與遺傳病及惡 性腫瘤發生有關的突變基因(mutant gene)是分子生物學，醫學遺傳學及腫瘤學研究 的熱點，它對闡明遺傳病和腫瘤發生的分子生物學基礎及其診斷和早期診斷具有重要 ＼意義，分子生物學技術的發展，尤其
（2）反應增強劑：PCR反應中加入一定濃度的增強劑如1%～10%二甲基亞砜（DMSO）、5%～20%甘油、非離子去污劑、1.25%～10%甲酰胺和10～100 μg/ml牛血清白蛋白等可提高反應特異性和產量，有些反應只能在這些輔助劑存在時才能進行。（3）熱啟動PCR：如果PCR反應混合物置于低于Tm
多聚酶鏈式反應即PCR（polymerase chain reaction）技術，應用這一技術可以將微量目的基因（DNA片段）擴增一百萬倍以上。PCR反應理論的提出和技術的完善對于分子生物學的發展具有特殊的意義，它以敏感度高、特異性強、產率高、重復性好以及快速簡便等優點迅速成為分子生物學研究中應用最
在科學研究中，每一項新技術的創立都會帶來一系列新的研究成果問世，從而推動著各學科的發展。縱觀形態研究領域，50年代電子顯微鏡引入形態學觀察領域，帶來了從細胞水平到亞細胞水平的深入研究；60-70年代，免疫組織化學與免疫細胞化學技術的廣泛應用，又將觀察的水平由亞細胞結構推向了蛋白質分子水平，使細胞內眾
數字PCR技術的原理數字PCR（Digital PCR-dPCR）技術是一種新的核酸檢測和定量方法，與傳統定量PCR（qPCR）技術不同，數字PCR采用絕對定量的方式，不依賴于標準曲線和參照樣本，直接檢測目標序列的拷貝數。由于這種檢測方式具有比傳統qPCR更加出色的靈敏度和特異性、精確性，dPCR迅
摘要：PCR技術是一種體外擴增特定DNA序列的方法。該技術以其高特異性和靈敏度等優點已廣泛用于各領域。本文主要對PCR技術的原理及其在一次性使用衛生用品微生物檢測的應用前景等方面進行綜述。 隨著科學研究的進步，各種新技術不斷形成且廣泛應用于各個領域。人們對一些生物指標的檢測手段也進
[摘 要] 微生物食品安全是當前消費者與食品工業共同關注的話題,食品中致病菌的快速、準確、簡便檢測,對于食品安全質量控制以及食品鏈中致病性細菌的溯源追蹤具有重要作用。在選用微生物的快速檢測方法時，應該考慮到方法的預期目標的精確性、檢測時間、經濟性、可接受性、操作簡便性、技術服務等因素。介紹了P
多聚酶鏈式反應即PCR（polymerase chain reaction）技術，應用這一技術可以將微量目的基因（DNA片段）擴增一百萬倍以上。PCR反應理論的提出和技術的完善對于分子生物學的發展具有特殊的意義，它以敏感度高、特異性強、產率高、重復性好以及快速簡便等優點迅速成為分子生物學研究中應用最
PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：模板DNA的變性，模板DNA與引物的退火(復性)，引物的延伸。重復循環變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的“半保留復制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環的模板。每完成一個循環需2～4分鐘， 2～3小
轉基因食品是指利用生物技術，將外源基因轉移到動物、植物或微生物等其他物種中，從而改造生物的遺傳特性，使其在性狀、營養品質等方面向人類所需的目標轉變，由這些轉基因生物為直接食品或原料加工生產的食品就是轉基因食品。自1983年世界第一例轉基因作物馬鈴薯問世以來，目前各國已經試種的轉基因植物超過4500種
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性，它已成為分子生物學中最常用的基本技術，被廣泛應用于基因克隆的篩選，酶切圖譜的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下（適宜的溫室度及離子強度等）可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
血液分子生物學檢驗技術主要包括PCR技術、DNA測序技術、限制性片段長度多態性（RFLP）、轉基因技術及基因芯片（DNA-chip）技術等分子生物學技術。目前這些技術已應用于血液病基因分析、基因診斷、白血病分型、指導治療、判斷預后和微小殘留病檢測等方面。 （1）核酸分子雜交技術原理和方法 1）So
劉向國 謝國明 (重慶醫科大 重慶市 400016)摘 要 熒光定量PCR儀技術是一種新的核酸定量技術，該技木在PCR儀反應系統中引人了熒光標記探針，具有可實時監測，高靈敏性，高特異性和高精確性的特點，極大地克服了原有PCR儀技術的不足，擴大了PCR儀的應用范圍。關鍵詞 定量pcr；熒光；基因Flu
摘要：近年來，食品安全問題得到了全社會的關注，食品檢測技術得到了更多的重視，生物技術等新興的食品檢測技術也因此而得到了廣泛的應用。文章在簡要介紹生物技術的基礎上，詳細闡述了生物技術在食品檢測中的應用，以期為生物技術的發展與應用提供新的思路。 食品安全問題是由于食品中含有毒、有害物質
血液分子生物學檢驗技術主要包括PCR技術、DNA測序技術、限制性片段長度多態性（RFLP）、轉基因技術及基因芯片（DNA-chip）技術等分子生物學技術。目前這些技術已應用于血液病基因分析、基因診斷、白血病分型、指導治療、判斷預后和微小殘留病檢測等方面。（1）核酸分子雜交技術原理和方法1）South
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction，PCR)可對特定核苷酸片斷進行指數級的擴增。在擴增反應結束之后，我們可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行定性的分析，也可以通過放射性核素摻入標記后的光密度掃描來進行定量的分析。無論定性還是定量分析，分析的都是PCR終產物。但是在許多
摘要：近年來，微生物及其產生的各類毒素引發的食品污染層出不窮，微生物污染造成的食源性疾病仍是世界食品安全中令人頭痛的問題。隨著生物學技術和微電子技術的發展，食品微生物快速檢驗技術有了較大進展。PCR技術用于食品中致病微生物的檢測較之傳統方法具有快速、 特異、 敏感等特性 ,其優越性無可比擬 ,因
聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction, PCR）是微量核酸擴增的有效工具，由于其靈敏、特異、快速等優點，在醫學上已廣泛應用與病毒、細菌病原體及遺傳病、腫瘤的早期診斷。隨著PCR技術的發展，特別是病毒或腫瘤的治療監測、疾病的診斷、機體基因表達調控方面，不僅需要檢測其存在是否
骨腫瘤較罕見，惡性骨腫瘤只占全身惡性腫瘤的1%，男多于女，性別比約為1.6 ∶1，均好發于10-30歲間，良性者以骨軟骨瘤最多，依次為骨巨細胞瘤、內生軟骨瘤 等，惡性者以骨肉瘤最多，依次為軟骨肉瘤、纖維肉瘤等.骨惡性腫瘤的發生機理目 前認為是癌基因顯性作用與抗癌基因失活的結果，是多種癌基因多階段
摘要：食品安全是全球面臨的難題和巨大挑戰，不僅影響著人們的健康與生活，還關系著社會的穩定。本文初步介紹了幾種食品檢測中微生物檢驗的新技術，希望為從事食品檢驗工作的人員提供幫助。 《中華人民共和國食品安全法》中定義食品安全是指食品無毒、無害，符合應當有的營養要求，對人體健康不造成任何
數字PCR即Digital PCR（dPCR)，它是一種核酸分子絕對定量技術。相較于qPCR，數字PCR可讓你能夠直接數出DNA分子的個數，是對起始樣品的絕對定量。數字PCR是近年來迅速發展起來的一種定量分析技術。該技術結果判定不依賴于擴增曲線的循環閾值（Ct），不受擴增效率的影響，具有很好的準確度
自從1985年PCR技術首次應用于遺傳病基因診斷以來，已有近百種遺傳病可用PCR 技術進行診斷和產前診斷，利用 PCR技術診斷遺傳病的途徑有五個，①基因突變位點 的直接檢出②篩查與遺傳病③有關的點突變④遺傳多態性標記連鎖分析間接診斷⑤ 利用cmRNA逆轉錄為cDNA進行分析或直接分析cmRN
自從1985年PCR技術首次應用于遺傳病基因診斷以來，已有近百種遺傳病可用PCR 技術進行診斷和產前診斷，利用PCR技術診斷遺傳病的途徑有五個，①基因突變位點 的直接檢出②篩查與遺傳病③④有關的點突變③遺傳多態性標記連鎖分析間接診斷④ 利用cmRNA逆轉錄為cDNA進行分析或直接分析cmRN
聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction, PCR）自誕生之日起就決定了它不僅是一種高敏感、高特異的檢測核酸分子的定性方法，而且也是一個能對核酸分子進行精確定量的有力工具[1]。隨著分子生物學技術研究的不斷進展，定量PCR技術取得了突飛猛進的發展，不僅建立了一系
摘要：社會的進步促進了食品工業的快速發展，生物檢測技術在食品檢驗中得到了廣泛的應用。本文介紹了幾種常見的生物檢測技術，主要包括免疫技術、生物酶技術、PCR技術、生物芯片、生物傳感器以及核酸探針等技術，并對其在食品檢驗中的應用進行了分析。 隨著社會的進步和人們生活水平的提高，食品安全問題越來越受
聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction，PCR)簡稱PCR技術，是近年來發展起來的一種體外擴增特異DNA片段的技術，由于其可使特定DNA片段在數量上呈指數增加至可檢測范圍，故成為基因診斷的重要方法。在PCR基礎上衍生的一些擴增技術已用于基因突變的診斷。目前單基因疾病P
第六節 自動化技術在微生物檢驗中的應用 微生物鑒定的自動化技術近十幾年得到了快速發展。數碼分類技術集數學、計算機、信息及自動化分析為一體，采用商品化和標準化的配套鑒定和抗菌藥物敏感試驗卡或條板，可快速準確地對臨床數百種常見分離菌進行自動分析鑒定和藥敏試驗。目前自動化微生物鑒定和藥敏分析系統已在世界
聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR）簡稱PCR技術，是近年來發展起來的一種體外擴增特異DNA片段的技術，由于其可使特定DNA片段在數量上呈指數增加至可檢測范圍，故成為基因診斷的重要方法。在PCR基礎上衍生的一些擴增技術已用于基因突變的診