獻血者ABO血型檢測的手工操作工作量大，常因為過度頻繁重復操作而產生血型誤差。我站自2001年起用RSP全自動樣本處理系統及SUNRISE恒溫酶標儀判讀微板法測血型后，降低了工作強度，避免了人為因素導致的錯判。ABO血型檢測的操作實現了自動化、標準化，并可將原始血型資料實現文件化管理，提高了臨床輸血的安全性。筆者將我站微板法ABO血型全自動技術在實際工作中的應用體會及注意事項在這里進行總結、探討。
1 材料和方法
1.1 儀器與試劑 GENESIS-RSP-150全自動樣品處理系統（瑞士，TECAN公司），SUNRISE恒溫酶標儀（瑞士，TECAN公司），TL-5.0臺式平板離心機（上海），MM-2微量振蕩儀（江蘇金壇），96孔平底板，96孔U型板，抗-A，抗-B單克隆抗血清（購自長春生物制品研究所），自制試劑RBC懸液（A型和B型RBC分別取自3份新鮮EDTA-Na 2 ）抗凝血，經混合后鹽水洗滌配制成5%的RBC懸液）。
1.2 應用軟件 PlateMate for Windows微板之友v3.2。
1.3 實驗方法 微孔板自動掃描。
2 微板法實驗操作程序
2.1 正定型 RSP-150自動樣品處理系統按設定程序吸取生理鹽水、RBC在96孔平底預稀釋板配制RBC懸液，分別加入96孔U型板雙孔中，按順序加入抗A，抗B標準血清，離心、振蕩、靜置。凝集孔細胞沉積在孔底，不凝集孔細胞呈懸浮狀態，微板在SUNRISE恒溫酶標儀使用PlateMate for Windows微板之友分析判讀結果，測定波長492nm，掃描微孔底40個點的透光度值。
2.2 反定型 RSP-150自動樣品處理系統分別將每份待測血漿加入U型微板雙孔中，按先后順序加入新鮮配制的A型和B型RBC懸液，離心、振蕩、靜置。酶標儀判讀，測定波長620nm，掃描微孔底40個點的透光度值。
2.3 微板法 ABO血型自動檢測原理 在世紀協和軟件的凝集單元，設定相應的ABO血型正反定型程序，選擇“讀數”后，待測微板進入自動掃描暗室中，掃描方式為96孔同時進行，掃描U型孔底中線上40個點的透光度。凝集孔的RBC凝塊聚集于孔中央，透光度小，而外周游離的RBC很少甚至沒有，透光度大，透光度曲線呈“U”型，設定此類曲線為陽性參考曲線。非凝集孔的RBC均勻分布，透光度曲線平緩呈“-”型，設定此類曲線為陰性參考曲線，微孔板在酶標儀上讀數后每一孔的曲線與設定的參考曲線相比較，根據程序設定的ABO血型正反定型結果模式統計判定樣本的血型。
3 結果
通過2035份獻血者樣本的正反定型。得出正反定型實驗一次判讀準確率為99.81%，證明該實驗方法可靠，異常結果出現為正反定不符，主要表現在反定型中，其中2份樣本嚴重脂血，1份嚴重溶血，2份樣本為血型抗體極弱。發現弱抗體的標本仍需以經典的常規方法進行確認。
4 討論
要使微板法有較高的準確率有幾點注意事項:（1）樣本要經過抗凝處理，否則將會引起加樣針堵塞，加樣量不準及造成污染;（2）反定型使用RBC，最好為新鮮配制的RBC懸液，濃度控制在5%～10%之間，否則容易給酶標儀判讀造成困難;（3）U型板底有異物或劃痕時，容易誤判，最好一次性使用微板。
使用自動化微板法血型檢測的技術的優點:（1）采用自動化加樣，加樣量精確、迅速，避免了手工加樣的人為誤差;（2）酶標儀判讀，血型結果自動打印，克服了手工檢驗血型無原始記錄的漏洞，對血站技術資料文件化管理意義重大。（3）由于離心、沉淀、振蕩，提高了弱抗體的檢出率;（4）試劑用量少，經濟;（4）降低了實驗者的工作強度，減輕精神壓力。運用了RSP自動加樣，SUNRISE酶標儀結果自動判讀 的自動微析法，大大避免了人為因素造成的血型錯誤，這種方法確保了臨床用血的安全，也可滿足血站建立成批量的血型原始記錄的實驗記錄檔案。
作者單位:721007陜西省寶雞市中心血站