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  • 發布時間:2009-07-20 03:33 原文鏈接: ASMS上的新型質譜和海報中的新技術

          ASMS主要參與者競爭利潤豐厚的市場份額,競相推出高端質譜


          在上月費城召開的ASMS上,Waters推出了Synapt ? G2 四極-飛行時間質譜系統,它集成了QuanToF ?和高清晰度質譜?技術,是專為Waters公司Acquity UPLC超高效液相聯用的質譜用戶設計的。

          據Waters飛行時間高級產品經理阿蘭米勒(Alan Millar)說,Synapt G2“在同超高效液相聯用時,在保持20張譜圖/秒的采集速度下,擁有> 40,000 FWHM的分辨率”,同時具有1 ppm的質量準確度,達到5個數量級的動態范圍。Waters希望在09年第四季度發貨第一套Synapt G2。

    Synapt ? G2 四極-飛行時間質譜系統

          “在蛋白質組學、代謝物鑒定、或生物制藥研究研究中,丟失那些潛在的關鍵信息的成本是巨大的。”米勒說,“在Synapt G2系統中,ZL的數據采集方法——我們稱其為Mse——可在一個寬闊的動態范圍內,提供高速、高分辨率、精確質量的母離子和碎片離子數據,因此只要你愿意,幾乎可對每一個離子提供一個全面的‘數字目錄’。一旦擁有了這個目錄,你可以用任何條件,無數次地查詢和再次查詢它。這是一個巨大的優勢。

          該系統的新技術采用了QuanToF技術,它集成了高場推進器和新型的離子檢測系統,后者合并了電子倍增器和雜合的ADC檢測器技術。雙級反射提高了聚焦高能離子的能力。該系統的第二代Triwave ?技術,比先前的Synapt一代儀器,提供了高達四倍以上離子遷移分辨率。

          Waters公司還推出了8項增強其MassLynx ?工作流程的技術,擴展其質譜應用能力。其中包括:BiopharmaLynx? 1.2,它使用碎片離子信息和UPLC/MS數據來確認肽段;MetaboLynx? XS 和 MarkerLynx? XS,用于代謝物鑒定和概覽Waters的質譜系統;ProteinLynx Global Server? 2.4,用于在nanoAcquity 二維UPLC/MSE應用中,提高大量蛋白質組數據的管理能力。


          Thermo Scientific公司在ASMS上推出了LTQ Velos? 線性離子阱質譜和LTQ Orbitrap Velos。LTQ Velos是一種新型的雙壓離子阱,用于操控離子的去耦,并在優化的壓力水平下檢測離子。它還具有電子轉移解離(ETD)能力,進行翻譯后修飾的分析和從頭測序(de novo sequencing)。

    LTQ Velos雙壓線性離子阱



    LTQ Orbitrap Velos

          Agilent科技公司推出了新型的超高分辨率(UHD)的Q-TOF液質聯用儀和新型三重四極桿液質聯用儀。6540臺式UHD精確質量測定的Q-TOF質譜,集成了該公司的離子束壓縮(ion beam compression)技術和增強的鏡像技術(enhanced mirror technology),提高了分辨率和質量準確度。6430三重四極桿液質聯用儀在6410平臺上提高了性能,可獲得更高的靈敏度和更快的離子監測和極性轉換速率。Agilent公司在ASMS上還推出了門戶網站(Web Portal),追蹤代謝組學的趨勢和進展。


    6540超高分辨率(UHD)的Q-TOF液質聯用儀



    6530三重四極桿液質聯用儀


          “在質量精確度和分辨率方面我們已經取得了巨大的進步,同時保持了儀器的靈敏度和動態范圍。” 安捷倫LC/MS全球高級市場主管肯.米勒(Ken Miller)說,“這是一套理想的系統可進行一流的定性分析,以支持蛋白質組或代謝組學的研究。”

          Bruker Daltonics公司在ASMS 2009上推出了三個質譜平臺,和用于MALDI-MS的蛋白質組學應用解決方案。新產品包括:擁有1 KHz 圖像采集速度的smartbeam?-II技術的ultrafleXtreme? MALDI-TOF/TOF系統;新的Flash檢測器;和4 GHz速度的數字化器。Bruker它的PAN? 全景技術可確保儀器無論在MS還是MS/MS模式下,均可獲得高至40,000 FWHM的分辨率。該系統可獲得1 ppm的質量精確度。


    ultrafleXtreme? MALDI-TOF/TOF系統

          Bruker還推出了amaZon?離子阱質譜儀,特點是雙離子漏斗(dual-ion funnel)轉移技術,在<0.58 u 的質量分辨率下可達52,000 u/sec的數據采集速度,同時在50~2000 m/z質量范圍的全掃描模式下可獲得20,000的分辨率。零延遲交替(Zero Delay Alternating? )數據采集技術可進行快速的離子極性切換。amaZon有兩個版本的儀器:用于蛋白質組學研究的amaZon ETD,和用于小分子篩選的amaZon X。


    amaZon?離子阱質譜儀

          Bruker推出的solariX?是一個雜交型Qq-FTMS平臺,據該公司說,在7 特斯拉(Tesla)下可擁有寬帶質量分辨率>1,000,000。Bruker的離子電荷控制(ICC?)方法,可在整個LC-MS分析中保持亞ppm的質量準確度。在ASMS上,Bruker還推出了其在MALDI-TOF質譜上的Edmass? 自上而下(top-down)的蛋白測序解決方案,可在一臺獨立的質譜儀器上,獲得天然蛋白質長達N-端70個殘基的序列,和C-端長達50個殘基的序列。


    solariX?雜交型Qq-FTMS


          島津公司推出了新的AXIMA 共振(Resonance)? MALDI QIT TOF質譜儀,專為結構表征和生物分子測序而設計。這款儀器合并了四極離子阱和反射型飛行時間分析器,使用氬氣激發被選擇的母離子,并進行控制性的碰撞誘導解離,使用該公司的超級制冷(Hypercool?)技術,來冷卻離子和預防非控制的碎裂。

    AXIMA 共振(Resonance)? MALDI QIT TOF質譜儀

          共振(Resonance)技術可進行高至1,000 FWHM分辨的母離子選擇,并兼容于島津新發布的翻譯后修飾發現軟件(PTM Finder?)和SeqLab 從頭測序(de novo sequencing)軟件。島津公司還推出了為超快速液相設計的LCMS-2020單四極桿質譜儀,它可獲得15,000 amu/sec的掃描速率,和快速的極性切換速率,可同時監測正離子和負離子。


    LCMS-2020單四極桿質譜儀

          Applied Biosystems (ABI) 公司展出的是新的AB SCIEX QTRAP? 5500液質聯用儀,專為生物標志物發現和驗證中蛋白和多肽定量而優化設計。它包括ABI公司新的快速eQ? 電子學和新的線性離子加速離子阱。新的AB SCIEX Triple Quad? 5500 質譜是為運行DMPK實驗和ADMET研究設計的。


    AB SCIEX QTRAP? 5500液質聯用儀

          ABI公司還展出了AB SCIEX TOF/TOF? 5800系統,作為生物標志物發現平臺的一部分,用于蛋白質鑒定和相關定量。5800 TOF/TOF質譜儀特點是具有attomole級的靈敏度。據該公司說,作為LC-MALDI工作流的一部分,相對于電噴霧(ESI)工作流,這款儀器還可以在復雜的混合物體系中,發現更多和不同的蛋白質。

    AB SCIEX TOF/TOF? 5800系統

          “質譜技術繼續吸引更多的科學家,使用這項技術用于越來越多的新應用。” Life Technologie公司質譜部總裁勞拉勞曼(Laura Lauman)說;“這些系統集成了直觀的軟件,全面地支持新水平的性能。”


          海報突出先進的方法

          ASMS上許多海報介紹了利用創新質譜方法開展的研究,如多反應監測(MRM)-MS分析,差異質譜分析(dMS),以及Label-free的定量LC/MS分析。這些技術正在擴展質譜技術的能力和其在市場上的機會,但是它們也創造了對于樣品制備、分離、和在質譜的上游去除高豐度蛋白質技術的新挑戰。

          在美國明尼蘇達大學的Ebbing de Jong及其同事題為“MRM for Oral Cancer Biomarker Validation in Saliva: Inherent Challenges, Solutions and Methods Development,” (“用MRM技術在唾液中驗證口腔癌生物標志物:內在挑戰,解決方法和方法的發展”)的海報中,Ebbing描述了他們通過去除淀粉酶(amylase depletion)來努力簡化樣品制備步驟,從而使用MRM技術在唾液中驗證口腔癌生物標志物。

          研究人員在淀粉柱上裝上唾液樣本,去除大量的淀粉酶組分,然后洗脫剩余的蛋白質組分。這些樣本再用Western blots方法,或酶解后用一維LC-MS分析(Thermo Scientific LTQ Orbitrap)。通過比較去除淀粉酶后的樣本和全唾液樣本顯示,去除淀粉酶后,可發現新的蛋白質條帶,并用MRM技術檢測出低豐度的多肽如:kallikrein-1(激肽釋放酶- 1)。


          美國密歇根大學的AK Yocum和其同事,介紹了多路穩定同位素稀釋的MRM-MS/MS方法的開發和試驗的優化,來區分良性和前列腺癌細胞系

          他們提出的研究結果,可衡量在整個細胞蛋白提取物中,8種前列腺癌的生物標志物肽段的絕對濃度。從6份良性和前列腺癌變細胞系中提取的蛋白,通過一維SDS-PAGE分離,然后酶解,酶解后的多肽用Agilent公司的1200 HPLC芯片和6410三重四極桿質譜分析。

          根據調查結果,作者得出結論認為,多通道的MRM-MS/MS法將更高確定性地鑒定出組織樣品呈陽性的前列腺癌,減少假陽性鑒定的概率和不必要的活檢。

          西北太平洋實驗室和俄勒岡健康科學大學的研究人員的海報——“Application of Label-Free Quantitative LC-MS-based Proteomics for Biomarker Identification in Salmonella typhimurium ”(應用非同位素標記的定量LC-MS方法,對鼠傷寒沙門氏菌進行蛋白質組生物標志物鑒定),他們鑒定了一組宿主巨噬細胞感染的協調上調蛋白質(a set of proteins coordinately upregulated on infection of host macrophages)。

          研究人員比較了沙門氏菌基因敲除突變體的蛋白質組,和調控毒力有關的蛋白質沒有被表達,用野生型沙門氏菌的蛋白質組,鑒定了同感染有關的特異的蛋白質,可以作為新藥發現的靶標。

          樣品被分離收集,并用Thermo Scientific LTQ Orbitrap進行LC-MS/MS分析,候選的蛋白質生物標志物被篩選的準則為:突變體相比野生型,必須具有大于雙倍的表達量減少;必須在最小7/12的調節突變上被協調監管;必須鑒定出多于3個肽段。5個LC-MS實驗發現的生物標志物用Western blot方法進行了驗證,表明了在沙門氏菌感染的宿主巨噬細胞中的上調表達。


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