(1)取肝素抗凝血2ml，加等量Hank液混勻，重層于分層液上，2000r/min，離心20min。取出淋巴細胞層，加Hank液，洗3次，1200r/min，離心10min，調整淋巴細胞濃度為1×107/ml，取0.1ml分裝兩管。
(2)將淋巴細胞懸液再用Hank液洗1次，棄去上清，用濾紙吸去管內壁剩余液體，分別加兔抗人IgG及抗人IgM熒光抗體2滴(約0.08ml)，輕搖后，放37℃溫箱30min。
(3)從溫箱取出用Hank液洗兩次，1000r/min離心10min，小心吸去全部上清，將管底沉淀的細胞加入50% PBS緩沖甘油1滴，混勻后取1滴加入載玻片上，覆以蓋玻片，置熒光顯微鏡下觀察。