目前, 蛋白質含量的測定通常使用凱氏定氮法、杜馬斯法或紅外法進行測定,但這些方法都有其局限性,無法準確測定真實蛋白的含量,而CEM SprintTM真蛋白質分析儀這項新技術卻可以快速準確的測定樣品中真實蛋白的含量。
傳統的蛋白質檢測方法
凱氏定氮法現在常常用來進行食品行業中蛋白質檢測,通過測出樣品中的總含氮量再乘以相應的蛋白質系數而求出蛋白質的含量。用凱氏定氮法通過測總氮量來確定蛋白質含量,包含了核酸、生物堿、含氮類脂、卟啉,以及含氮色素等非氮蛋白質含氮化合物,所以這樣的測定結果稱為粗蛋白。凱氏定氮法至今仍被作為標準檢驗方法。
凱氏定氮方法始于1883年,這種方法在操作上并不是一種非常理想的檢測方法,這種方法耗時,要花好幾個小時才能做一個樣品,而且用的化學試劑也是非常危險,需要用硫酸加熱到400℃。但目前仍在使用的原因在于尚未有另外一種檢測方法來代替這種方法。
另一種方法是杜馬斯法,是一種燃燒法。杜馬斯方法被認為是有顯著進步的一種方法,并取得了一些成功。本質上,它將樣品進行燃燒,測量釋放出來的氮,然后算出蛋白質含量。因為你正在燃燒這個樣品,你必須要處理在這個儀器里所有的燃燒物,這會引發一個保存問題,而且不能測量液體樣品和大的樣品量。樣品量越大,就會有越多的問題發生,這就迫使人們為了正確地操作儀器,而不得不減少檢測的樣品量。
以上兩種方法都是測總氮含量,再得到蛋白質的測量結果,都不是一種直接測量蛋白質的方法。
紅外的方法也是目前普遍采用的方法,但卻易受到樣品矩陣及其它成份的影響,且需要非常精確的校準,并和其它的測量方法如凱氏定氮法、杜馬斯法、SprintTM法進行校準。于是人們只把它作為次要的方法來來考慮。紅外的方法也不是一種直接測量蛋白質的方法。
以上提到的測量方法已經被證明引起許多的問題,都有可能產生誤導。當你用這些辦法來測摻假的食品時,這些方法卻無法告訴你這里已經沒有蛋白質了。
從上面可以看出,目前的主要檢測方法都是通過測量氮的含量來得到蛋白質的測量結果。這種方法有一個很明顯的缺陷:你測量的并不是你真正想測的。你檢測的是包含在蛋白質中的“氮”,但我們都知道食品所含的氮并不一定是蛋白質中的氮。如有添加劑,這就會產生一個問題,這些添加劑和污染物使得蛋白質檢測結果高于事實上的蛋白質含量。
CEM SprintTM分析儀
檢測原理
CEM SprintTM真蛋白質分析儀是快速測量食品、寵物食品等總的真蛋白質含量的一項新技術。它采用的是運用在生物科學領域的蛋白質標簽技術,這項技術可以給蛋白質貼上“標簽”,提供一種在樣品中直接測量蛋白質含量的手段。本質上,CEM SprintTM真蛋白質分析儀將蛋白質標簽技術和一些創新的技術結合在一起,將這種生物技術轉化并簡化到一定程度,便可以非常快速并簡單地操作來檢測所有的食品樣品。
主要檢測原理是CEM SprintTM利用呈酸性的iTAG試劑與氨基酸殘基反應來測量蛋白質,iTAG分子由酸性基團和芳香基團所組成,芳香基團能使之顯色,便于檢測。
CEM SprintTM真蛋白質分析儀的主要特點如下:
測量真蛋白質;
兩分鐘得出檢測結果;
適用所有食品的快速分析;
無危害化學物質產生;
比凱氏更安全更精確的測定結果。
另外,CEM SprintTM真蛋白質分析儀檢測方法獲得眾多標準的認可,包括AACC Method 46-14B,此法已經被證明適合分析:谷粒、油籽、豆類、飼料(包括草料)、動物制品、乳制品等;AOAC 967.12,此法已經被證明適合分析乳品(成品或半成品)蛋白、巧克力飲料、脫脂奶及冰激淋等。另外,Sprint也符合美國聯邦法規(CFR)Title 47,聯邦通信委員會(FCC) Part 18 – Industrial, Scientific and Medical (ISM) Equipment – emissions requirements。
應用實例
下面以三個例子來說明CEM SprintTM真蛋白質分析儀檢測方法的應用,實驗一:麥麩和添加三聚氰胺的麥麩的蛋白質檢測,iTAG方法只對蛋白質的氨基進行標識,而不對三聚氰胺中的氨基進行標識,結果見表1;實驗二:奶粉的蛋白質含量檢測的重復性(蛋白質含量34.66% ),結果見表2;實驗三:采用凱氏定氮法和SprintTM方法進行鮮奶油的蛋白質含量檢測,結果見表3。
結論
由上述實驗結果可知,采用CEM SprintTM 可以在兩分鐘之內直接檢測到你所要的蛋白質含量,測量速度快,重復性好,檢測結果精確。它不會被一些添加劑所誤導,可以廣泛應用于食品行業、飼料行業及蛋白質研究領域。
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