CPSA2013分會：生物分析和新技術的發現

　　2013年4月26日，上海CPSA 2013各個分會在浦東淳大萬麗酒店不同宴會廳同期舉行。本次在宴會廳二的會議主要圍繞生物分析和新技術的發現展開專題討論。

中國科學院化學研究所聶宗秀老師

　　首先上臺演講的是來自中國科學院化學研究所的聶宗秀老師，為大家作《采用MALDI-TOF質譜對體內小分子的分析》報告。報告先闡述了小分子研究背景和結構，并言明采用質譜對體內小分子分析可能遇到的挑戰，包括在降低干擾和無損傷的前提下活體取樣、由于不同生活環境而產生的耐鹽性、高選擇性等。而使用MALDI質譜分析則可以避免以上問題，MALDI在分析過程中不需要進行鹽類分析，晶體鹽會抑制或阻止激光解吸;由于基體干擾運行MALDI時其質量大于500Da;并可以利用其低電離效率進行糖組學分析。

賽默飛世爾科技聶愛英博士

　　來自賽默飛世爾科技的聶愛英博士在生物分析技術開發分會場帶來題為《高分辨質譜表征抗體藥物分子量、肽序列和修飾位點》的報告。主要介紹了抗體藥物、Orbitrap質譜儀和Q Exactive分析抗體藥物的分子量、肽序列和修飾位點三個方面的內容。

　　聶愛英博士以單克隆抗體MAb為例介紹了賽默飛Orbitrap儀器抗體檢測的方法和優勢。單克隆抗體MAb分子量約150k Da，有2個輕鏈和2個重鏈，多個二硫鍵，由多種糖形的糖蛋白組成。MAb有多重修飾方式，可以脫酰胺、氧化、二硫化、序列截斷、聚合等。目前在MAb開發工作流程涉及了藥物發現、臨床前開發、臨床開發、商品化前后的整個過程。MAb分析包括產品滴度、純度和雜質、產品ID、完整質量序列、電荷變化、碎片、修飾、DMPK/代謝物和聚糖等，傳統的分析方法有SDS-PAGE、HPLC、免疫組化分光光度法。傳統方法在選擇性、特異性、靈敏度、線性范圍、通量和穩定性中存在很多挑戰。

　　Orbitrap成為MAb分析的一種突破性技術，其擁有高分辨率，可以達到140k FWHM@200 m/z和240k@400m/z;內標<1ppm和外標<2ppm的高精度;很好的正負極轉換穩定性和高通量，一次進樣獲得更多信息;小于fmol的靈敏度。目前Orbitrap家族有落地式LTQ Orbitrap和臺式Exactive兩款產品。在售的LTQ Orbitrap系列有LTQ Orbitrap XL、LTQ Orbitrap Velos Pro、LTQ Orbitrap Elite。在售的Exactive系列有Exactive plus、Q Exactive。聶愛英博士詳細介紹了Q Exactive定量分析MAb的工作流程和獲得的原始MW、解卷積MW、ADC鍵位置、不同的PTM位點。使用Q Exactive可以獲得大于95%的肽圖譜信息。

Bristol-Myers Squibb公司Hong Cai女士

　　最后來自Bristol-Myers Squibb公司的Hong Cai女士發表《在小分子HRMS和SWATH技術的定量和定性分析中的應用：優勢和挑戰》演說。演說從采用HRMS對小分子的定性和定量分析、SWATH技術、運用SWATH在生物環境中對小分子的定性定量分析、獲得高質量SWATH關鍵因素這幾方面展開。報告指出與HR-PIA相比，SWATH能夠取代定量分析并可能有更高的靈敏度，同時SWATH也可以運用離子光譜過濾片段用于篩選未知物或代謝產物，SWATH也能適用于量化和大量物質成分結構鑒定，擁有廣闊的應用前景，包括環境分析、農藥殘留和食品分析等。