關鍵詞：組織學（Histology）, 基因功能（Gene Function）, 免疫組織化學（Immunohistochemistry）, 連續切片（Serial Sections）,振動切片機（Vibratome） | |
在基因功能的研究中，為了研究某種基因的功能或基因調控網絡時需要同時在一個動物上對多個基因進行突變操作。這一類分析兩個或多個基因的研究需要結合基因的原位雜交技術、基因表達蛋白的免疫組織化技術在發育的器官層面或組織切片的細胞層面來觀察突變操作所造成的影響。隨著更加先進的儀器的出現，研究技術也在不斷的更新。通過結合親脂性染料示蹤、原位雜交、免疫組織化學和組織學等多種技術從同一個動物中最大限度地獲取器官各個組織層面的結構變化以及基因和蛋白表達的變化數據，使得基因敲除、基因表達與組織學的數據更加緊密的關聯起來。 | |
通過親脂性染料示蹤后，將樣本進行切片可獲得組織學切片數據。為了獲取厚度均一的連續切片我們推薦使用Compresstome VF-700振動切片機（Precisionary Instruments Inc., Greenville, North Carolina）。使用這種切片機使得切片的免疫抗原活性得以保存。冰凍切片機由于切片過程中染料泄露的問題而不適于此應用。 | |
實驗設計示意圖：在同一個樣本中進行如下四個技術操作：一、染料示蹤；二、原位雜交顯示mRNA表達；三、免疫組織化學顯示蛋白的表達；四、組織學切片顯示原位雜交和免疫織織化學染色結果。 | |
注：新一代CompresstomeTM振動切片機通過瓊脂凝膠將樣本包埋在樣本管中，并施以輕微的壓縮使得組織被固定得更加牢靠，因此獲得更好的切片效果（切片厚度更均一，切片表面更加光滑平整）。 | |