DNA聚合酶的用途和缺陷

用途

聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)。

Taq酶擴增的PCR產物，3’末端總是帶有1個非模板依賴型的突出堿基，而這個堿基幾乎總是A，因為Taq酶對dATP具有優先聚合活性，故可用T載體克隆。

缺點

無3’→5’閱讀校正功能，在PCR擴增過程可引起錯配，30次循環錯配率約0.25%。

措施：選擇高保真Taq酶，如Pfu。

原因：Pfu具有3’→5’外切酶活性。

注意：Pfu擴增產物為平末端。