直接法（direct ELISA）
將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標記的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。
優勢：操作手續簡短，因無須使用二抗可避免交互反應。
缺點：試驗中的一抗都得用酶標記，但不是每種抗體都適合做標記，費用相對提高。
間接法（indirect ELISA）
此測定方法與直接法類似，差別在于一級抗體沒有酶標記，改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
優勢：二抗可以加強信號，而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標記的一級抗體則能保留它最多的免疫反應性。
缺點：交互反應發生的機率較高。