1. 準備下列試劑和材料:
未分化 ES 細胞
無 Ca2+ 和 Mg2+ PBS
ES 分化培養基
8 道微量移液器
無菌多道移液器容器
2. 收獲未分化 ES 細胞。
3. 在 100 mm 組織培養皿中加 10 ml PBS 備用。
4. 在一無菌容器內將 5X104 未分化 ES 細胞懸浮于 5 ml ES 分化培養基中。
5. 用多道移液器在 100 mm 組織培養皿蓋的內表面加 5 排 30 μl 液滴(每滴 300 個細胞)。
6. 拿起蓋,輕輕翻轉,蓋在內有 10 ml PBS 的培養皿上。
7. 小心將培養皿放于溫箱內,孵育 2 天。
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