實驗概要
IL-2主要由活化的CD4 T細胞產生，主要是促進T淋巴細胞的增殖與分化。IL-2是機體免疫網絡中最重要的細胞因子，因此IL-2的檢測已成為評價機體免疫功能狀態的重要指標之一。但由于IL-2是通過自分泌或旁分泌方式發揮其生物學效應的，在生理性免疫應答過程中，IL-2不出現于血液等體液中，故體液中IL-2含量極少，難以直接測定，通常是通過檢測體外誘生的IL-2來反映體內IL-1活性水平。IL-2可用免疫學方法來檢測其含量，但更多是用生物活性檢測法來檢測其活性單位。
實驗原理
PHA或ConA是IL-2的誘生物，能在體外誘導人外周血單個核細胞和組織細胞(如人脾臟、扁桃體、淋巴結)、小鼠和大鼠脾臟細胞等產生IL-2，由此可用于檢測IL-2的生物活性。
主要試劑
1. RPMI-1640培養液，含10% FCS的RPMI-1640完全培養液
2. PHA(初濃度為2mg/ml)
3. 75%酒精；
4. 蒸餾水或0.83%氯化銨溶液(破紅細胞用)
5. ConA
6. 2% FCS-HBSS，10% FCS-RPMI-1640完全培養液
主要設備
解剖刀、剪，無菌平皿，100目鋼網，研磨工具(玻璃勻漿器、不誘鋼網或毛玻璃片等)，刻度吸管，毛細吸管，刻度離心管，離心機，細胞計數板，倒置顯微鏡，加樣器(頭)，24孔細胞培養板，超凈工作臺，CO2培養箱，0.22um濾膜及濾器等。
實驗材料
1. 常規分離的外周血單個核細胞(PBMC)
2. BALB/c或C57BL/6小鼠：6-10周齡，雌雄均可
實驗步驟
1. 人外周血單個核細胞誘生IL-2
1) 常規分離PBMC；
2) 用RPMI-1640培養液將PBMC洗滌2次，1000r/min離心10min，然后用10%FCS-RPMI-1640完全培養液調細胞濃度為1×106/ml；
3) 將上述細胞懸液加入24孔培養板中，1ml /孔，同時加入PHA，使PHA的終濃度為100μg / ml；
4) 置37℃，5% CO2培養箱中培養48h；
5) 將培養的細胞充分混勻后，轉移至離心管中，2000r/min離心20min；
6) 收集細胞培養上清液，即獲得IL-2待測樣品，用0.22μm或0.45μm濾膜濾除雜質，分裝保存于-20℃或-70℃冰箱待測IL-2活性。
2. 小鼠脾臟細胞誘生IL-2
1) 拉頸處死小鼠，浸泡于75%酒精中3-5min，清毒處理；
2) 無菌操作取出脾臟，仔細剪碎或研磨，加適量2% FCS-HBSS混懸細胞，經100目鋼網過濾，即獲得單個脾細胞懸液；
3) 將獲得的單個脾細胞用蒸餾水或0.83%氯化銨處理，裂解殘存的紅細胞。
4) 用2% FCS-HBSS洗滌細胞2次，1000/min離心10min，然后用含10%FCS-RPMI-1640完全培養液調細胞濃度為5×106/ml；
5) 將上述脾細胞懸液加入24孔培養板，1ml/孔，再加入ConA，使其終濃渡為5-10μg/ml；
6) 置37℃、5% CO2培養箱中培養24-48h(視細胞轉化情況而定)；
7) 將培養的細胞充分震蕩混勻后，移至離心管中，2000r/min離心20min；
8) 收集上清液，即獲IL-2待測樣品。用0.22μm或0.45μm濾膜濾除雜質，分裝保存于-20℃或-70℃冰箱，待測IL-2的生物活性。
注意事項
1. IL-2誘生劑濃度、細胞濃渡、培養條件和誘生時間對IL-2誘生結果均有明顯影響，應進行預試驗確定最佳實驗條件。
2. 細胞懸液的均勻程度及細胞存活率對結果亦有影響。
3. 研磨條件：可用玻璃勻漿器、不誘鋼網等研磨脾臟。
4. 培養器皿：24孔培養板培養細胞存活率較高，但生長稍慢。玻璃瓶培養有時會因玻璃質量和清洗不凈引起細胞死亡。
5. 本試驗系統均應無菌操作，防止可能出現的污染。