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  • 發布時間:2019-04-06 22:32 原文鏈接: IgG抗體純化實驗

    雖然親和層析法是進行特異性抗體純化的首選,然而有時這種純化方式卻非必需,或者無法實施進行。在大多數錆況下,運鐵蛋白可發生共沉淀或共純化,能用凝膠濾過層析去除之。

    實驗材料

    抗體

    試劑、試劑盒

    SAS

    儀器、耗材

    透析膜離心機

    實驗步驟

    1.  于4℃不斷攪拌下,往2體積的含有IgG的混合物中,逐滴加入1體枳pH7.0的SAS溶液。加完后置于4℃不間斷地攪拌此混合物2~4 h以形成沉淀。2 000 g 離心20 min。

     

    2.  用預冷的33% SAS溶液在漩渦混合器上振蕩洗滌沉淀,所用溶液的體積與原含IgG的混合物等體積。

     

    3.  在旋渦混合器上溫和振蕩以將沉淀溶于合適的預冷的緩沖液中(5%~10%的原始體積)。4℃透析IgG溶液48 h以上,期間換3次緩沖液(每次換4 L)。


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