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  • 細胞名稱: Kasumi-1(人急性原粒細胞白血病細胞)

    細胞別稱: Kasumi-1; Kasumi 1; KASUMI1; Kasumi1

    細胞貨號: SNL-339

    生長特性: 懸浮

    培養條件: 1640+20% FBS+1% P/S

    培養環境: 空氣,95%;二氧化碳 (CO2),5%;37℃

    細胞簡介: Kasumi-1細胞從一名亞洲男性急性髓系白血病患者的外周血中分離出的成髓細胞,髓過氧化物酶陽性,顯示其髓性成熟的形態。Kasumi-1細胞是一個帶有8:21號染色體轉位的白血病細胞株,這個轉位使得AML1基因和ETO(或稱MTG8)基因串聯,使融合基因AML1-ETO(也稱作AML1-MTG或RUNX1-CBF2T1)的表達升高,因而細胞產生嵌合的AML1-ETO蛋白,這個蛋白下調CEBPA mRNA、蛋白和DNA的結合活性,而這種結合對粒性白細胞的分化是極端重要的。Kasumi-1細胞增殖實驗顯示,培養的Kasumi-1細胞對IL-3、IL-6、G-CSF(粒細胞集落刺激因子)、GM-CSF(粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子)有響應,但對IL-1和IL-5沒有響應。在體外液體培養中分別加入二甲亞砜、G-CSF、IL-5,也沒有觀察到粒性或嗜酸性細胞的成熟。Kasumi-1細胞培養過程中,加入佛波酯可以誘導出的巨噬細胞樣細胞。Kasumi-1細胞可以用于3D細胞培養、免疫系統紊亂研究、免疫學研究。

    編輯

    Kasumi-1細胞培養注意事項

    • Kasumi-1細胞呈懸浮圓形生長或聚團生長。圓形透亮、細胞膜完整的細胞是活細胞,如果無法判斷,可以取少量細胞用臺盼藍染色后計數確定細胞活率。接種密度建議在50萬細胞/mL左右為宜,密度過低或過高都可能造成細胞狀態變差;培養至80萬細胞/mL密度時即可傳代,推薦傳代比例1:2。培養時存在部分細胞碎片是正常現象, 若碎片比較多,可以待細胞密度較大時通過低速離心(900rpm,3min)去除部分碎片; 若碎片不多,則無需特殊處理;細胞密度低時不要離心去碎片,應該等細胞增殖到可以傳代的密度再離心。Kasumi-1細胞生長速度較慢,需耐心培養。培養體系中血清含量為20%,不建議降低血清比例。生長環境保持穩定,少觀察,少操作。當細胞狀態較差時,不建議對細胞進行離心,需換液時可采用半換液法(詳細步驟見下文)。Kasumi-1細胞凍存難度較大,建議使用高血清比例凍存液配方凍存細胞,凍存密度不可過低,推薦200-300萬細胞/mL/管,以提高復蘇活率。



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