MSCs培養物的擴增和凍存實驗_間充質干細胞（MSCs)的凍存

MSCs

α-MEMFBS組織培養級二甲亞砜（DMSO)凍存液：含30%FBS和5%DMSO的α-MEM。過濾除菌（為進一步確保安全和使凍存液澄清。高濃度血清和DMSO混合時凍存液會變混濁）

聚丙烯離心管15ml和50mlPBSA0.22μm濾膜的真空過濾器50ml凍存管2ml微量移液器槍頭NalgeneCryo-1℃凍存容器ThermoULT-80℃低溫冰箱或同等設備裝滿醫用級別液氮的液氮罐

(a)所得的MSC細胞懸液，500g離心10min。

(b)在凍存管上標記細胞來源、日期和細胞代數。

(c)用預熱的凍存液以1X10⁶個細胞/ml的密度重懸沉淀，每個凍存管中加入1ml,分裝成若干管。在DMSO存在的情況下，勿使MSCs在室溫放置20min以上。

(d)向Cryo-1℃凍存容器內裝人異丙醇至刻度線，將凍存管置于容器內。

(e)將容器置于-80℃至少15h。

(f)將凍存管轉移至液氮，至少可保存3年。