3.3士的寧完整裂解機理
LTQ Orbitrap XL的線性離子阱相比傳統三維離子阱具有更高的離子容量，故具有優異的多級質譜能力，能夠高效的捕獲前級離子進行碎裂，并獲得高靈敏度的碎片離子信息，在對士的寧母離子的采集過程中，獲得了其四級有效質譜信息（MS4）。通過多級質譜解析，總結出士的寧完整裂解機理，為未知代謝物檢索帶來有價值的信息（圖3）。
圖3. 士的寧MS4離子樹及完整裂解機理
3.4 碎片離子檢索（Fragment Ion Search, FISh）工作流程
碎片離子檢索功能利用母藥和代謝物的結構相關性，采用母藥的特征質譜碎片，結合代謝途徑，完成對未知代謝物的檢索。利用該功能，在完成了士的寧母藥的質譜裂解規律后，將特征碎片導入FISh模塊中，并選擇可能的代謝途徑，結合代表性組分查找，檢索士的寧未知代謝物的全面信息（圖4）。
圖4.碎片離子檢索士的寧未知代謝物工作流程
3.5 碎片離子檢索（Fragment Ion Search, FISh）結果
通過碎片離子檢索獲得準確全面的未知代謝物信息，包含未知代謝物色譜信息、一級多級質譜數據、未知代謝物代謝途徑等信息，同時FISh 解釋功能還可以通過母藥及代謝物多級質譜信息之間的比對，進一步對代謝位點進行推測（圖5）。
圖5.士的寧未知代謝物檢索鑒定結果
以RT 11.5 min的未知代謝物為例，通過FISh計算，獲知該未知代謝物為羥基化代謝產物，通過FISh解釋功能比對264.1、280.0、323.1、334.2、238.0 m/z等特征碎片，推測出該代謝物為16-Hydroxystrychnine（圖6）。
圖6.士的寧代謝物16-Hydroxystrychnine
使用相同處理方法，共檢測到士的寧26個代謝產物，其中一相代謝產物22個，二相代謝產物4個，見表1。
表1. 士的寧代謝產物鑒定結果
4. 小結：
4.1 Thermo LTQ Orbitrap XL質譜儀將線性離子阱與高分辨靜電場軌道阱Orbitrap 檢測技術相結合，提供優異的性能和出色的多功能性。線性離子阱更高的離子容量能夠高效的捕獲前級離子進行多級碎裂，獲得高質量的多級質譜圖，本實驗通過線性離子阱逐級裂解剖析了士的寧完整裂解機理。Orbitrap技術具備高分辨高質量精度（HR/AM）的能力，本實驗中士的寧代謝產物質量偏差<3 ppm，能夠有效的排除干擾，獲得代謝物準確的元素組成。
4.2 Mass Frontier為Thermo專業的結構解析軟件，利用其豐富的碎裂數據庫（Fragmentation Library），可快速的對士的寧多級碎片結構進行了準確推測和歸屬，在快速解析碎片的同時，可獲得完整的碎片裂解途徑，并可方便的調用查看所引用的文獻情況，保證了碎片解析的準確性。母藥和代謝物存在結構相關性，質譜多級碎裂后可能生成共有碎片，碎片離子檢索（FISh）功能將這種相關性與可能的代謝途徑有機的結合起來，從繁雜的基質樣品質譜信號中準確的篩選到未知代謝物信息，通過比對母藥和代謝物多級質譜信息， FISh解釋功能更可進一步對代謝位點進行推測。