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  • 發布時間:2014-05-15 17:45 原文鏈接: NewObjective納分離噴霧的原理及特點

      電噴霧離子化質譜法(ESI-MS)是在帶電液滴氣溶膠上施加高電壓產生離子的技術。傳統來說,市場上的ESI質譜儀使用的流速范圍在10 μL/min-1 mL/min 。New Objective研發出了更多色譜柱和納噴霧針新產品,包括將納流柱和ESI電噴針組合的PicoFrit色譜柱。為了能使納噴霧的工作效率和重現性最優化,開發了PicoView 納噴霧離子源,配合PicoTip電噴針和PicoFrit色譜柱的使用。數字化PicoView改善了用戶的控制性和靈活性,使用戶在靈敏度和實驗方法上達到一個更高的層次。最近New Objective推出了全新設計的納噴霧產品PicoChip。在積累了超過十五年的納噴霧產品的研發生產,并在綜合顧客意見的基礎上,PicoChip表現出以幫助客戶科研為目標的理念,提供了納噴霧產品前所未有的高靈敏度、高分離度、易操作性。

      電噴霧原理

      對于大多數分析物來說,ESI-MS基本是濃度型檢測器,其信號響應與流動相中分析物濃度呈函數關系,而響應強度或靈敏度和待測物的可電離數量有關。傳統的LC-MS方法,一般使用內徑4.6mm的色譜柱,大于0.5 mL/min流速。為了適應高流速,ESI源普遍通過氣壓輔助噴霧產生氣溶膠。直接將傳統柱與ESI源連接的局限在于,高流速下的氣化電噴霧離子化效率很低,通常只有0.1%或更低,絕大部分樣品被浪費,因為沒有用于產生供檢測的離子流。

      為了更多地利用樣品,應降低柱子出口流動相的體積或降低流速。流速的降低能改善分析物的濃度響應,提高信號的信噪比,因而提高待測物的檢測靈敏度。納流質譜方法是在低流速下(nL/min)的電噴霧和樣品分子離子化,聯合窄內徑色譜柱,如75μm內徑納流柱,250 nL/min 的工作流速,與常規4.6mm內徑的色譜柱相比,其質譜檢測器響應具有更高的信噪比,理論上大約3000倍而實際應用普遍超過500倍靈敏度的提高。在樣品量受到嚴重限制的情況下,比如通過膠帶電泳分離得到的蛋白質,消耗最少的樣品,得到最好的結果是所期盼的。采用75 um內徑的納分離柱,可以容易的達到低飛摩爾(10-15fmol)甚至埃摩爾 (10-18amol)范圍的蛋白檢出量。

      納電噴霧的特征

      電噴霧質譜(ESI-MS)是在氣溶膠上施加高電壓使液滴帶電產生離子的技術。傳統來說,ESI-MS使用的流速范圍在10 μL/min-1 mL/min。由于流出噴針的液體體積相對較大,氣溶膠形成必須依靠氣動霧化和加熱去除溶劑,以得到穩定的噴霧,特別是對高水相含量的液體。當流速降低到nL/min 時,液滴形成就很容易了,只需施加高電壓就可產生噴霧,無需鞘氣和外部熱源。對水或含鹽的流動相,低流速有利于穩定噴霧和改善信號質量。nL/min流速下的電噴霧普遍被認為是“納噴霧”,它已成為一種通用方法用于蛋白質質譜分析。低流速ESI適用于寬組成液體成分,例如對“純”水的穩定噴霧。低流速ESI促進了離子化效率,因為通過噴針的液體更少,產生更小的氣溶膠液滴。低流速ESI允許更長的分析時間,為高端質譜儀的掃描提供足夠的時間,從而獲得結構信息。將納噴霧與納流分離色譜結合,可消除使用鞘液或輔助液引起的信號降低。對常規mL/min流速的ESI-MS 實驗無法得到的方法檢出限,可嘗試通過納噴霧來改進。

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