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  • 發布時間:2021-04-27 11:31 原文鏈接: OB免疫及化學檢測方法中的常見問題及答疑

        1、為什么說“半定量雙聯法”是檢測便隱血的最佳方法?如何進行結果判斷?

        答:可分別參見表1和2

    表1


    免疫法化學法
    特異性
    靈敏度(ug/g stool)高(0.1)較高(50)
    對上消化道出血的漏檢(檢出率)會(約60%)不會(100%)
    鉤狀效應(Hook’s效應)
    半定量不能
    檢測成本
    大批量人群普查不適合適合
    保存、效期不易、短易、長

     表2 . 結果判斷

     

    免疫法

    化學法分析
    陽性(+)陽性(+)確定為陽性結果,化學法可查出其出血程度(半定量)
    陽性(+)陰性(-)確定為陽性結果,但其檢體隱血的含量極微少
    陰性(-)陰性(-)確定為陰性結果
    陰性(-)陽性(+)1、此病人為上消化道微量出血(此種情形可能性較低)2、化學法的陽性結果為食物或藥物所引致的假陽性(此種情形的可能性較高)。3、Hook’s效應導致的免疫法為假陰性。

        2、檢測便隱血的方法是否越靈敏越好?最佳檢測便隱血的靈敏度是多少?

          答:不是。用5lCr標記檢查正常人糞便中每天血液丟失量為0.5±0.4ml(最多可達1.5ml),相當于每克糞便的含量為100-900ìgHb,平均為500ìgHb,故試劑的檢測靈敏度在50ìgHb/g  stool時能查出所有病理及部分生理狀況下的人群,而再提高靈敏度可能只會增加檢測的非病理狀況下的陽性。

        3、兩類方法實測靈敏度的差異。

        答:免疫法的檢查終產物是經過標本稀釋(已做了500倍左右的稀釋處理)后的產物。其實測若以靈敏度為0.1ìgHb/g stool計算,其最終測得最低值也為50ìgHb/g stool。故其糞OB檢查的閾值應定為50ìgHb/g stool較合適。

        4、何為鉤狀效應(Hook’s效應)?其對實驗結果的影響及解決方法。

        答:Hook’s效應為單克隆抗體與所抗的Hb抗原不匹配或消化道出血過多,抗原過剩時造成的假陰性結果。其解決方法為將標本繼續做1:500倍的稀釋后再做實驗。

        5、為什么免疫法會漏檢上消化道出血?

        答:上、下消化道出血以胃底部為分界。

        上消化道出血:

     

    每天出血量與檢測閥值


    結腸
    卟啉實驗2ml2ml
    愈創木脂10-20ml0.5ml
    免疫法100ml0.25ml

             6、在三種化學方法中,為什么選擇“匹拉米洞法”作為首選方法?   

        答:目前常用的三種化學方法及各自特點見下表:


    聯苯胺愈創木脂(水溶、非水溶)匹拉米洞
    致癌性?
    靈敏度
    假陽性率
    成本
    商品化產品
    生產質控方便

        7、匹拉米洞半定量值分幾級?

        答:分5級。

        8、如何避免新鮮蔬菜對化學法的干擾(假陽性)?

        答:多煮并煮熟蔬菜,可全面去除其干擾。

        9、如何進行便隱血標本的稀釋處理(等滲鹽水、蒸餾水、低滲緩沖液)?

        答:化學法用蒸餾水,免疫法用低滲緩沖液;二者禁用等滲鹽水。

        10、為什么要多點采集樣本?

        答:避免采樣誤差。

        11、為什么說“雙聯法”是最適合大批量腸癌篩查的首選方法?

        答:實驗成本低,準確性高、靈敏度高,操作、質量管理方便等。

        12、免疫法有無假陰、陽性?

        答:免疫法也有假陽性,如飲用啤酒等;若檢體的pH值改變:pH≤3時呈假陽性、pH≥10時呈假陰性;大分子蛋白可能包裹Hb并使之不易暴露,直接影響Hb與Hb抗體的結合而導致膠體金法假陰性等。大家可以多做實驗進行探討。


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