P230高效液相色譜儀操作規程及維護保養（一）

1.目的 

建立一個依利特P230高效液相色譜儀的使用、維護保養標準操作程序，使操作過程標準化。 

2.職責 

質量部QC負責本文件的起草，質量部及QC檢驗人員負責本標準的實施。 

3.范圍 

本標準適用于大連依利特P230高效液相色譜儀的使用、維護和保養。 

4.內容 

4.1. 儀器組件、型號 

4.1.1. 儀器組成：P230高壓輸液泵、UV230紫外-可見檢測器、EC2000色譜工作站。 

4.1.2 電源：220V穩壓電源。 

4.2. 操作步驟 

4.2.1. 流動相的配制 

4.2.1.1. 根據各藥品項下規定的配制方法，配制各種單項溶液，用微孔濾膜（φ0.45μm）單向抽濾。純化水系溶液用水膜過濾，有機溶劑（或混合溶劑）用油膜過濾。 

4.2.1.2. 脫氣：配好的流動相需要洗脫排氣泡。方法：用超聲波清洗器清洗排氣泡，時間約10～20分鐘。 

4.2.2. 開機 

4.2.2.1. 打開電源，待電壓穩定后，依次打開“高壓輸液泵”電源、檢測器電源和工作站。 

4.2.2.2. 穩定柱壓：換上流動相，開始下列操作： 清洗、調流速。 

調流速：根據檢品要求調“流速”，未明確“流速”的檢品，調流速使柱壓在適宜范圍內（不得超過40MPa）。                     

具體操作：按“△”“▽”鍵，屏幕顯示 “MENU1”后按“△”或“▽”輸入數字至所需流速和最高和最低壓力,再按“確認”鍵。然后啟動泵看壓力是否超過范圍。 

4.2.2.3. 調波長：根據檢品要求調“波長”。方法：打開“檢測器”電源，按“操作菜單”鍵,屏幕顯示 “MENU1”后按“△”或“▽”鍵進行波長設定,設定是按數字鍵后按 “確認”。 

4.2.3. 打開分析文件 

4.2.3.1. 設置分析方法：根據檢品所需設置分析方法（或直接調出本檢品已保存的方法）等待進樣。 

4.2.3.2. 進樣：用儀器配備的進樣器，或用一次性注射器（規格1ml，管徑較細的好用），吸取一定量的待檢液（不少于20ul。因進樣器定量環自動控制在20ul。），自進樣器注入進樣閥，快速扳動進樣閥手柄，即開始分離，同時啟動數據采集。 

注意（1）：進樣前基線要走平穩，且檢測器已預熱半個小時。 

4.2.3.3.進樣順序：首先插針到進樣閥的底部，后逆時針旋轉到底，進樣品后迅速順時針旋轉到底，然后拔出進樣針。 

4.2.3.4.等樣品分析完畢后基線平穩，方能結束數據采集。 

4.2.3.5、分析結果： 等到所設的時間結束后自動分析。 

4.2.3.6、打印結果：點“報告”項下的打印信息設置選項,進行信息設置后.點擊“文件”菜單先預覽，再打印。 

4.2.4. 實驗完畢后的處理工作 

4.2.4.1. 關閉計算機和檢測器：實驗完畢及時關閉檢測器（便于保護檢測器，甚至可延長檢測器的壽命）；根據提示依次關閉桌面，最后關閉工作站.恒流泵和柱溫箱。 

4.2.4.2. 每次操作完畢后，應及時清理所用物品，廢液倒到廢液容器內，所用的玻璃儀器及時送到洗刷池。實驗臺面、儀器表面用柔軟的抹布擦拭干凈，時刻保持實驗臺和儀器的整潔。 

4.2.5 沖洗 

4.2.5.1. 進樣閥的沖洗：將進樣針插入進樣器，先用流動相或樣品的溶劑，3～5次，再用甲醇沖洗，3～5次；再旋動進樣閥按上法沖洗，3～5次；最后把進樣器上的進樣針拔掉，安上配備的沖洗頭（白色的圓形配件）用甲醇沖洗3～5次，即可。將進樣針插到進樣器上保存，蓋好紅色保護蓋。 

4.2.5.2.色譜柱的沖洗 

（a）含鹽的流動相的沖洗方法：每天操作結束后，先用純化水或含甲醇5%（最高濃度在20%以下）的水沖洗時間約20～30分鐘。再用高濃度甲醇（含甲醇85%以上）溶液沖洗，約30～60分鐘（注：不能直接用有機溶劑沖洗，鹽類易析出，堵塞色譜柱，造成色譜柱永久性損壞；所用水最好是重蒸餾的水。必須抽濾和脫氣）。 

（b）不含鹽的流動相的沖洗方法：每天操作結束后，先用流動相沖洗約10～15分鐘，再用含5%甲醇的水沖洗10～20分鐘。最后用高濃度甲醇（含甲醇85%以上）溶液或純甲醇沖洗，時間約20～30分鐘（注：不能直接用純水沖洗，易造成流動停止。所用水最好是重蒸餾的水。必須抽濾和脫氣）。 

4.2.6. 注意事項 

4.2.6.1. 流動相或單項溶劑需經過0.45μm的微孔濾膜過濾（色譜純的有機溶劑可以不用過濾），以降低色譜柱受污染的程度，延長使用壽命。抽濾流動相或單項溶劑時，應注意濾膜的選擇：抽濾純水或純水溶液時，選用水系濾膜，抽濾分析純有機溶劑或混合溶液中含有有機溶劑，要選用脂（F）濾膜。 

4.2.6.2. 若儀器長時間不用，可定期加電，使儀器預熱一段時間，以免儀器內部件受潮。 

4.2.6.3. 根據需要設定參數。由于每根色譜柱性能、填料各不相同，要依據其特性控制壓力，防止壓力過大導致柱內填料空間發生變化，影響分離效果。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱一般最高工作壓力不能超過40 MPa。 

4.2.6.4. 最后一次進樣完成后，應用流動相沖洗一段時間，以保證洗脫完全，然后照4.2.5.2操作。 

4.2.6.5. 最后根據色譜柱的填料不同，采用不同的溶劑，保存色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱宜用甲醇再生保存。

4.2.6.6. 操作者應細心了解儀器各部件性能。 

4.3 XK96型快速混勻器使用維護SOP 。