PCR儀不同模塊類型分類及應用

　　PCR是分子生物學研究極其重要的工具，是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，基本原理是在試管中模擬細胞內的DNA復制，即人為創造核酸半保留復制條件，使目的DNA在細胞外完成擴增的過程，它可被看作是生物體外的特殊DNA復制。

　　標準PCR儀也叫做終點PCR儀，是指目的基因僅經過預變性、變性、退火、延伸階段產生大量的核酸序列的PCR儀，PE-Cetus公司推出的世界上第一臺PCR自動化熱循環儀屬于此種。根據PCR退火溫度和擴增條件(細胞內/外)，標準PCR又可以分為三類：普通PCR、梯度PCR和原位PCR。需要說明的是，以上三種類型PCR儀并非是對立的，許多普通PCR儀結合了以上兩種或者兩種以上功能。

　　普通PCR儀：一般把一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀，稱之為普通PCR儀。如果要用它做不同的退火溫度則需要多次運行。主要是用作簡單的、對單一退火溫度的目的基因的擴增。主要應用于科研、教學、臨床醫學、檢驗、檢疫等。

　　梯度PCR儀：普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。梯度PCR儀每個孔的溫度可以在指定范圍內按照梯度設置，一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)。由于被擴增的DNA片段不同，其最佳退火溫度也不同，通過梯度設置，可一次性篩選出最佳的退火溫度。這樣既可節省試驗時間，提高實驗效率，又能節約實驗成本。在不設置梯度的情況下亦可當做普通的PCR用。梯度PCR儀多應用于科研、教學機構。

　　原位PCR儀：是將PCR技術的高效擴增與原位雜交的細胞定位結合起來，用于從細胞內靶DNA的定位分析的細胞內基因擴增儀，從而在組織細胞原位檢測單拷貝或低拷貝的特定DNA或RNA序列。原位PCR技術的待檢標本一般先經化學固定，以保持組織細胞的良好形態結構。細胞膜和核膜均具有一定的通透性，當進行PCR擴增時，各種成分，如引物、DNA聚合酶、核苷酸等均可進進細胞內或細胞核內，以固定在細胞內或細胞核內的RNA或DNA為模板，于原位進行擴增。原位PCR儀對于在分子和細胞水平上研究疾病的發病機理和臨床過程及病理的轉變有著重要意義。