PCR試驗的步驟

標準的PCR過程分為三步（如圖所示）：
　　1.DNA變性（90℃-96℃）：雙鏈DNA模板在熱作用下，
　　氫鍵斷裂，形成單鏈DNA
　　2.退火（復性）（40℃-65℃）：系統溫度降低，引物與
　　DNA模板結合，形成局部雙鏈。
　　3.延伸（68℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右最佳的活
　　性）的作用下，以dNTP為原料，從引物的5′端→3′ 端延
　　伸，合成與模板互補的DNA鏈。
　　每一循環經過變性、退火和延伸，DNA含量既增加一倍。
　　現在有些PCR因為擴增區很短，即使Taq酶活性不是最佳也能在很短的時間內復制完成，因此可以改為兩步法，即退火和延伸同時在60℃-65℃間進行，以減少一次升降溫過程，提高了反應速度。