問1：與其他微圖案化（Micropatterning）技術相比，PRIMO的光照圖案化（Photopatterning）技術的優勢有哪些？
答：PRIMO的解決方案給研究者提供實驗操作的完全的自由度和全面的控制，使其可以很容易的優化實驗條件。PRIMO可以快速建立任意形狀的蛋白圖案，以便精確的匹配或重疊不同的蛋白（可以無限制的使用多達3種蛋白，取決于使用的蛋白的種類和它們的相互作用），并控制吸附在基質上的局部的蛋白的密度。
問2：PRIMO可用于哪些應用？
答：（1）基質上的2D光圖案化（2D photopatterning on substrate）；
（2）3D微結構上的光圖案化（Photopatterning on 3D microstructures）；
（3）微制造（Microfabrication），如微流道芯片(microfluidic chip)制造。
問3：用PRIMO解決方案創建一個蛋白圖案要多少時間？
答：創建一個圖案（不包括圖案設計步驟）的總體時間大概在10-15min。光照的時間各不相同，并且必須根據投射的圖案和使用的物鏡進行優化。在每次用UV照射并降解抗污聚合物涂層（anti-fouling
polymer）（抗粘附）的步驟之后，都需要大概5min以便蛋白能吸附在圖案上（時間隨著放置在基質上的蛋白濃度的不同而變化）。
問4：細胞圖案能穩定多久？
答：細胞圖案的穩定的時間長度取決于使用的基質和培養的細胞類型。在一定的條件下，細胞能粘附在蛋白圖案上長達2周。我們的研發團隊會定期開發一些新的實驗步驟供我們的用戶選擇。
問5：用PRIMO能否在水凝膠上打印出蛋白圖案？
答：我們建議采取轉移的技術（transfer technique），用PRIMO在載玻片上打印蛋白圖案，再將載玻片放置在水凝膠上然后移除。如果用UV照射將蛋白光圖案化到水凝膠上，往往會改變水凝膠的物理特性，然后改變一開始設定的實驗條件。
問6：載玻片能提前包被嗎？
答：我們推薦在同一天進行蛋白包被。然而，我們的研發團隊也針對特定的基質定期開發新的實驗方案，使保存用蛋白包被好的載玻片以供后用成為可能。
問7：為什么表面處理對于光照圖案法很重要？
答：光照圖案法是一個“減法”技術。它的首要目標是使用抗污聚合物包被基質，這樣可以防止分子和細胞的粘附。然后在UV光和光活化試劑（PLPP）的共同作用下，使用PRIMO系統來局部降解這個抗粘附表層。
問8：PRIMO能允許在無菌的條件下進行實驗嗎？
答：可以。用PRIMO操作的實驗可以在無菌的環境下進行，即使PRIMO儀器沒有設置在無菌的房間中。這時，我們推薦在生物安全柜（BSC）中進行所有的洗滌和培養步驟，然后將樣本放入一個封閉的培養板，然后放到PRIMO儀器的電動載物臺上。
問9：PRIMO能用來在3D結構上打印蛋白圖案嗎？
答：PRIMO可用來在各種表面上打印圖案，無論是否是平的、卷曲的或是有微結構的。例如，它可以將蛋白打印在微孔板的孔壁上，或PDMS的微柱上。可以按需提供這些內部數據。
問10：是否總是將光活化PLPP試劑和PRIMO配套使用？
答：PLPP可以加速光圖像化過程中，抗污聚合物的降解作用（只需幾秒鐘，而不是幾小時）。然而，使用SU8樹脂或NOA進行微制造（microfabrication）操作是不需要使用PLPP的，因為這些材料在PRIMO光波長（375nm）下是光敏感的。
問11：在基質上需要進行什么樣的抗污聚合物表面處理？
答：我們推薦使用PLL-PEG聚合物。我們定期開發新的實驗方法以促進表面包被層的穩定性。
問12：儀器的視野的深度有多少？
答：當使用20x物鏡時，激光穿透透明基質的視野的深度大概是200-300μm。
問13：儀器的分辨率有多少？
答：當使用20x物鏡時，在大概500x300μm的視野中，整個視野的分辨率是1.2μm。
問14：能做的最大圖案尺寸是多少？
答：PRIMO可以做任意尺寸的圖案，沒有大小限制。
問15：用PRIMO儀器哪些蛋白可以被圖案化？
答：我們的團隊和用戶使用超過10種不同的蛋白，包括：Fibrinogen-488、Fibrinogen‐647、Fibronectin、GFP、Neutravidin‐488、Neutravidin‐647、PLL‐PEG‐Biotin、Protein
A‐647、Streptavidin，和初級、次級抗體。
問16：用PRIMO儀器，哪些基質可以用來進行蛋白的光圖像化操作？
答：PRIMO可用來對各種標準細胞培養基質進行圖案化，包括：PDMS、玻璃、塑料、NOA、SU8。我們的研發團隊也在定期測試和驗證新的基質。可以按需提供這些內部數據。
問17：用PRIMO進行微制造（Microfabrication）時，需要用到哪些光阻材料（Photoresist）？
答：所有在375nm下敏感的光阻材料都可以與PRIMO配套使用。我們的研發團隊主要用SU8光阻材料。
PRIMO表面蛋白涂層法/微圖案法（micropatterning）進行Cryo-ET成像FAQ