Sanger法是根據核苷酸在某一固定的點開始,隨機在某一個特定的堿基處終止,并且在每個堿基后面進行熒光標記,產生以A、T、C、G結束的四組不同長度的一系列核苷酸,然后在尿素變性的PAGE膠上電泳進行檢測,從而獲得可見的DNA堿基序列。
其實就是在四個不同的反應體系中加入不同的終止劑,讓DNA互補鏈的合成分別隨機的停止在A、C、G、T處,然后去跑個高分辨率的膠,跑的最遠的就是第一個堿基,然后依次類推,分別可以讀出其堿基的排序