體外原位成活與失活胞內病原體的診斷

此圖為體外活細胞和死細胞的定量分析。因為失活病原體不能夠吸收DAPI,所以軟件能夠做出宿主細胞中病原體的區別。對樣本進行EB-AO平行染色。StrataQuest識別細胞的胞質(綠色部分),細胞與細胞接觸部分(橘色)。
(A)AO灰階圖用于薄膜的檢測(綠色部分),細胞邊緣的確定(橘色部分)。(B)對粘連細胞進行詳細分析。(C)反向回溯確定巨噬細胞擁有多于2個失活寄生蟲。(E)擁有失活寄生蟲的巨噬細胞的頻率分析。(F)擁有不同數量失活寄生蟲的吞噬細胞的頻率分析。

冰凍切片利用DAPI染色然后TissueQuest進行分析。DAPI的信號指出病原體的DNA并未退化。活檢,活檢,干燥前的病原體仍然具有活性。StrataQuest軟件創建胞核(橘色)和核膜(綠色)。因此,DAPI陽性病原能夠在宿主細胞的胞漿部分進行識別。
此圖為寄生負載的評估。(A)被感染的淋巴腺。灰階圖為DAPI+宿主細胞核和寄生蟲DNA。(B)胞核,胞漿和寄生蟲的重疊影像(C)(D)反向回溯擁有3和5-10寄生蟲的細胞(E)感染細胞的寄生負載。
此實驗中,TissueQuest和StrataQuest軟件能夠檢測如下特點:
1) 寄生負擔
2) 感染細胞的表型
3) 定位
4) 細胞-細胞聯系
后續研究中會著重在宿主-寄生蟲的聯系的分子反應機理,在微生物方向疾病治愈做出提高。