1. 檢驗目的
Symex KX-21血細胞分析儀是用于檢測血細胞(紅細胞、白細胞和血小板)數量和白細胞分類的儀器。檢測血液中血細胞數量的變化對臨床有關疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果具有重要參考價值。
2. 檢測原理
2.1 白細胞、紅細胞及血小板采用電阻抗法進行計數。即在細胞檢測器微孔的兩側各有一個電極,兩電極間通有恒定電流,經過稀釋液(電解質溶液)稀釋的血樣(血細胞)在通過檢測器微孔時,產生了一個電脈沖;脈沖的高低代表細胞體積的大小,脈沖的個數代表細胞的數量。
2.2 血紅蛋白濃度采用 無氰HGB測量法(氧合血紅蛋白法)進行測量。即在稀釋的血樣中加入溶血劑使紅細胞膜破裂釋放出血紅蛋白,后者在瞬時間被轉化生成氧合血紅蛋白,在555nm處其吸光度與只有稀釋液時的吸光度相比較以求出HGB。
3. 標本
3.1 臨床護士抽取病人靜脈血1-2ml置于含EDTA-2K的真空管內抗凝;
3.2 采血后立即送到檢驗科臨檢室;
3.3 血量不夠1ml或血液凝固、溶血或脂血標本不能做檢測。
4 設備和試劑
4.1 Symex KX-21血細胞分析儀(主機號:A3878);新儀器安裝后首先要鑒定,具體步驟見儀器手冊。
4.2 試劑:包括稀釋液、溶血劑和清潔液。
4.3 購買的試劑應放室溫保存,注意防塵、防潮。
4.4 開封后的試劑應盡快用完,超過有效期的試劑不能使用。
5 校準步驟
5.1 Symex KX-21 血細胞分析儀安裝或大修后需要進行校準;
5.2 Symex KX-21血細胞分析儀檢測結果中的全部或某一項不準確,需要進行校準;
5.3 儀器在進行校準前必須對檢測器、血紅蛋白測量池等管道液路系統進行徹底清洗,操作過程詳見Symex KX-21血細胞分析儀使用手冊。
5.4 Symex KX-21血細胞分析儀的校準包括末梢血和全血兩套系統,操作過程詳見該儀器使用手冊。
6 操作步驟
6.1 試劑檢查:開機前檢查試劑是否夠量,有無混濁變質,管道有無扭結,清空廢液桶。
6.2 開機與本底檢測:打開UPS電源開關,等待60秒鐘后,再打開主機電源開關,儀器進行系統檢查后進行試劑本底測試,試劑本底必須滿足下列要求:WBC≤0.3×109/L、RBC≤ 0.02×1012/L、HGB≤2×g/L、PLT≤10×109/L。
6.3 末梢血測量:
6.3.1用加液注射器吸取CELLPACK稀釋液500ul加入到試管中,將采集的20ul末梢血注入到稀釋液中,充分混勻制成稀釋血樣。
6.3.2確認當前LCD畫面為〈準備測量〉狀態。按下< MODE > 鍵,將畫面變換至變換模式畫面,選擇 預先稀釋(PD) ,按< ENTER > 鍵后,進行檢測模式的切換,回到主畫面。
6.3.3將混勻的稀釋血樣,放在進樣針下,按 <START> 鍵進行計數,結果自動打印。
6.4 全血測量:測量之前,確保確認當前LCD畫面處于全血模式(WD)下,將臨床送檢的合格抗凝靜脈血標本編號后放入試管架中,測試前將血液顛倒混勻后,放在進樣針下,按 <START> 鍵進行計數,結果自動打印。
6.5 標本號碼的輸入:按下面板上〈SAMPLE No> 鍵,標本號碼激活,這時輸入需要的標本號碼,如:24 按ENTER 鍵確認,LCD畫面進入〈準備測量〉狀態。
6.6清洗與關機:檢測完畢后,按下〈SHUTDOWN〉鍵,儀器進入關機畫面,將清洗液放在吸樣針下,按 <START> 鍵,儀器自動吸引清潔液,對整個測量系統進行清洗。約5分鐘清洗結束,即可關掉主機。
7 質量控制
7.1 全血質控物
7.2 質控措施(見科內室內質控)
8 干擾因素
8.1嚴重的黃疸或脂血使血紅蛋白結果假性增高;
8.2紅細胞冷凝集可使紅細胞、白細胞和血小板計數結果假性減低,MCV假性增高;
8.3冷凝球蛋白增高使白細胞和血小板計數結果假性增高;
8.4有血小板凝集使血小板計數結果假性減低。
9 計算
按儀器設計原理,只對紅細胞常數(紅細胞平均體積、紅細胞平均血紅蛋白量、紅細胞平均血紅蛋白濃度)進行計算,可根據RBC、HGB及HCT結果求出。
9.1 紅細胞平均體積(MCV)
根據RBC及HCT,由下式求出。
9.2 紅細胞平均血紅蛋白量(MCH)
根據RBC及HGB,由下式來求出。
9.3 紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)
根據HCT及HGB,由下式來求出。
9.4 RDW由血細胞分析儀測量獲得,是反映周圍血紅細胞體積異質性的參數。當紅細胞通過小孔的一瞬間,計數電路得到一個相應大小的脈沖,不同大小的脈沖信號分別貯存在儀器內裝計算機的不同通道,計算出相應當體積及細胞數,統計處理而得RDW。