T4多核苷酸激酶末端標記

用T4標記的5’末端

1．無菌的1.5ml為了離心管置冰浴上順序混合下列組分：

50 pmol合成的寡核苷酸

2.5μl 10×反應緩沖液

10μl γ-[³²P]ATP（33pmol）

1.5μl T4多核苷酸激酶（15U）

滅菌雙蒸水加至25μl

2．37℃溫育30min。

3．當反應物正溫育時，以2000×g離心2min制備Sephadex G-25自旋柱。

4．加入2μl 0.5mol/L EDTA或加熱至68℃ 10min終止反應。將反應混合物裝至自旋柱并于2000×g離心4min。1μl柱洗脫液用液閃計數儀計數。