我的課題涉及Transwell侵襲實驗和Transwell遷移實驗，其他方面的Transwell應用我不太清楚，因此這里主要談談Transwell侵襲實驗。
1．實驗用品：
① Transwell小室：
多種廠家可提供，論壇里常用的是Costar、Corning、BD生產的小室，我們實驗室用的是Chemicon公司的ECM550系列，另有Boyden chamber、Millipore公司的millicell和雕弓滿月射天狼戰友介紹的Thincert。
這些廠家提供的小室，有的已鋪好基質膠，買來就可以用，很方便，但也比較貴，我們實驗室用的Chemicon公司的ECM550系列是已經鋪好膠的，質量很好，但是非常貴，24孔板配套的小室，每個價格約130元，不推薦給大家。BD也有已包被好的，價格不清楚。Coster和Corning公司生產的小室，是論壇里比較常用的，好像是要自己鋪膠，但據說每個小室成本只有40左右，應該比較適合中國國情。
下面是一些戰友提供的價格，具體建議大家聯系代理商咨詢。linanping1979戰友提供的價格：coster的24孔板的transwell的價格是456元RMB,8μm，用于腫瘤的侵襲實驗。iceyxy戰友提供的價格：Millipore的8μm的50個1760RMB,0.4μm的2000多,是一次性的。梅林戰友提供的BD價格： 240RMB一塊（6.5um,24孔,12instert），好像是沒膠的。liguofan說國產的boyden30塊一個。jjyy提供的價格是：corning cat No.3422. 6.5mm transwell with 8.0um prore polycarbonate membrane insert, Qty 48,950人民幣不到。平均每個20元不到。
Transwell小室按照公司的要求，都是一次性使用的。不過其實洗洗泡泡還是可以重復用的。我用的Chemicon公司的ECM554，用完后擦去基質膠，再用胰酶和75%酒精泡，可以把膜洗得很干凈，用前用紫外里外都照30min。sword01戰友提供的處理方法：用棉簽輕輕擦去膠和反面細胞，清水沖洗，超聲清洗，低擋，30min，清水3×5min，蒸餾水3×5min，室溫涼干，用前紫外線小室正面3h，反面6h，微波，低火10min×2。
因為我買的是鋪好膠的，所以沒買Matrigel，二次利用的小室只用來做不需要鋪膠的遷移實驗。以前的Chemicon ECM550系列，膜很結實，擦不壞，可以反復用很多次，但現在的膜已經改用一種很薄很脆的材料，一般只能重復用一次，真黑啊！很多戰友說Costar和Corning也是可以重復用的，大家可以試試。
本人沒見過，有興趣的可以自己研究一下。
另外，根據論壇戰友提供的信息，osmonic公司有專用的膜出售，鼎國生物代理。Transwell小室用過后，可把原來的膜切下，貼上osmonic公司的膜，這樣又可以用了，不過我沒用過，有興趣的可以試試。maojianwen戰友的使用方法： trasnwell小室做一次后，將原來的膜去掉，重新泡酸，泡酒精，使用前照紫外，然后用女士用指甲油（注意用無色較稀的）將osmonic公司的膜貼上，剪掉多余的邊緣。再照紫外。
② 上層培養液：
上層培養液采用無血清培養基，為維持滲透壓，需加入0.05%-0.2% BSA。
③ 細胞：
值得注意的是，有侵襲能力的細胞才可用于Transwell侵襲實驗。建議實驗前先用酶譜法檢測MMPs的表達，特別是MMP-2的表達。如果不清楚細胞MMPs的表達情況，就盲目進行Transwell侵襲實驗，可能會造成不必要的浪費，一次Transwell侵襲實驗花錢少則數百，多則數千，并不是筆小數目，還是小心為妙。
另外，為了讓實驗結果更明顯，可先撤血清讓細胞饑餓12－24h，再進行實驗。
④ 基質膠：
常用的是人工重構基底膜材料Matrigel，主要成分為層黏連蛋白和Ⅳ型膠原，生產廠家有BD、美國Collaborative Rsearch公司等。CaoY戰友的帖這么說的：Matrigel是BD公司生產的，是一種細胞外基質，4度時是液體，在37度會逐漸凝固成膠狀，不可逆。同樣的東西在sigma叫ECM。zhangyong1036戰友提供的價格：BD公司的matrigel 1500左右。
如果購買的小室是已經鋪好基質膠的，那么Matrigel就不需要購買了。
⑤ 下層培養液：
下層常用含5%－10% FBS的培養基，具體濃度根據細胞侵襲力而定，侵襲力弱的細胞可適當提高FBS濃度。下層也可用趨化因子，有戰友將纖維粘連蛋白加入下層培養液作為趨化因子，但個人認為，FBS仍是最合適的。
⑥ 細胞培養板：
常用于Transwell侵襲實驗的細胞培養板有6孔板、12孔板、24孔板等，以24孔最常用。細胞培養板沒什么特殊要求，普通的細胞培養板就可以。但要注意，細胞培養板應當與購買的Transwell小室相配套。
⑦ 此外，膜的下室面可涂上纖維粘連蛋白(fibronectin，FN，Sigma有售)，這樣做的目的是使穿過膜的細胞更好地附著在膜上，也可用膠原（collagen）或明膠（gelatin）。很多戰友認為這不是必須的，而且我也是不涂的，細胞照樣貼壁很好。如果貼壁不好的話可以試試看。linanping1979戰友認為，如果培養時間很長（>24h），細胞還是會掉到下室里面去，所以有條件的話，最好還是在膜下層涂上FN。
另外，值得一提的是，膜下層涂上FN還有一定的趨化作用。
zhangyong1036戰友提供的價格： sigma的fibronectin，價格在1500左右。