UF100尿液分析儀篩檢尿路感染臨床意義的探討

目的：探討UF-100尿液分析儀篩檢尿路感染的臨床意義。

方法：對UF-100作重復性試驗，用UF-100檢測325份尿中細菌和白細胞，同時作定量細菌培養并將結果作比較。用Yerushalmy模式評價2種方法的一致性及UF-100篩檢的靈敏度、特異性等。

結果：重復試驗中，UF-100細菌計數CV值低于細胞計數CV，與定量細菌培養結果比較，細菌計數的篩檢靈敏度為80.0%，特異性為50.4%，陽性預計值為28.7%，陰性預計值為91.0%，假陽性率為39.7%，假陰性率為4.0%，準確率為56.3%。

結論：UF-100具有良好的分析尿液的性能，在臨床尿路感染篩檢時可用細菌一項指標，90%結果陰性的標本可在短時間內篩去，大大減少實驗人員繁復勞動，降低檢驗成本，但應注意假陰性，更不可替代尿定量細菌培養。

關鍵詞：尿路感染；UF-100尿液分析儀；定量細菌培養；篩檢

　　尿路感染是指病原體引起腎臟、輸尿管、膀胱、尿道不同程度的感染，其實驗室診斷主要依賴尿定量細菌培養。一份尿標本從采集、檢查到獲取報告需要3d，且80%的送檢尿標本培養結果為陰性，造成人力和物力資源的嚴重浪費。目前急需一種可靠的省時省力的篩檢方法，篩去大多數細菌培養結果預計為陰性的標本，將結果可能為陽性的標本進一步作為定量細菌培養。

　　日本Sysmex公司生產的UF-100全自動尿液分析儀（以下簡稱UF-100）結合流式細胞技術與電阻抗測定法，通過測定前向散射光、熒光的波幅和強度以及電阻的變化報告12種參數，對尿5種有形成分（紅細胞、白細胞、上皮細胞、管型、細菌）進行分析。為了解UF-100對尿中細菌及白細胞的分析性能，對UF-100用于尿路感染篩檢的臨床可能進行探討，我們對UF-100計數細菌、白細胞作了重復性試驗，對325份疑似尿路感染標本進行UF-100檢測和定量細菌培養，并將結果作比較。

材料和方法

一、尿標本來源

　　325份尿標本來自瑞金醫院臨床微生物科和第六人民醫院檢驗科細菌室。醫務人員嚴格按照中段尿采集指南操作，取可疑患者清潔中段尿10ml置帶蓋的無菌試管中，立即送檢。

二、儀器和材料

　　UF-100全自動尿液分析儀及配套試劑（包括質控品）為日本Sysmex公司產品。血平板與麥康凱平板由上海伊華醫學科技有限公司提供。1μl定量接種環為英為Oxoid公司產品。MicroScan Walk-Away 40及配套細菌鑒定板條為美國Dade公司產品。細菌鑒定儀（VITEK-60、VITEK-2）及配套細菌鑒定板條為法國生物-梅里埃公司產品。

三、方法

1．定量細菌培養和菌種鑒定　

　　收到尿標本后，立即用1μl定量接種環取充分混勻的尿液1環分別接種血平板和麥康凱平板，放（35±1）℃溫箱內孵育18～24h，取出作菌落計數。凡革蘭陰性菌>105cfu/ml、革蘭陽性菌>104cfu/ml為尿定量細菌培養結果陽性，并對這些菌株進一步鑒定到種。

2．UF-100使用方法　

　　工作前先作儀器的每日質控，數據正常時開始檢測。將進樣針插入含充分混勻樣品的試管，按進樣開頭，儀器自動吸取800μl樣品，分析各種參數，記錄分析數據。

3．UF-100測定細菌的精密度評價　　

　　取新鮮尿標本5份，各取10 ml加入無菌試管，每份尿標本重復測10次，記錄數據，求均數（ ）與變異系數（CV）。

4．臨床尿標本檢測　

　　將接種培養基后的尿液置4℃冰箱保存并于當日（采集后10h內）用UF-100尿液分析儀檢測。記錄細菌和白細胞的分析參數，以細菌≥2750/μl，白細胞≥20/μl作為尿路感染的陽性參考值。所測結果與尿定量細菌培養結果比較，用Yerushalmy模式評價UF-100對尿路感染篩檢的敏感性、特異性、陽性/陰性預計值、假陽性/假陰性率和準確率。

結果

一、 用UF-100對細菌、白細胞計數精密度評價結果，見表1。

表1 UF-100計數細菌、白細胞重復性評價

二、 尿定量細菌培養結果

　　325份尿標本中，培養結果陰性共65份，陽性率為20.0%；共分離出73株菌，其中革蘭陽性細菌24株（32.8%），革蘭陰性細菌39株（53.4%），真菌10株（13.7%），見表2。

表2 325份尿標本病原菌的分離與鑒定

二、 UF-100篩檢尿路感染的評價，見表3。

表3 UF-100細菌計數結果與定量細菌培養結果的比較

　　按表3內容采用Yerushalmy模式計算，該方法的靈敏度、特異性、陽性/陰性預計值、假陽性/假陰性率、準確率見表4。

表4　UF-100 2種檢測指標篩檢性能的評價（%）

討論

　　UF-100全自動尿液分析儀是通過流式細胞術及電阻抗測定原理對尿有形成分作分析的，有流體動力、光學、電子等多個系統。吸入800μl尿液后自動加以稀釋和混合，并對細胞、細菌等有形成分作特異性染色，通過加壓使細胞進入充滿鞘液的流室。在鞘液的約束下，細胞排成單列，經流室噴嘴噴出，形成的細胞柱與激光束垂直相交，使激活的細胞產生熒光。流式細胞入口兩端電極間的恒定直流電使有形成分通過時產生與細胞大小呈正比的電阻變化。通過測定前向散射光、熒光的波幅和強度及電阻抗的變化報告12個參數，對細菌、白細胞等5種有形成分進行分析。UF-100的重復性試驗結果表明，儀器具有良好的測試重復性，計數細菌的精密度好于白細胞。這種良好的分析尿中細菌的性能使篩檢尿路感染成為可能。

　　長期以來，尿定量細菌培養一直是尿路感染實驗室診斷的確診方法。按照尿中革蘭陽性菌>104cfu/ml或革蘭陰性菌>105cfu/ml時診斷為尿路感染的標準，在325份標本中有65份檢出病原菌，陽性檢出率為20.0%。分離出73株菌，其中39株為革蘭陰性菌，占53.4，以大腸埃希菌多見（27/39），這些結果與國外文獻報道接近。鑒于尿定量細菌培養可得到患病的直接證據，在本研究中作為金標準。

　　本研究將細菌≥2750/μl、白細胞≥20/μl作為尿路感染的陽性參考值（與國外學者相同），采用細菌計數單一指標時出現13份假陰性結果。分析其病原體時發現有3份糞鏈球菌、3份屎腸球菌、3份真菌、4份大腸桿菌。這些細菌，在國外學者同類研究假陰性標本中也有發現。尿中病原菌在種種因素影響下，體積增大或聚集成簇時，均可被儀器誤作其他顆粒而使結果呈“陰性”，造成漏檢。增加白細胞計數指標，雖可大大增加真陰性例數，但假陰性結果更多，篩檢時可只采用細菌計數這一指標。

　　與260份細菌培養陰性結果相比，UF-100計數細菌出現129份假陽性。這可能是患者采樣前已服用一定量的抗生素，用一般方法培養不出細菌或UF-100檢測時將尿中其他顆粒誤作細菌之故。

　　以定量細菌培養結果為金標準，將細菌計數結果與之比較，UF-100篩檢靈敏度為80.0%，特異性50.4%，陽性預計值為28.7%，陰性預計值為91.0%，假陽性率為39.7%，假陰性率為4.0%，準確率為56.3%，表明該法在臨床使用時有4.0%的假陰性結果，存在漏診的可能性；檢測時可篩除90%結果為陰性的標本，減少實驗人員繁復的勞動并降低檢驗成本。若增加白細胞計數指標，可提高篩檢的特異性和準確率。

　　UF-100操作簡便、快速，僅需70s便可生成打印的檢驗報告，每小時能完成100份標本檢測，可使臨床醫生在第一時間段獲得尿液檢查的有關信息，UF-100檢測有假陰性結果，雖可用于臨床尿路感染的篩檢，但不可替代定量細菌培養。