這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體，并以針對特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針檢測之。 Western使用的探針是抗體，它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合物中的某些特異蛋白進行鑒別和鑒定。
儀器：高壓鍋、電動勻漿機、高速離心機、垂直板電泳轉移裝置、脫色搖床。
試劑：單去污劑裂解液、分離膠、4％濃縮loading、G250考馬斯亮藍溶液、5XSDS上樣緩沖液、電泳緩沖液、轉移緩沖液、10X麗春紅染液、封閉液、TBST、TBS、顯影液、定影液、抗體、ECL化學發光試劑。
雜品與耗材：各種規格的吸頭、離心管和加樣器；各種規格的燒杯、量筒和平皿等玻璃器材；硝酸纖維素膜，乳膠手套，口罩，保鮮膜，X-光片夾，X-光片，計時器，吸水紙。
試劑配制：
（一）母液
34.8mg/ml (200mmol/L)PMSF
PMSF 0.348g
異丙醇 10ml
溶解后，－20℃保存。
10％SDS
SDS 5g
蒸餾水至 50ml
50℃水浴下溶解，室溫保存。如在長期保存中出現沉淀，水浴溶化后，仍可使用。
5mol/LNaF氟化鈉
氟化鈉 2.1g
超純水 10ml
溶解后，-20℃保存。
100mmol/L 激活礬酸鈉
偏礬酸鈉 0.122g
超純水 8ml
加濃鹽酸調節pH至10（顏色變黃），80℃左右熱水浴至溶液無色，室溫冷卻，重調pH至10，重復熱水浴和調整pH的操作至溶液保持無色，定容10ml，-20℃保存。
1.0mol/L Tris?HCl（pH8.0）
Tris (MW121.14) 1.212g
超純水 8ml
溶解后，用濃鹽酸調pH至8.0，最后用超純水定容至10ml，高溫滅菌后室溫下保存。
10％過硫酸胺（AP）
過硫酸胺 0.1g
超純水 1.0ml
溶解后，4℃保存，保存時間為2周。
1.5mol/L Tris?HCl（pH8.8）
Tris (MW121.14) 45.43g
超純水 200ml
溶解后，用濃鹽酸調pH至8.8，最后用超純水定容至250ml，高溫滅菌后室溫下保存。
0.5mol/L Tris?HCl（pH6.8）
Tris (MW121.14) 0.606g
超純水 8ml
溶解后，用濃鹽酸調pH至6.8，最后用超純水定容至10ml，高溫滅菌后室溫下保存。
30％Acr/Bic（29：1）
丙稀酰胺（Acr） 14.5g
甲叉雙丙稀酰胺（Bic） 0.5g
超純水至 50ml
37℃下溶解后，4℃保存。使用時恢復至室溫且無沉淀。
20％Tween20
Tween20 10ml
蒸餾水至 50ml
Tween20比較粘稠，需將大槍頭前端剪掉，將吸口擴大，吸取和移液時應緩慢，避免液體掛壁，混勻后4℃保存。