液相色譜簡介
什么是色譜? 色譜法是一種物理化學分析方法。它利用混合物中組分在兩相間分配系數的差別,當溶質在兩相間作相對移動時,各組分在兩相間進行多次分配,從而使各組分得到分離。 2. 色譜的發展 色譜這一概念是由俄國植物學家Tswett(茨維特)1903提出的,他在一根細長的玻璃管中裝入碳酸鈣粉末,然后將植物綠葉的石油醚萃取液倒入管中,萃取液的色素就被吸附在管上部的碳酸鈣上,再用純凈的石油醚洗脫這些被吸附的色素,于是在碳酸鈣上形成了一圈一圈的色帶,這些色帶被稱為色譜。 經過許多年的發展,“色譜”一詞已涵蓋許多技術領域。新型固定相的發展和氣體、液體以及超臨界流體作為可動相的使用,色譜逐漸成為最為有效的分離分析手段。 本文僅限于離子色譜。不過涉及到的概念與所有其他色譜方法是一樣的。 3. 液相色譜 液相色譜一詞指使用的流動相是液體的色譜方法。可以分為四類: 1. 反相色譜:固定相為非極性物質(......閱讀全文
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
液相色譜維護誤區
??關于標示 1、色譜柱的流向不能改變 在我們常規思維中,色譜柱上標示的流向是不可改變的,每次使用都要遵循。可是,大家有沒有想過這個方向的作用是什么呢?為什么要標示一個使用方向呢? 其實色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的,標示方向的目的就是讓我們在使用中記住流動相從哪個方向流入色譜柱,那么
高效液相色譜原理
以高壓下的液體為流動相,并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。構造可分為高壓輸液泵,色譜柱,進樣器,檢測器以及數據獲取與處理系統等部分。與氣相色譜法相比,液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制,只要求把樣品制成溶液即可,非常適合于分離生物大分子、離子型化合物,不穩定的天然產物以
高效液相色譜原理
色譜法是一種分離技術,試樣混合物的分離過程也就是試樣中各組分在稱之為色譜分離柱中的兩相間不斷進行著的分配過程。 其中的一相固定不動,稱為固定相; 另一相是攜帶試樣混合物流過此固定相的流體(氣體或液體),稱為流動相。 當流動相中攜帶的混合物流經固定相時,其與固定相發生相互作用。由于混合物中各組分在性質
什么叫液相色譜
液相色譜的原理:利用物質在兩相中的差 速遷移來分離不同物質,由于流動相都是液體,所以是液相色譜。根據固定相不同液相色譜又分為液液色譜和液固色譜。
液相色譜的用途
高效液相色譜應用很廣泛,基本能對有機化合物中百分之七十到百分之八十的化合物進行分離與檢測,下面以安捷倫液相色譜技術做為舉例:應用液相色譜用途廣泛,已經成為大多數化學行業和生命科學行業中的標準配置。安捷倫液相色譜和液-質聯用系統正為各種客戶群服務,如藥物研制和生產、蛋白質、食品安全、環境、國土安全和石
制備型液相色譜
制備型液相色譜是一種用于生物學、化學工程領域的物理性能測試儀器,于2017年10月20日啟用。 技術指標 1.流量范圍:0.001-3200 ml/min 2.泵頭最高耐壓:8700 psi 3.紫外-可見檢測器波長范圍:190-700 nm 4.紫外-可見檢測器噪音:+5x10-6 AU。
高效液相色譜特點
①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。 ②高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小于1小時。 ③高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離
液相色譜維護誤區
?? 關于標示 1、色譜柱的流向不能改變 在我們常規思維中,色譜柱上標示的流向是不可改變的,每次使用都要遵循。可是,大家有沒有想過這個方向的作用是什么呢?為什么要標示一個使用方向呢? 其實色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的,標示方向的目的就是讓我們在使用中記住流動相從哪個方向流入色譜柱,那
簡述液相色譜理論
液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相,稱為經典液相色譜法,此方法柱效低、時間長(常有幾個小時)。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在經典液相色譜法的基礎上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
液相色譜的用途
高效液相色譜應用很廣泛,基本能對有機化合物中百分之七十到百分之八十的化合物進行分離與檢測,下面以安捷倫液相色譜技術做為舉例:應用液相色譜用途廣泛,已經成為大多數化學行業和生命科學行業中的標準配置。安捷倫液相色譜和液-質聯用系統正為各種客戶群服務,如藥物研制和生產、蛋白質、食品安全、環境、國土安全和石
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
高效反相液相色譜
實驗方法原理反相色譜(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高,在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式,在生物大分子的反
waters液相色譜學校
下載
Waters液相色譜教程
本資料來自于Waters中國有限公司培訓中心 包括4個文件: 液相色譜教程(一)液相色譜基礎知識A 液相色譜教程(一)液相色譜基礎知識B 液相色譜教程(三)液相色譜實驗操作 液相色譜教程(四)液相色譜柱基礎知識 ? 下載:Waters液相色譜教程
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
高效液相色譜原理
液相色譜儀是一款以用戶為核心的智能化的色譜儀,具有常規HPLC的基本性能,并擴展了更多智能化的功能,能很好的滿足用戶的各類不同的應用要求,使用戶能更加輕松的使用,并獲得準確的分析數據。一、原理:高效液相色譜法的原理是在原始的經典色譜法基礎上面引用氣象色諧的理論,色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成
液相色譜保養知識
1、? 色譜柱長時間不用,存放時,柱內應充滿溶劑,兩端封死(如ACN適于反相色譜柱,正相色譜柱用相應的有機相)2、? 對于手動進樣器,當使用緩沖溶液時,要用水沖洗進樣口,同時搬動進樣閥數次,每次數毫升。3、流動相使用前必須過濾,不要使用多日存放的蒸餾水(易長菌)。4、帶seal-wash的1100,
高效液相色譜原理
以高壓下的液體為流動相,并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。構造可分為高壓輸液泵,色譜柱,進樣器,檢測器以及數據獲取與處理系統等部分。與氣相色譜法相比,液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制,只要求把樣品制成溶液即可,非常適合于分離生物大分子、離子型化合物,不穩定的天然產物以
高效液相色譜原理
液相色譜儀是一款以用戶為核心的智能化的色譜儀,具有常規HPLC的基本性能,并擴展了更多智能化的功能,能很好的滿足用戶的各類不同的應用要求,使用戶能更加輕松的使用,并獲得準確的分析數據。一、原理:高效液相色譜法的原理是在原始的經典色譜法基礎上面引用氣象色諧的理論,色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成
液相色譜保養知識
1、? 色譜柱長時間不用,存放時,柱內應充滿溶劑,兩端封死(如ACN適于反相色譜柱,正相色譜柱用相應的有機相)2、? 對于手動進樣器,當使用緩沖溶液時,要用水沖洗進樣口,同時搬動進樣閥數次,每次數毫升。3、流動相使用前必須過濾,不要使用多日存放的蒸餾水(易長菌)。4、帶seal-wash的1100,
液相色譜工作原理
系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動時,經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被
高效液相色譜柱
一、怎樣選擇色譜柱現代高效液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,必須對此有一定的認識和了解。(1)硅膠基質填料:1、正相色譜正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團,如胺基團(NH2,APS)和氰基團(CN,C
高效液相色譜技術
高效液相色譜(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是化學、生物化學與分子生物學、醫藥學、農業、環保、商檢、藥檢、法檢等學科領域與專業最為重要的分離分析技術,是分析化學家、生物化學家等用以解決他們面臨的各種實際分離分析課題必不可缺少的工具。國際市場
液相色譜柱再生
1、色譜柱的使用說明:(1)色譜柱使用前注意事項:色譜柱的儲存液無特殊說明,均為評價報告所示的流動相。在使用前,一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類 ①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrow bore),內徑1~2mm,柱長10~20cm; ③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm; ④半制備柱,內徑>5mm; ⑤實驗室制備柱,內徑20~4
高效反相液相色譜
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 反相色譜(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高
如何使用液相色譜
1.電源準備打開穩壓器電源開關,須待電壓指示至220V后,才能開啟其他有關設備。2.LC-600高效液相色譜儀的準備試劑:三氟乙酸乙腈超純水(Millipore超純水)冰乙酸溶液配置:貯液瓶與流動相的準備A液0.1%三氟乙酸(三氟乙酸1ml,超純水999ml)室溫保存B液60%乙腈(乙腈600ml,