柱色譜法分離條件的探索
柱色譜法分離條件的探索柱色譜法的實驗條件,例如選用什么吸附劑和洗脫劑較好,各個組分按什么順序從柱中洗脫出來,每一分洗脫液中是含單一組分或就含幾種沒有分開的組分等,都可以在薄層上進行探索和檢驗。薄層上所有的展開劑雖不完全照搬柱色譜法上,但仍有參考價值。......閱讀全文
色譜法的分離原理
凝膠色譜,又稱空間排阻色譜。它是利用某些凝膠對混合物各組分因分子量不同,其阻滯作用也不同而進行分離、分析的方法。凝膠色譜的分離要理和其它色譜法不同,它類似于分子篩的作用,但凝膠的孔徑要比分子篩大得多,一般為幾百至幾千埃。色譜柱內填充具有一定大小孔穴的凝膠。當樣品進入色譜柱后,不同大小的樣品分子(圖1
色譜法的分離原理
溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時,由于與固定相(station phase)發生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定相中滯留時間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。 HPLC是在經典的液相色譜法基礎上發展起來的,其以液體作為流動相,并
簡述高效液相色譜法色譜柱的系統適用性和分離度
1、系統適用性 按各品種項下要求對儀器進行適用性試驗,即用規定的對照品對儀器進行試驗和調整,應達到規定的要求;或規定分析狀態下色譜柱的最小理論板數、分離度和拖尾因子。 2、分離度 定量分析時,為便于準確測量,要求定量峰與其他峰或內標峰之間有較好的分離度。分離度(R)的計算公式為:R=2(t
快速柱色譜法
快速柱色譜法是1978年發展起來的一種替代長柱色譜法的方法。該方法旨在從混合物中分離組分,從而純化它。它是從現有的長柱色譜技術建立起來的,耗時且常常不令人滿意。簡而言之,快速柱色譜法使樣品通過填充有凝膠的柱,凝膠將樣品分離。快速柱色譜的創始人Still和同事一直在使用中壓色譜和短柱色譜來替代長柱色譜
柱色譜法的裝柱方式是什么?
裝柱子(添硅膠)時,有兩種方法:即濕法裝柱和干法裝柱。
關于柱色譜法的裝柱方法介紹
裝柱子(添硅膠)時,有兩種方法:即濕法裝柱和干法裝柱,二者各有優劣。不論干法還是濕法,硅膠(固定相)的上表面一定要平整,并且硅膠(固定相)的高度一般為15cm左右,太短了可能分離效果不好,太長了也會由于擴散或拖尾導致分離效果不好。 濕法裝柱是先把硅膠用適當的溶劑拌勻后,再填入柱子中,然后再加壓
色譜柱分離經驗
柱子可以分為:加壓,常壓,減壓。壓力可以增加淋洗劑的流動速度,減少產品收集的時間,但是會減低柱子的塔板數。所以其他條件相同的時候,常壓柱是效率最高的,但是時間也最長,比如天然化合物的分離,一個柱子幾個月也是有的。減壓柱能夠減少硅膠的使用量,感覺能夠節省一半甚至更多,但是由于大量的空氣通過硅膠會使溶劑
色譜柱分離原理
原理很簡單,就是相似相溶的原理,相溶的停留時間長,極性不相溶的儀時間短。
色譜柱分離經驗
色譜柱子可以分為:加壓,常壓,減壓。????壓力可以增加淋洗劑的流動速度,減少產品收集的時間,但是會減低柱子的塔板數。所以其他條件相同的時候,常壓柱是效率最高的,但是時間也最長,比如天然化合物的分離,一個柱子幾個月也是有的。????減壓柱能夠減少硅膠的使用量,感覺能夠節省一半甚至更多,但是由于大量的
色譜柱分離經驗
色譜柱可以分為:加壓、常壓、減壓色譜柱。壓力可以增加淋洗劑的流動速度,減少產品收集的時間,但是會減低柱子的塔板數。所以其他條件相同的時候,常壓柱是效率最高的,但是時間也最長,比如天然化合物的分離,一個柱子幾個月也是有的。減壓柱能夠減少硅膠的使用量,感覺能夠節省一半甚至更多,但是由于大量的空氣通過硅膠
液相色譜柱選擇的條件
填料基質 1.硅膠基質:純度高本錢低,強度大,化學修飾輕易,但pH值范圍有限。大多硅膠基質填料在pH2-8之間穩定,但經過特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩定在pH1.5-10。 2.聚合物基質:應用pH值范圍寬,溫度穩定(高溫可以達到80度以上),機械強度小。 顆粒外形 大多現代HPLC填料都
色譜柱對分析條件的要求
色譜柱柱長:一般講,柱管增長,可改善分離能力,短則組分流出的快些;色譜柱柱內徑小分離效果好,柱內徑大處理量大,但柱內徑過大,將導致擔體不能均勻地分布在色譜柱中。分析用柱管一般內徑為3-6毫米。?? ?柱溫:是一個重要的操作變數,直接影響分離效能和分析速度。選擇柱溫的根據是混合物的沸點范圍,固定液的配
選擇合適尺寸排阻色譜法分離蛋白質—選擇合適的色譜柱
(1)粒徑和柱長 在近年來SEC色譜柱技術得到發展之前,大多數使用的SEC色譜柱的直徑通常相對較大,通常為7.8 mm,長度為150至300 mm。由于使用了較大的顆粒,因此需要較長的色譜柱長度,其中大多數顆粒的機械強度不高,必須在相對較低的壓力下使用。SEC色譜柱技術的最新趨勢集中在開發具有
柱色譜法的技術原理
柱層析技術(Column chromatography) 又稱柱色譜技術,主要原理是根據樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數不同,經多次反復分配將組分分離開來。
操作條件對于色譜分離的影響
操作條件對于色譜分離有很大影響。一、柱長,柱內徑:一般講,柱管增長,可改善分離能力,短則組分餾出的快些;柱內徑小分離效果好,柱內徑大處理量大,但柱內徑過大,將導致擔體不能均勻地分布在色譜柱中。分析用柱管一般內徑為3-6毫米,柱長為1-4米。二、柱溫:是一個重要的操作變數,直接影響分離效能和分析速度。
質壁分離復原的主要條件
被實驗的細胞必須有細胞壁、大液泡。一般使用洋蔥外表皮細胞與蔗糖溶液。溶液濃度要把握好,質壁分離后,不能擱置太久,盡量令其馬上復原,否則細胞失活。
氣相色譜分離條件的選擇
一.載氣及流速 1. 載氣對柱效的影響:主要表現在組分在載氣中的擴散系數D m(g)上,它與載氣分子量的平方根成反比,即同一組分在分子量較大的載氣中有較小的D m(g) 。根據速率方程: (1)渦流擴散項與載氣流速無關; (2)當載氣流速 u 小時,分子擴散項對柱效的影響是主要
操作條件對色譜分離的影響
操作條件對于色譜分離有很大影響。柱長,柱內徑:一般講,柱管增長,可改善分離能力,短則組分餾出的快些;柱內徑小分離效果好,柱內徑大處理量大,但柱內徑過大,將導致擔體不能均勻地分布在色譜柱中。分析用柱管一般內徑為3-6毫米,柱長為1-4米。柱溫:是一個重要的操作變數,直接影響分離效能和分析速度。選擇柱溫
氣相色譜分離條件的選擇
一.載氣及流速1. 載氣對柱效的影響:主要表現在組分在載氣中的擴散系數D m(g)上,它與載氣分子量的平方根成反比,即同一組分在分子量較大的載氣中有較小的D m(g) 。根據速率方程:(1)渦流擴散項與載氣流速無關;(2)當載氣流速 u 小時,分子擴散項對柱效的影響是主要的,因此選用分子量較大的載氣
氣相色譜分離條件的選擇
一.載氣及流速1. 載氣對柱效的影響:主要表現在組分在載氣中的擴散系數D m(g)上,它與載氣分子量的平方根成反比,即同一組分在分子量較大的載氣中有較小的D m(g) 。根據速率方程:(1)渦流擴散項與載氣流速無關;(2)當載氣流速 u 小時,分子擴散項對柱效的影響是主要的,因此選用分子量較大的載氣
紙色譜法的分離原理
紙纖維為載體,吸著在其上的水為固定相屬于分配色譜,有正反相之分。依據分配系數的不同而達到分離極性或親水性強的組分,K大,Rf值小,極性弱或親脂性強的組分,K小,Rf值大。
液相色譜法的分離原理
液相色譜法的分離機理是基于混合物中各組分對兩相親和力的差別。根據固定相的不同,液相色譜分為液固色譜、液液色譜和鍵合相色譜。應用最廣的是以硅膠為填料的液固色譜和以微硅膠為基質的鍵合相色譜。根據固定相的形式,液相色譜法可以分為柱色譜法、紙色譜法及薄層色譜法。按吸附力可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜
液相色譜法的分離原理
液液色譜法按固定相和流動相的極性不同可分為正相色譜法(NPC)和反相色譜法(RPC)。 反相色譜法 一般用非極性固定相(如C18、C8);流動相為水或緩沖液,常加入甲醇、異丙醇、乙腈、丙酮、四氫呋喃等與水互溶的有機溶劑以調節保留時間。適用于分離非極性和極性較弱的化合物。RPC在現代液相色
紙色譜法的分離原理
紙纖維為載體,吸著在其上的水為固定相屬于分配色譜,有正反相之分。依據分配系數的不同而達到分離極性或親水性強的組分,K大,Rf值小,極性弱或親脂性強的組分,K小,Rf值大。
離子色譜法的分離原理
用離子交換樹脂為固定相,電解質溶液為流動相。以電導檢測器為通用檢測器,為消除流動相中強電解質背景離子對電導檢測器的干擾,設置了抑制柱。試樣組分在分離柱和抑制柱上的反應原理與離子交換色譜法相同。以陰離子交換樹脂(R-OH)作固定相,分離陰離子(如Br-)為例。當待測陰離子Br-隨流動相(NaOH)進入
液相色譜法的分離原理
液液色譜法按固定相和流動相的極性不同可分為正相色譜法(NPC)和反相色譜法(RPC)。 反相色譜法 一般用非極性固定相(如C18、C8);流動相為水或緩沖液,常加入甲醇、異丙醇、乙腈、丙酮、四氫呋喃等與水互溶的有機溶劑以調節保留時間。適用于分離非極性和極性較弱的化合物。RPC在現代液相色
色譜法分離的優缺點
優點:分離效率高,分析速度快,檢驗靈敏度高,樣品用量少,選擇性好,多組分同時分析,易于自動化。缺點:定性能力較差。色譜分離法:在工業上應用色譜分析原理分離性質近似組分的方法。使溶液分批通過垂直的填充吸附劑固定床,將各種組分分離精制。色譜柱內的填充吸附劑是多孔的惰性固體,用非揮發性的惰性液體涂漬。被分
液相色譜法的分離原理
液液色譜法按固定相和流動相的極性不同可分為正相色譜法(NPC)和反相色譜法(RPC)。 反相色譜法 一般用非極性固定相(如C18、C8);流動相為水或緩沖液,常加入甲醇、異丙醇、乙腈、丙酮、四氫呋喃等與水互溶的有機溶劑以調節保留時間。適用于分離非極性和極性較弱的化合物。RPC在現代液相色譜中應用
LCGC博客:探索用于HILIC分離的固定相
幾年前我在一次會議上發言,正在描述我們使用混合模式色譜以及它幫助我們解決的難題。當我描述使用混合模式色譜柱時需要考慮(并優化)的變量的數量和類型時,聽眾中會有嚎叫,這些抱怨主要集中在復雜性以及這些方法如何穩定,而我們已經有足夠的變量來考慮,我們不需要更多的選擇性等等。 親水相互作用液相色譜(H
硅膠柱色譜結合高速逆流色譜法分離純化丹參中丹參酮
摘 要:目的建立硅膠柱色譜結合高速逆流色譜(HSCCC)法分離純化丹參中丹參酮的方法。方法丹參粗提物經硅膠柱色譜分離,得到組分F1、F2,分別采用石油醚-醋酸乙酯-甲醇-水(4∶3∶4∶2)、(8∶5∶8∶3)的溶劑系統進行HSCCC分離,下相為流動相,體積流量2.0 mL/min,轉速850 r/