蛋白質純度測定實驗
實驗步驟在評價樣品純度之前，首先需要鑒定待測雜質的類型，如核酸、碳水化合物、脂質、無關蛋白質、同工酶類、失活蛋白質，進而確定在特定溶液條件中, 能夠區分假定雜質和目標蛋白質的理化特性 (化學分析或物理特征）。而純度則是指待測雜質含量低于某個特定水平。需要注意的是，上述說明中并沒有要求描述雜質的性質。純化過程可能已將某一雜質的濃度降低到檢測下限以下，但色譜峰中還有殘留。毫無疑問，表觀純度取決于所選擇的測定方法及其靈敏度。由于大多數分離方法都能夠有效地去除非蛋白質類雜質，因此本章節將主要介紹蛋白質樣品中蛋白質類雜質的檢測方法。有關核酸、脂類、碳水化合物雜質的檢測方法在本系列其他卷中有所介紹。隨著蛋白質類生物制品的流行, 蛋白質純度已經成為藥品管理的重大問題。人用藥品注冊技術要求國際協調會 (TheInternationalConferenceonHarmonisation,ICH) 關于生物制品的質量指導原則（ICHQ6B，1998......閱讀全文
蛋白質純度測定實驗
實驗步驟在評價樣品純度之前，首先需要鑒定待測雜質的類型，如核酸、碳水化合物、脂質、無關蛋白質、同工酶類、失活蛋白質，進而確定在特定溶液條件中, 能夠區分假定雜質和目標蛋白質的理化特性 (化學分析或物理特征）。而純度則是指待測雜質含量低于某個特定水平。需要注意的是，上述說明中并沒有要求描述雜質的性質。
蛋白質純度測定實驗
蛋白質純度測定實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗步驟 在評價樣品純度之前，首先需要鑒定待測雜質的類型，如核酸、碳水化合物、脂
蛋白質純度測定實驗（一）
在評價樣品純度之前，首先需要鑒定待測雜質的類型，如核酸、碳水化合物、脂質、無關蛋白質、同工酶類、失活蛋白質，進而確定在特定溶液條件中, 能夠區分假定雜質和目標蛋白質的理化特性 (化學分析或物理特征）。而純度則是指待測雜質含量低于某個特定水平。需要注意的是，上述說明中并沒有要求描述雜質的性質。
蛋白質純度測定實驗（二）
方法制樣的方法根據所選用電泳方法的性質而定。讀者可參考本卷其他章節中有關非變性凝膠電泳和等電聚焦電泳的討論。最常用的 SDS 凝膠電泳是蛋白質純度檢測的「第一線」(front-line) 方法。由于通常純度評價是非定量的，因此不需要關心諸如極端大小分子的非線性遷移、蛋白質修飾造成的遷移異常以
電導法測定水的純度實驗
實驗方法原理電解質水溶液中的離子在電場作用下能產生定向移動，因此，具有電導率。其導電能力的大小稱電導。在一定范圍內，電解質溶液的濃度與其電導率的大小成線性關系。所以，根據測量水的電導率可知水中離子的濃度，即知道了水的純度。測量電導的方法，可用兩個電極插入溶液中，測量兩電極間的電阻 R。R＝ρ（L/A
電導法測定水的純度實驗
實驗方法原理 電解質水溶液中的離子在電場作用下能產生定向移動，因此，具有電導率。其導電能力的大小稱電導。在一定范圍內，電解質溶液的濃度與其電導率的大小成線性關系。所以，根據測量水的電導率可知水中離子的濃度，即知道了水的純度。測量電導的方法，可用兩個電極插入溶液中，測量兩電極間的電阻 R。R＝ρ（L/
核酸純度、濃度與分子量測定實驗
實驗方法原理?溴化乙錠是一種熒光染料，在凝膠電泳中，EB分子可嵌入核酸雙鏈的堿基對之間，在紫外線激發下發出熒光,其強度與DNA量成正比。同時核酸最大吸收波長在260 nm，在此波長下，吸光度1 A相當于一定濃度的核酸，可以通過A260/A280 的比值，來測定所得核酸的純度。實驗材料?DNA試劑
核酸純度、濃度與分子量測定實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 溴化乙錠是一種熒光染料，在凝膠電泳中，EB分子可嵌入核酸雙鏈的堿基對之間，在紫外線激發下發出熒光，其強度與DNA量成正比。同時核酸最大吸收波長在260 nm，在此波長下，吸光度1 A相當于一定濃度的核酸，可以通過A260/A
SDSPAGE測定蛋白質分子量及蛋白質的純度鑒定
一、實驗目的與原理蛋白質在聚丙烯酰胺凝膠中電泳時，它的遷移取決于它所帶電荷以及分子大小和形狀等因素。1967年Shapiro等人發現，如果在聚丙烯酰胺系統中加入陰離子去污劑十二烷基磺酸鈉（SDS），大多數蛋白質能與SDS按一定比例結合，即每克蛋白質結合1.4g的SDS－復合物都帶上相同密度的負電荷，
蛋白質純度分析方法介紹
在評價樣品純度之前，首-先需要鑒定待測雜質的類型，如核酸、碳水化合物、脂質、無關蛋白質、同工酶類、失活蛋白質，進而確定在特定溶液條件中, 能夠區分假定雜質和目標蛋白質的理化特性 (化學分析或物理特征）。而純度則是指待測雜質含量低于某個特定水平。需要注意的是，上述說明中并沒有要求描述雜質的性質。純化過
蛋白質含量測定實驗
實驗材料?蛋白質試劑、試劑盒?牛血清NaCl考馬斯亮藍儀器、耗材?分光光度計離心機實驗步驟 ? 分別在兩組微量離心管中各加入0.5 mg/ml 牛血清白蛋白，以 0.15 mmol/l NaCl補足至100 μl，同時以兩管100 μl 的0.15 mmol/l NaCl作空白對照。2.? 每管各加
蛋白質含量測定實驗
Bradford法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒
蛋白質含量測定實驗
folin—酚試劑法 考馬斯亮藍法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法，由于其試劑乙的配制較為困難（
腦脊液蛋白質總量測定實驗
實驗方法原理 飽和硫酸銨可以沉淀球Pr．正常腦脊液中球Pr含量很低．故現陽性結果，若球Pr增多，則Ross－jones試管陽性，除去球Pt后再以乙酸沸法則ALB（白Pr）．實驗材料 腦脊液試劑、試劑盒 飽和硫酸銨溶液乙酸實驗步驟 一、實驗試劑：l、飽和硫酸銨溶液，硫酸銨85g加蒸餾水至100ml即得
蛋白質的定量測定實驗
試劑、試劑盒 Bradford 試劑牛血清白蛋白 (BSA) 標準溶液Tris-緩沖鹽溶液儀器、耗材 微量滴定板分光光度計或酶聯儀實驗步驟 材料與設備牛血清白蛋白 (BSA) 標準溶液 (2 mg/ml 水溶液）Bradford 試劑（CoomassiePlus,PierceChemicalCo.)
蛋白質的定量測定實驗
試劑、試劑盒Bradford 試劑牛血清白蛋白 (BSA) 標準溶液Tris-緩沖鹽溶液儀器、耗材微量滴定板分光光度計或酶聯儀實驗步驟材料與設備牛血清白蛋白 (BSA) 標準溶液 (2 mg/ml 水溶液）Bradford 試劑（CoomassiePlus,PierceChemicalCo.)分光光
蛋白質含量的測定實驗
FOLIN酚法 考馬斯亮藍法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 FOLIN 酚法所用的試劑有兩部分組成。試劑甲可與蛋白質中的肽鍵起顯色反應, 試劑乙在堿性條件下極
蛋白質紫外分光測定實驗
蛋白質紫外分光測定實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵，因此蛋白質具有吸收紫外線的性質，吸收高峰在280nm波長處
蛋白質紫外分光測定實驗
實驗方法原理由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵，因此蛋白質具有吸收紫外線的性質，吸收高峰在280nm波長處。在此波長范圍內，蛋白質溶液的光吸收值（A280）與其含量呈正比關系，可用作定量測定。由于核酸在280波長處也有光吸收，對蛋白質的測定有干擾作用，但核酸的最大吸收峰在260nm處
蛋白質紫外分光測定實驗
實驗方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵，因此蛋白質具有吸收紫外線的性質，吸收高峰在280nm波長處。在此波長范圍內，蛋白質溶液的光吸收值（A280）與其含量呈正比關系，可用作定量測定。由于核酸在280波長處也有光吸收，對蛋白質的測定有干擾作用，但核酸的最大吸收峰在260nm
腦脊液蛋白質總量測定實驗
實驗方法原理飽和硫酸銨可以沉淀球Pr．正常腦脊液中球Pr含量很低．故現陽性結果，若球Pr增多，則Ross－jones試管陽性，除去球Pt后再以乙酸沸法則ALB（白Pr）．實驗材料腦脊液試劑、試劑盒飽和硫酸銨溶液乙酸實驗步驟一、實驗試劑：l、飽和硫酸銨溶液，硫酸銨85g加蒸餾水至100ml即得．2、0
蛋白質含量的測定實驗
實驗方法原理 FOLIN 酚法所用的試劑有兩部分組成。試劑甲可與蛋白質中的肽鍵起顯色反應, 試劑乙在堿性條件下極不穩定, 易被酚類化合物還原成藍色(蛋白質中的酚基將磷鉬酸-磷鎢酸還原成藍色復合物)。在一定條件下, 藍色強度與蛋白質的量成正比, 范圍約在25～250 μg/ ml 蛋白質濃
蛋白質的定量測定實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 Bradford 試劑 牛血清白蛋白 (BSA) 標準溶液 Tris-緩沖鹽溶液 儀器、耗材
蛋白質紫外分光測定實驗
蛋白質紫外分光測定實驗 實驗方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵，因此蛋白質具有吸收紫外線的性質，吸收高峰在280nm波長處。在此波長范圍內，蛋白質溶液的光吸收值（A280）與其含量呈正比關系，可用作定量測定。
蛋白質紫外分光測定實驗
實驗方法原理 由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵，因此蛋白質具有吸收紫外線的性質，吸收高峰在280nm波長處。在此波長范圍內，蛋白質溶液的光吸收值（A280）與其含量呈正比關系，可用作定量測定。 由于核酸在280波長處也有光吸收，對蛋白質的測定有干擾作用，但
蛋白質紫外分光測定實驗
由于蛋白分子中酪氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共軛雙鍵，因此蛋白質具有吸收紫外線的性質，吸收高峰在280nm波長處。在此波長范圍內，蛋白質溶液的光吸收值（A280）與其含量呈正比關系，可用作定量測定。 由于核酸在280波長處也有光吸收，對蛋白質的測定有干擾作用，但核酸的最大吸收峰在
蛋白質純度鑒定的方法有哪些
電泳，蛋白質電泳 現在常用就是 SDS 聚丙乙烯酰胺凝膠電泳特點1）靈敏度高 2）測定快速、簡便 3）干擾物質少液相色譜高效液相色譜是完全可以純化蛋白質并且進行蛋白質純度鑒定的但建議還是使用蛋白質電泳 最主流 最有效的方法
如何用高效液相色譜進行蛋白質的純度檢測及含量測定
尋找鈣蛋白質的標樣配置不同濃度京HPLC分析后作一條工作曲線，然后取待測樣品測試，根據工作曲線可以求出樣品中該蛋白質的真實含量，從而計算出純度/含量；至于分子量，需要用凝膠滲透色譜（GPC）進行測定。
如何用高效液相色譜進行蛋白質的純度檢測及含量測定
尋找鈣蛋白質的標樣配置不同濃度京HPLC分析后作一條工作曲線，然后取待測樣品測試，根據工作曲線可以求出樣品中該蛋白質的真實含量，從而計算出純度/含量；至于分子量，需要用凝膠滲透色譜（GPC）進行測定。
如何用高效液相色譜進行蛋白質的純度檢測及含量測定
尋找鈣蛋白質的標樣配置不同濃度京HPLC分析后作一條工作曲線，然后取待測樣品測試，根據工作曲線可以求出樣品中該蛋白質的真實含量，從而計算出純度/含量；至于分子量，需要用凝膠滲透色譜（GPC）進行測定。