臺盼藍(trypanblue)排斥實驗
實驗方法原理臺盼藍染料不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色,但死亡細胞的細胞膜通透性增加,可使染料通過細胞膜進入細胞內,使死細胞著色呈藍色。是最常用的檢測細胞活率的方法。實驗材料細胞試劑、試劑盒臺盼藍生理鹽水儀器、耗材顯微鏡玻片蓋玻片滴管實驗步驟1. 將待染色細胞稀釋至所需濃度。(方法及濃度范圍與細胞計數相同) 2. 每0.1 ml 細胞懸夜約加新鮮配置的染液一小滴,室溫下染3~5 min 。3. 染色過的細胞材料,取一滴細胞懸液置玻片上,加蓋玻片后放在高倍鏡下觀察。4. 死亡的細胞著淺藍色并膨大,無光澤;活細胞不著色并保持正常形態,有光澤。計數100~200個白細胞。5. 統計未染色細胞。可按公式計算出細胞活力。 細胞活力(%)=未染色的細胞數/觀察的細胞總數 × 100。展開 注意事項1. 染色時間不能太長,否則活細胞也會逐......閱讀全文
臺盼藍(trypan-blue)排斥實驗
實驗方法原理臺盼藍染料不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色,但死亡細胞的細胞膜通透性增加,可使染料通過細胞膜進入細胞內,使死細胞著色呈藍色。是最常用的檢測細胞活率的方法。實驗材料細胞試劑、試劑盒臺盼藍生理鹽水儀器、耗材顯微鏡玻片蓋玻片滴管實驗步驟1. ?將待染色細胞稀釋至所需濃度。(方法及
臺盼藍(trypan-blue)排斥實驗
?實驗方法原理 臺盼藍染料不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色,但死亡細胞的細胞膜通透性增加,可使染料通過細胞膜進入細胞內,使死細胞著色呈藍色。是最常用的檢測細胞活率的方法。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 臺盼藍生理鹽水儀器、耗材 顯微鏡玻片蓋玻片滴管實驗步驟 1. ?將待染色細胞稀釋至所需濃
臺盼藍(Trypan-Blue)染色法技術要點(二)
在下面的小視頻中,臺盼藍染料被緩緩加入在室溫培養了168小時的Jurkat細胞。大家可以清楚地看到部分細胞被染成藍色后迅速膨脹和破裂,染色隨即變淺,細胞失去形態變成“氣球“。整個過程僅幾秒鐘。?有視頻為證,這些“氣球“狀物體就是死細胞的殘骸。但當我們在顯微鏡下計數時,這些“氣球”由于顏色太淺通常不會
臺盼藍(Trypan-Blue)染色法技術要點(三)
臺盼藍濃度不同的臺盼藍濃度對細胞染色會有不同影響嗎?Nexcelom的科學家們將同一Jurkat細胞樣本與0.4%,0.2%,0.1%,0.05%和0.025%的臺盼藍以1:1比例混合,以下是部分濃度染色后的細胞圖片:?下面的直方圖統計了不同濃度臺盼藍檢測到的死細胞(較深著色)和“氣球”狀細胞的濃度
臺盼藍(Trypan-Blue)染色法技術要點(一)
臺盼藍 (Trypan Blue) 染色法是組織和細胞培養中最常用的死細胞鑒定染色方法之一。正常的活細胞,胞膜結構完整,能夠排斥臺盼藍,細胞不被染色;而死細胞的胞膜不完整,通透性增加,可使臺盼藍滲入將細胞染成藍色。因此,借助臺盼藍染色可以簡單、快速地區分活細胞和死細胞。想當年小編還是初入實驗室的
【實驗技巧】臺盼藍染色
臺盼藍是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性,檢測細胞是否存活。活細胞不會被染成藍色,而死細胞會被染成淡藍色。機理 正常的活細胞,胞膜結構完整,能夠排斥臺盼藍,使之不能夠進入胞內;而喪失活性或細胞膜不完整的細胞,胞膜的通透性增加,可被臺盼藍染成藍色。通常認為細胞膜完整性喪失,即可認為細胞已經死亡,
臺盼藍染色法
材料: ? ? ?1. 顯微鏡、玻片、蓋玻片、滴管; 2. 試劑:0.4%臺盼藍染液; 3. 臺盼藍(Trypan blue):0.4g; 4. 生理鹽水:100ml; 操作步驟: 1. 用Hanks液配制0.1%臺盼藍溶液; 2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液來消化培養的貼
臺盼藍染色法
材料:1. 顯微鏡、玻片、蓋玻片、滴管;2. 試劑:0.4%臺盼藍染液;3. 臺盼藍(Trypan blue):0.4g;4. 生理鹽水:100ml;操作步驟:1. 用Hanks液配制0.1%臺盼藍溶液;2. 用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液來消化培養的貼壁細胞;3. 再加入適量H
細胞活性檢測臺盼藍細胞計數
臺盼藍(Trypan Blue)計數法臺盼藍(BI,貨號:03-102-1B)是一種藍色細胞活性染料,無法通過結構完整的細胞膜進入細胞內部;但細胞死后,喪失細胞膜穩定性,臺盼藍會進入細胞將細胞染成藍色,因此在細胞實驗中,常規地搭配自動細胞計數儀或血球計數板,應用于分辨活細胞和死細胞、及檢測細胞膜的完
細胞凋亡的形態:生化性質實驗——臺盼藍染色
實驗方法原理實驗材料細胞試劑、試劑盒染料混合物:0.01%臺盼藍l00μg ml吖啶橙或 100μg ml吖啶橙+100 μg ml溴化乙錠所有試劑都在PBS中制備約5×105?5×106細胞 ml的細胞懸浮液在完全的RMPI 1640培養基儀器、耗材12 mm×75 mm的玻璃試管顯微鏡載玻片和2
錐蟲藍染色劑的基本性質
中英文名稱:臺盼藍(Trypan Blue)或稱臺盼蘭、錐蟲藍、曲利苯藍分子式:C34H24N6O14S4Na4分子量: 960.82可溶于水(10mg/ml)是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性。還常用于檢測細胞是否存活。活細胞不會被染成藍色,而死細胞會被染成淡藍色。臺盼藍可被巨噬細胞吞噬,故
錐蟲藍的基本性質
中英文名稱:臺盼藍(Trypan Blue)或稱臺盼蘭、錐蟲藍、曲利苯藍分子式:C34H24N6O14S4Na4分子量: 960.82可溶于水(10mg/ml)是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性。還常用于檢測細胞是否存活。活細胞不會被染成藍色,而死細胞會被染成淡藍色。臺盼藍可被巨噬細胞吞噬,故
多種細胞快速檢測的方法(二)
熒光染料增殖試驗 CFSE檢測法CFSE是一種可穿透細胞膜的熒光染料,具有細胞膜通透性,能夠自由進入細胞;當CFSE擴散穿過細胞膜,會與細胞內源酯酶產生水解反應而被激發,發出綠色熒光,這些帶熒光的CFSE會進一步與細胞骨架蛋白結合,形成穩定的胞內熒光蛋白。每當細胞進行分裂增殖,胞內熒光蛋白會被平均分
活性染料-臺盼藍染色的原理和步驟
在高中生物中,用血細胞計數板對酵母菌的計數不能專門計數活細胞,但也有染色試劑專門染色活細胞的,結合計數就可以知道活細胞的數目,如臺盼藍就是一種細胞活性染料。 臺盼藍是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性,檢測細胞是否存活。分子式:C34H24N6O14S4Na4。 一、臺盼藍染色的原理
關于黃斑裂孔的-手術方法及進展介紹
傳統手術技術為標準三切口經睫狀體平坦部玻璃體切割術, 行人工玻璃體后脫離,次全 切除玻璃體,剝離黃斑前膜或黃斑區視網膜內界膜,或輔以生物制劑封閉黃斑孔。用20%~25%的SF6氣體行膨脹氣體/空氣交換。術畢, 患者俯臥位約14天后, 玻璃體腔內氣體吸收, 恢復正常體位。 (1) 微切口玻璃體
細胞染色方法歸納
Hoechst染色hoechst可以穿過活細胞膜與細胞核結合 (主要為凋亡活細胞)在紫外光下將核染為藍色. Hoechst染細胞核會影響共聚焦顯微鏡對該樣本其他熒光的觀察效果.hoechst有hoechest33342和hoechst33258兩種 ?hoechsts33258,hoechs
細胞計數的多種方法
血細胞計數器(也被拼寫血球計數儀)是一種蝕刻玻璃室提出雙方將舉行石英蓋玻片完全室地板0.1毫米以上。為9毫米2的總表面積的計數室中進行蝕刻。?圖1、 血細胞計數器的尺寸。?濃度的計算是根據上下方的蓋玻片的體積。一個大廣場(參見圖2中的W)擁有量為0.0001毫升(長x寬x高,也就是說,0.1厘米×0
細胞培養細胞計數時為什么要用臺盼藍染色?
參加臺盼藍后,活細胞不上色,臺盼藍上色的細胞呈深藍色,是不健康或已逝世的細胞,不能計數。
如何解決臺盼藍染色PBMCs進行細胞計數的問題?
“為什么很難用臺盼藍染色劑來計數PBMC!有大的,小的,成團的……;你能告訴我怎么在未染色的細胞中挑出有核細胞?”小編經常被問到各種各樣關于如何計數PBMC的問題,今天就借此機會跟大家分享一下。?首先,了解下人類PBMCs的組成? ? ? 外周血單核細胞(Peripheral blood monoc
細胞計數及活力測定
一、原理培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。計算細胞數目可用血球計數盤或是 Coulter counter 粒子計數器自動計數。 血球計數盤一般有二個 chambers,每個 chamber 中細刻
六種染色后光鏡觀察法檢測肝癌細胞凋亡
作者:楊連君,司曉輝,王文亮,王文勇,趙一嶺,方正清[摘? 要] 目的:探討簡便易行的在光鏡下通過形態學觀察檢測細胞凋亡的方法,并對其進行比較。方法:首先用6%的乙醇作用6 h誘導人肝細胞癌細胞系HCC9204細胞凋亡,然后進行未固定細胞的臺盼藍染色、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)雙染色,細胞固定后
細胞計數及活力測定方法1
一、原理培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。計算細胞數目可用血球計數盤或是Coulter counter 粒子計數器自動計數。 血球計數盤一般有二個chambers,每個chamber 中細刻9 個
關于脂肪干細胞油紅-O-和臺盼藍復合染色介紹
用 0.5%油紅O,對成脂誘導后的各組樣本進行染色。具體操作方法是:先用D-hanks將樣本細胞沖洗充分,然后加入油紅稀釋染色10~15 min,(油紅O 稀釋液配制方法:0.5%飽和油紅O 原液按3:2(油紅O:蒸餾水)加入蒸餾水,然后過濾,待用),接下來用75%的乙醇溶液將樣本分化至間質清晰
活力染色
實驗方法原理各種細胞操作,包括傳代、凍存和原代組織的分離,均能導致細胞死亡。為了確定群體細胞中的存活細胞數,可采用臺盼藍染料排斥實驗(Phillips 1973)。正常的健康細胞能排斥染料,但細胞膜完整性喪失后臺盼藍可彌散入細胞內。染料排斥實驗是一種粗糙的估計細胞活力的方法,無法區別 10%~20%
活力染色
經驗交流(0)實驗方法原理各種細胞操作,包括傳代、凍存和原代組織的分離,均能導致細胞死亡。為了確定群體細胞中的存活細胞數,可采用臺盼藍染料排斥實驗(Phillips 1973)。正常的健康細胞能排斥染料,但細胞膜完整性喪失后臺盼藍可彌散入細胞內。染料排斥實驗是一種粗糙的估計細胞活力的方法,無法區
活力染色
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 各種細胞操作,包括傳代、凍存和原代組織的分離,均能導致細胞死亡。為了確定群體細胞中的存活細胞數,可采用臺盼藍染料排斥實驗(Phillips 1973)。正常的健康細胞能排斥染料,但細胞膜完整性喪失后臺盼藍可彌散入細胞內。染料
細胞計數及活力測定實驗——臺盼蘭染色法
實驗方法原理培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。?在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞,總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力,由組織中分離細胞一般也要檢查活力,以了解分離的過程對細胞是否有損
中檢院CART細胞治療產品質控文件《考慮要點》深度解析
2018年6月5日,中國食品藥品檢定研究院發布了《CAR-T細胞治療產品質量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》(以下簡稱《考慮要點》)。相信這一文件對所有CAR-T細胞治療的從業者都具有重要的指導意義。?《考慮要點》對CAR-T細胞研發和制備的以下幾個方面進行了深入的探討:? ? -原材料和輔料及其
細胞生長檢測1:[3H]脫氧胸苷攝入法測定細胞數
[3H]脫氧胸苷攝入法測定細胞數1.用RPMI-1640培養液洗滌對數生長期(培養3天)的CTLL-2細胞兩次,每次250×g離心10分鐘,洗去培養液中殘存的IL-2。2.用臺盼藍(1%?Trypan blue)染色法計數細胞并決定細胞的活力,用10%小牛血清的RPMI-1640培養液懸浮細胞至1×
[3H]脫氧胸苷攝入法測定細胞數
[3H]脫氧胸苷攝入法測定細胞數:1、用RPMI-1640培養液洗滌對數生長期(培養3天)的CTLL-2細胞兩次,每次250×g離心10分鐘,洗去培養液中殘存的IL-2。2、用臺盼藍(1% Trypan blue)染色法計數細胞并決定細胞的活力,用10%小牛血清的RPMI-1640培養液懸浮細胞至1