病毒DNA的提取實驗——全血細胞中病毒DNA的提取
實驗材料全血試劑、試劑盒裂解緩沖液 A裂解緩沖液 B蛋白酶 K儀器、耗材離心機水浴鍋實驗步驟1. 在 750μl 全血中加入等量裂解緩沖液 A,混勻, 12000 r/min 離心 30 s, 棄上清液。2. 用 1.5mL 裂解緩沖液 A 懸起沉淀,再重復離心 1次,棄上清液。3. 用 117μL 裂解緩沖液 B 溶解沉淀, 70℃作用 5 min, 待冷卻至 55℃時加入3μL 蛋白酶 K, 并保溫1h 消化細胞, 95℃ 10 min 滅活蛋白酶 K 。4. 加入 2 mol/L 的 KCL 溶液 30μL, 冰溶 5 min 。5. 12000 r/min 離心 5 min, 棄上清液做 DNA 模板。即獲得病毒DNA。展開 注意事項其他1. 裂解緩沖液 A 由 320 mmol/L蔗糖、 10 mmol/L Tris-HCl(pH 7.6) 、 5mmol/L MgCl2和1% Triton-X-100 組成......閱讀全文
病毒 DNA 的提取實驗
實驗方法原理 實驗材料 全血試劑、試劑盒 裂解緩沖液 A裂解緩沖液 B蛋白酶 K儀器、耗材 離心機水浴鍋實驗步驟 1. 在 750μl 全血中加入等量裂解緩沖液 A,混勻, 12000 r/min 離心 30 s, 棄上清液。2. 用 1.5mL 裂解緩沖液 A 懸起沉淀,再重復離心 1次,棄上清液
病毒 DNA 的提取實驗——培養細胞中病毒 DNA 的提取
實驗材料細胞試劑、試劑盒裂解液TE 緩沖液儀器、耗材培養瓶EP管真空泵實驗步驟1. 貼壁培養細胞傾去培養液,加 PBS 洗 2次,加胰蛋白酶消化 (37℃, 5~10 min)后移入Ep管中,2000 r/min 離心 10 min, 棄上清液,用 PBS 懸浮細胞,離心洗滌 2~3次,用 PBS
病毒 DNA 的提取實驗——全血細胞中病毒 DNA 的提取
實驗材料全血試劑、試劑盒裂解緩沖液 A裂解緩沖液 B蛋白酶 K儀器、耗材離心機水浴鍋實驗步驟1. 在 750μl 全血中加入等量裂解緩沖液 A,混勻, 12000 r/min 離心 30 s, 棄上清液。2. 用 1.5mL 裂解緩沖液 A 懸起沉淀,再重復離心 1次,棄上清液。3. 用 117μL
病毒 DNA 的提取實驗——拭子標本中病毒 DNA 的提取
實驗材料拭子標本試劑、試劑盒TE 緩沖液裂解液蛋白酶K儀器、耗材離心機棉簽實驗步驟預操作:將采有口腔、鼻腔或生殖道等處分泌物標本的棉簽置于 2 ml 生理鹽水中,洗下標本。若標本在 4 h 內處理,可置于室溫保存,否則需 4℃保存。1. 將生理鹽水中的標本以 2 000 r/min 離心 5 min
痘苗病毒DNA提取實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 純化的痘苗病毒
痘苗病毒DNA提取實驗
如果提取的痘苗病毒DNA用于轉染,則應在蛋白酶 K 消化和苯酚抽提后分離。具體方法見本實驗。實驗材料純化的痘苗病毒試劑、試劑盒Tris?Cl 溶液SDS蔗糖溶液蛋白酶 K用 50 mmol/L Tris ? Cl 溶液平衡的苯酚1:1苯酚氯仿1 mol/L 乙酸鈉乙醇儀器、耗材分光光度計Sorval
痘苗病毒DNA提取實驗
實驗方法原理 實驗材料 純化的痘苗病毒試劑、試劑盒 Tris?Cl 溶液SDS蔗糖溶液 蛋白酶 K用 50 mmol/L Tris ? Cl 溶液平衡的苯酚1:1苯酚氯仿1 mol/L 乙酸鈉乙醇儀器、耗材 分光光度計Sorvall 離心機實驗步驟 1. 在 260 nm 處確定純化的疸苗病毒的光密
病毒 DNA 的提取實驗——新鮮或冷凍組織中病毒 DNA 的提取
實驗材料新鮮或冷凍組織試劑、試劑盒勻漿緩沖液裂解液儀器、耗材剪刀勻漿器離心機實驗步驟1. 取新鮮或剛解凍的組織去除血水和結締組織,在冰浴上剪成小碎塊。2. 將組織碎塊移入預冷的勻漿器中,按 10 ml/g 加入勻漿緩沖液,混勻,制成勻漿液。3. 將勻漿液移人 Ep 管, 5000 r/min 離心1
DNA的提取實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 酚為有效的蛋白質變性劑,并且飽和的酚與水相有效的分開.因此,在含核酸的樣品加入酚,可將樣品中的蛋白質變性后形成沉淀層,位于水相與有機相的界畫,從而達到純化核酸的目的.但酚不能完全抑制RNA酶的活性,而且酚層中含有10-15%的水
DNA的提取實驗
掌握核酸提取與純化的方法,離心技術的合理使用.酚為有效的蛋白質變性劑,并且飽和的酚與水相有效的分開.因此,在含核酸的樣品加入酚,可將樣品中的蛋白質變性后形成沉淀層,本實驗來源于牡丹江醫學院 本科 5 年制檢驗專業實驗指導實驗方法原理酚為有效的蛋白質變性劑,并且飽和的酚與水相有效的分開.因此,在含核酸