QuantitatingRNA
RNA quantitation is an important and necessary step prior to most RNA analysis methods. Here we discuss three common methods used to quantitate RNA and tips for optimizing each of these methods.UV Spectroscopy The traditional method for assessing RNA concentration and purity is UV spectroscopy. The absorbance of a diluted RNA sample is measured at 260 and 280 nm. The nucleic acid concentration is calculated usin......閱讀全文
小分子RNA
RNA一度被認為僅僅是DNA和蛋白質之間的“過渡”，但越來越多的證據清楚的表明，RNA在生命的進程中扮演的角色遠比我們早前設想的更為重要。RNA 干擾（RNA interference）的發現使得人們對RNA調控基因表達的功能有了全新的認識，更因為可以簡化/替代基因敲除而成為研究基因功能的有力工具，
DNA－and－RNA－EXTRACTIONS
A protocol / method / schedule /procedure for extraction / isolation of both DNA and RNA from the same material typically plant leaf / leaves(See also
Poly(A)+RNA－Isolation
Eukaryotic messenger RNA (mRNA) can be separated from the other RNA species in a total RNA preparation by affinity chromatography by virtue of the
RNA－反轉錄
?實驗材料 poly(A)+RNA反轉錄酶鼠源反轉酶 或禽源反轉錄酶試劑、試劑盒 oligo(dT)12-18 lmol LTris-Cl 1mol LTris-Cl lmol LKC1 25 mmol LMgCl2 dNTP 混合物 0.lmol LDTT RNasin實驗步驟 一材料與設備1)p
RNA干涉實驗
實驗方法原理 當確定了靶基因上的 siRNA 分子作用位點以后，根據靶位點的序列可以很方便地推導得到相應的 siRNA 分子的正義與反義 RNA 鏈序列。它們包含 19 bp 的互補雙鏈區和兩側的不配對區（每側為 2 個 U 成 2 個 T )，在合成時用 T 替代 U 可以降低成本并可以提
Reverse－Transcription－of－RNA
實驗概要The purpose of Reverse transcription of RNA is acquiring cDNA for follow research.實驗原理Reverse ?Transcription (RT reaction) is a process in which s
RNA－gel－electrophoresis
實驗概要RNA gel electrophoresis主要試劑DEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37oC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide sol
RNA干涉實驗
化學合成siRNA分子實驗 體外轉錄合成siRNA分子實驗 采用RNA聚合酶Ⅲ啟動子表達siRNA分子 采用RNaseⅢ制備siRNA分子實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法
RNA的提取
一、準備試劑：氯仿，異丙醇，75℅乙醇，無RNase的水或0.5℅SDS（溶液均需用DEPC處理過的水配制）。二、操作步驟：1. 勻漿處理：a. 組織 將組織在液氮中磨碎，每50-100mg組織加入1ml TRIzol，用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。b. 單層培養細胞
RNA－Immunoprecipita...
實驗概要Interest in RNA-protein interactions is booming as we begin to appreciate the role of RNA, not just in well-established processes such as tran
RNA－isolation－for－Microarray
Description?RNA extraction using TRI REAGENT. This method gives ample amout of RNA.Procedure?It is 3 days procedure.Day 1:1. Harvest the cells and cen
RNA的制備
來源于任何細胞的RNA都可以通過反轉錄酶的作用拷貝成雙鏈DNA并克隆化，獲得相應的于特定細胞來源的cDNA文庫。因此，RNA制備的意義有兩個方面?* 獲得特定細胞來源的cDNA文庫，克隆目的基因?* 分析基因的表達，闡明基因調控的特性，了解從基因轉錄產生RNA的結構，數量，水平及合成的速率抑制RNA
RNA－gel－electrophoresis
MaterialsDEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37oC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide solutions should also be
純化RNA實驗
從培養的細胞中純化總RNA 從組織中純化總RNA ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
RNA點雜交
RNA點雜交1）??純化的RNA的點雜交和狹線雜交安裝印跡裝置1．切一張合適大小的帶正電荷尼龍膜。用鉛筆標上表示方向的記號。用水把膜簡單弄濕，在20×SSC中室溫泡1 h。2．在膜浸泡期間，先用0.1 mol/L NaOH小心清洗印跡裝置，再用無菌水洗干凈。3．把兩片厚濾紙用20×SSC浸濕，再放到
RNA微注射
·?????????RNA Injection?(Hoshi Lab)The oocyte is a useful model for the investigation of the function of usr/localious genes and is a widely used syst
RNA點線雜交
RNA點線雜交（Dot and Slot blotting）·?????????RNA dot blot and slot blot (Beverly Faulkner-Jones)This methods allows the rapid analysis of numerous small sa
RNA－Isolation－Protocol
Stabilize RNAStart with 15 ml E. coli Culture containing 7.5* 109 cells (OD600= 0.2 Dilute cells or scale up)Pipet 30 ml of RNAProtect Bacteria Reagen
RNA－Isolation－Protocol
RNA Isolation Protocol(Revised 5-15-2003)Stabilize RNAStart with 15 ml E. coli Culture containing 7.5* 109?cells (OD600= 0.2 Dilute cells or scale up)
RNA干涉實驗
RNA 干涉（RNA1） 是指在真核細胞中引入雙鏈 RNA ( doubt-stranded RNA，dsRNA ) 分子從而導致具有序列同源性的基因產生特異件基內沉默（gene silencing ) 的現象。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法原理當確定了靶基因上的 siRN
RNA的提取
【實驗原理】Trizol 試劑是直接從細胞或組織中提取總RNA 的試劑。它在破碎和溶解細胞時能保持RNA 的完整性。加入氯仿后離心，樣品分成水樣層和有機層。RNA存在于水樣層中。收集上面的的水樣層后，RNA 可以通過異丙醇沉淀獲得。【實驗儀器】1. 勻漿機2. 低溫離心機3. 渦旋器【試劑及配制】1
RNA點雜交
1） 純化的RNA的點雜交和狹線雜交安裝印跡裝置1．切一張合適大小的帶正電荷尼龍膜。用鉛筆標上表示方向的記號。用水把膜簡單弄濕，在20×SSC中室溫泡1 h。2．在膜浸泡期間，先用0.1 mol/L NaOH小心清洗印跡裝置，再用無菌水洗干凈。3．把兩片厚濾紙用20×SSC浸濕，再放到真空器頂部。4
RNA提取原理
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑，內含異硫氰酸胍等物質，能迅速裂解細胞，抑制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時能破壞細胞及溶解細胞成
RNA提取原理
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一種總RNA抽提試劑，內含異硫氰酸胍等物質，能迅速裂解細胞，抑制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。Trizol作用原理:在勻質化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時能破壞細胞及溶解細胞成
RNA病毒介紹
RNA是核糖核酸，single-stranded是單鏈。一般看脫氧核糖核酸（DNA）的圖片都是有兩條鏈扭在一起，而核糖核酸一般都是單鏈的。講到ssRNA，一般都是在說RNA病毒。一般來說生物學家是根據RNA能否直接起mRNA作用而分成正鏈ssRNA病毒與負鏈ssRNA病毒兩種。(1)正鏈RNA病毒（
RNA加工修飾
中文名RNA加工修飾所屬領域生物學定義RNA加工修飾，主要加工方式是切斷和堿基修飾，真核生物tRNA前體一般無生物學特性，需要進行加工修飾。
前信使RNA
中文名稱前信使RNA英文名稱pre-messenger RNA;pre-mRNA;precursor mRNA定 義未經剪接加工的基因轉錄產物。即初級轉錄物。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞遺傳（二級學科）
RNA－反轉錄
? ? ? ? ? ? 實驗材料 poly(A)+RNA 反轉錄酶 鼠源反轉酶 ?或禽源反轉錄酶 試劑、試劑盒 oligo
從果蠅胚胎中提取總－RNA－或－poIy(A)－+RNA
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 0.lmol LNaOH ?乙醇 ?3mol L 乙酸鈉 ? 苯酚 ?無 SDS 的結合緩沖液 含 SDS 的結合緩沖
真核細胞總RNA的制備（Total－RNA－Isolation）2
Total RNA Isolation?Guanidine-based isolation Objective: ?To obtain total RNA from zebrafish embryos. Required Materials ?Denaturing Solution