NP40以及菌體/細胞裂解法1
細胞裂解分析化學,論壇,化學分析,儀器分析,分析測試,色譜,電泳,光譜u5kLlIOT采用溫和的裂解條件,不能破壞細胞內存在的所有蛋白質-蛋白質分析化學論壇~O/b:te} 相互作用,多采用非離子變性劑(NP40或Triton X-100)。每種細胞的裂解條件是不一樣的,通過經驗確定。 不能用高濃度的變性劑(0.2%SDS),細胞裂解液中要加各種酶抑制劑,如商品化的cocktailer。 2、如何得到比較純的包涵體對于包涵體的純化,包涵體的前處理是很重要的。包涵體中主要含有重組蛋白,但也含有一些細菌成分,如一些外膜蛋白、質粒DNA和其它雜質。洗滌常用1%以下的中性去垢劑,如Tween、Triton、Lubel和 NP40等加EDTA和還原劑2-巰基蘇糖醇(DTT)、β-巰基乙醇等反復多次進行,因去垢劑洗滌能力隨溶液離子強度升高而加強,在洗滌包涵體時可加50 mM NaCL。這樣提取的包涵體純度至......閱讀全文
P1噬菌體及其克隆系統的應用
P1 噬菌體與 λ 噬菌體同年被發現(Bertani 1951)。兩種噬菌體在天然宿主中都是溫和噬菌體,它們在實驗室的研究歷程也幾乎相同。λ 噬菌體一經被發現,立刻就被當時有影響的實驗室選作分子水平研究溶原性噬菌體的模型。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理P1 噬菌體與 λ
噬菌蛭弧菌、噬菌體和細菌素(1)
在流行病學和細菌學的研究中,噬菌蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus,簡稱蛭弧菌)、噬菌體、細菌素的研究及其應用已越來越引起人們的關注。蛭弧菌、噬菌體、細菌素是分屬于細菌、病毒、抗菌物質3種不同的有機物,但它們有許多相似的生物特性,而且往往引起人們產生錯誤的概念。蛭弧菌是
P1-噬菌體普遍性轉導實驗
實驗方法原理 細菌病毒(噬菌體)分為烈性噬菌體和溫和噬菌體。烈性噬菌體感染細胞后,伴隨著細胞裂解會釋放出新的子代噬菌體顆粒。被溫和噬菌體感染的細胞或是裂解,釋放出新的子代噬菌體顆粒,或是成為溶源狀態,噬菌體的基因組整合到細菌染色體上,與細菌染色體一起復制,這時的噬菌體基因組稱為原噬菌體(propha
HPLC的應用以及方法開發(1)
? 據2004年數據統計,世界上化合物總數多達4700多萬種; 在全部有機化合物中僅有20%左右的樣品適用于GC分析; 而HPLC可對80%左右的有機化合物進行分離和分析; HPLC特別適用于高沸點、大分子、強極性和熱穩定性差的化合物以及生物活性物質的分離和分析并且可以做制備
骨肉瘤的新細胞起源以及STK11/LKB1對骨癌的發病影響-1
“少年殺手” 【背景】 成骨腫瘤(osteogenic tumor)是骨組織最常見的原發性腫瘤,包括良性骨形成腫瘤、骨瘤、成骨細胞瘤和惡性腫瘤(又稱為成骨源性肉瘤或骨肉瘤)。骨肉瘤主要在兒童和青少年人群中高發,老年人位列第二發病率高峰。由于傳統化療生存效益不理想,因此預后較差,當前迫切需要更多針
細胞凍存、解凍方法以及細胞計數
一、細胞冷凍保存1、材料:生長良好之培養細胞、新鮮培養基、DMSO(Sigma D-2650)、無菌塑料冷凍保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球計數盤與蓋玻片、等速降溫機(KRYO10SeriesII)。2
菌體/細胞裂解的常用方法和配方
、反復凍融法:1.? 將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。2.? 至少3次以上凍溶。3.? IFCC推薦法:收集細胞懸液,4℃低溫離心(3000rpm,5min),棄上清,加入一定量PBS(200ul),輕輕吹打混勻,-2
菌體/細胞裂解的常用方法和配方
一、反復凍融法:1. ?將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。2. ?至少3次以上凍溶。3. ?IFCC推薦法:收集細胞懸液,4℃低溫離心(3000rpm,5min),棄上清,加入一定量PBS(200ul),輕輕吹打混勻,-
細胞增殖二分裂的相關介紹
細菌可以以無性或者遺傳重組二種方式繁殖,最主要的方式是以二分裂這種無性繁殖的方式:一個細菌細胞壁橫向分裂,形成兩個子代細胞。 除細菌以外,二分裂也是原生動物最普遍的一種無性生殖.一般是有絲分裂,分裂時細胞核先由一個分為二個,染色體均等的分布在兩個子核中,隨后細胞質也分別包圍兩個細胞核,形成兩個
關于細胞增殖二分裂的介紹
細菌可以以無性或者遺傳重組二種方式繁殖,最主要的方式是以二分裂這種無性繁殖的方式:一個細菌細胞壁橫向分裂,形成兩個子代細胞。 除細菌以外,二分裂也是原生動物最普遍的一種無性生殖.一般是有絲分裂,分裂時細胞核先由一個分為二個,染色體均等的分布在兩個子核中,隨后細胞質也分別包圍兩個細胞核,形成兩個
細胞老化以及血清、污染問題
何為細胞老化?1882年,德國生物學家Weismann曾大膽預測“在細胞水平存在老化現象”。他推測:機體的壽命限制受控于體細胞的分裂能力;在遺傳進化中,不同物種的體細胞獲得了不同分裂的潛能,從而決定了不同物種的壽命長短。20世紀50年代,Swin和他的同事利用原代細胞體外培養試驗證明了來源于不同物種
微波消解法
微波消解法是一種新的樣品分解技術,是將樣品放置在微波爐內特制的溶樣罐中,利用微波輻射加熱分解樣品,按照嚴格的程序控制溶樣的過程。微波位于紅外輻射與無線電波之間,能穿透一些介質,將能量直接輻射到反應物上。物質分子在微波電磁場作用下發生瞬時極化。樣品與消解液混合物吸收微波能量之后,由于離子傳導與偶極子轉
微波消解法
微波消解法是一種新的樣品分解技術,是將樣品放置在微波爐內特制的溶樣罐中,利用微波輻射加熱分解樣品,按照嚴格的程序控制溶樣的過程。微波位于紅外輻射與無線電波之間,能穿透一些介質,將能量直接輻射到反應物上。物質分子在微波電磁場作用下發生瞬時極化。樣品與消解液混合物吸收微波能量之后,由于離子傳導與偶極子轉
微波消解法
微波消解法是一種新的樣品分解技術,是將樣品放置在微波爐內特制的溶樣罐中,利用微波輻射加熱分解樣品,按照嚴格的程序控制溶樣的過程。微波位于紅外輻射與無線電波之間,能穿透一些介質,將能量直接輻射到反應物上。物質分子在微波電磁場作用下發生瞬時極化。樣品與消解液混合物吸收微波能量之后,由于離子傳導與偶極子轉
微波消解法
微波消解法是一種新的樣品分解技術,是將樣品放置在微波爐內特制的溶樣罐中,利用微波輻射加熱分解樣品,按照嚴格的程序控制溶樣的過程。微波位于紅外輻射與無線電波之間,能穿透一些介質,將能量直接輻射到反應物上。物質分子在微波電磁場作用下發生瞬時極化。樣品與消解液混合物吸收微波能量之后,由于離子傳導與偶極子轉
微波消解法
微波消解法是一種新的樣品分解技術,是將樣品放置在微波爐內特制的溶樣罐中,利用微波輻射加熱分解樣品,按照嚴格的程序控制溶樣的過程。微波位于紅外輻射與無線電波之間,能穿透一些介質,將能量直接輻射到反應物上。物質分子在微波電磁場作用下發生瞬時極化。樣品與消解液混合物吸收微波能量之后,由于離子傳導與偶極子轉
微波消解法
微波消解法是一種新的樣品分解技術,是將樣品放置在微波爐內特制的溶樣罐中,利用微波輻射加熱分解樣品,按照嚴格的程序控制溶樣的過程。微波位于紅外輻射與無線電波之間,能穿透一些介質,將能量直接輻射到反應物上。物質分子在微波電磁場作用下發生瞬時極化。樣品與消解液混合物吸收微波能量之后,由于離子傳導與偶極子轉
微波消解法
微波消解法是一種新的樣品分解技術,是將樣品放置在微波爐內特制的溶樣罐中,利用微波輻射加熱分解樣品,按照嚴格的程序控制溶樣的過程。微波位于紅外輻射與無線電波之間,能穿透一些介質,將能量直接輻射到反應物上。物質分子在微波電磁場作用下發生瞬時極化。樣品與消解液混合物吸收微波能量之后,由于離子傳導與偶極子轉
微波消解法
微波消解法是一種新的樣品分解技術,是將樣品放置在微波爐內特制的溶樣罐中,利用微波輻射加熱分解樣品,按照嚴格的程序控制溶樣的過程。微波位于紅外輻射與無線電波之間,能穿透一些介質,將能量直接輻射到反應物上。物質分子在微波電磁場作用下發生瞬時極化。樣品與消解液混合物吸收微波能量之后,由于離子傳導與偶極子轉
酶解法原理
(1)實驗過程中,需要輕搖試管,以使細胞壁與酶充分接觸,提高酶解效果.(2)蝸牛以植物為食,所以唾液中含有果膠酶和纖維素酶,I、Ⅱ、Ⅲ沒有添加酶溶液為空白對照組.其目的是排除無關變量的干擾.(3)離心后收集沉淀物,并用等滲溶液清洗,目的是保持細胞正常形態.(4)要用低滲漲破法來檢驗原生質體是否符合要
P1噬菌體轉導試劑盒使用說明
P1噬菌體轉導試劑盒產品說明書(中文版)主要用途P1噬菌體轉導試劑是一種旨在通過供體大腸桿菌制備具有部分細菌基因的噬菌體,感染特定受體大腸桿菌,獲得細菌之間基因片段的轉移,而獲得遺傳重組的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于通用型非特異性基因片段的轉導。產品嚴格無菌,即
鈦種植體折裂的臨床處理及相關因素討論1
自1969年Branemark教授開始使用鈦種植體以來,種植義齒在部分牙列缺損及牙列缺失的臨床修復應用中逐漸受到重視。種植義齒不僅能幫助恢復缺失牙的功能和美觀,還可有效提高患者的生活質量。隨著種植體表面處理技術的不斷改善,其高成功率逐漸使種植修復成為缺牙患者的修復首選。?Pjetursson等在一項
細胞冷凍保存、冷凍細胞活化以及細胞計數與存活測試
一、細胞冷凍保存 1、材料: 生長良好之培養細胞、新鮮培養基、DMSO(Sigma D-2650)、無菌塑料冷凍保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球計數盤與蓋玻片、等
脊椎裂的檢查
1.有骨梁存在,在X線片上可發現椎體背面有相應的骨質改變。 2.脊髓造影或碘水脊髓造影。 3.CT掃描及MRI。
脊椎裂的病因
主要是在胚胎期發育發生障礙所致,關鍵在于椎管閉合不全。 支撐人體的脊柱是由26塊脊椎骨連接組成的,脊柱中央的管腔稱為椎管。該管內包有脊膜、神經及脊髓等組織,如椎管先天性發有異常,則可椎管閉合不全,稱為脊柱裂。此癥多見于腰骶部,偶見于胸段,裂開處多在脊柱后面,少數可位于前方,正常人有20~25%
脊椎裂的癥狀
主要是在胚胎期發育發生障礙所致,關鍵在于椎管閉合不全。 支撐人體的脊柱是由26塊脊椎骨連接組成的,脊柱中央的管腔稱為椎管。該管內包有脊膜、神經及脊髓等組織,如椎管先天性發有異常,則可椎管閉合不全,稱為脊柱裂。此癥多見于腰骶部,偶見于胸段,裂開處多在脊柱后面,少數可位于前方,正常人有20~25%
脊椎裂的簡介
脊柱裂:又叫“先天性脊柱裂”、“隱性脊柱裂”,為脊椎軸線上的先天畸形。 最常見的形式為棘突及椎板缺如,椎管向背側開放,以骶尾部多見,頸段次之,其他部位較少。病變可涉及一個或多個椎骨,有的同時發生脊柱 彎曲和足部畸形。脊柱裂常與脊髓和脊神經發育異常或其他畸形伴發,少數伴發顱裂。 少數病人到成年
脊椎裂的病理
脊髓裂可見于隱性或顯性脊柱裂病例,同屬于胚胎期發生障礙所致的畸形,最多發生在腰椎和胸椎,而頸椎和骶椎少見。常有(90%以上)一來自椎體背面的縱行隔障或骨梁插向椎管背側,將脊髓或馬尾分成長度不等、左右對稱或不對稱、完全或不完全的兩半,少數可有兩個隔障。有的隔障則可為軟骨或纖維組織。每個半脊髓均具有
什么是骨裂
骨裂(bony crack)在醫學上稱為裂紋骨折(fissure fracture),屬骨折類型中的一種。在臨床上,無明顯移位的裂紋骨折最常見,它一般由直接的打擊傷、輕微的撞擊跌倒等導致。通過石膏或小夾板簡單的固定和治療,傷處可快速愈合,愈合后通常沒有后遺癥。
骨裂的簡介
1.直接暴力 暴力直接作用于骨骼某一部位而致該部骨折,則往往使受傷部位發生骨折,常伴有不同程度軟組織破壞。 2.間接暴力 間接暴力作用時通過縱向傳導、杠桿作用或扭轉作用使遠處發生骨折,如從高處跌下足部著地時,軀干因重力關系急劇向前屈曲,胸腰脊柱交界處椎體受折刀力的作用而發生壓縮性骨折(傳導