電泳技術
電泳法，是指帶電荷的供試品（蛋白質、核苷酸等）在惰性支持介質（如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等）中，于電場的作用下，向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動，使組分分離成狹窄的區帶，用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。 電泳技術的基本原理和分類 在電場中，推動帶電質點運動的力（F）等于質點所帶凈電荷量（Q）與電場強度（E）的乘積。F＝QE質點的前移同樣要受到阻力（F）的影響，對于一個球形質點，服從Stoke定律，即：F′＝6πrην式中r為質點半徑，η為介質粘度，ν為質點移動速度，當質點在電場中作穩定運動時：F＝F′即QE＝6πrην 可見，球形質點的遷移率，首先取決于自身狀態，即與所帶電量成正比，與其半徑及介質粘度成反比。除了自身狀態的因素外，電泳體系中其它因素也影響質點的電泳遷移率。 電泳法可分為自由電泳（無支持體）及......閱讀全文
電泳技術的應用介紹
過程如何運作有機分子通常帶有正電荷或負電荷,這會使它們對電流作出響應。帶正電荷的分子向電場的負極遷移,帶負電荷的分子向正極遷移。電荷較大的分子在施加電荷時趨向于更快地移動并傳播更遠。但是,它們也會因摩擦而減慢,而摩擦又受分子的大小和形狀以及測試所用介質的影響。通過控制電流和測試介質提供的摩擦力,研究
電泳技術的研究歷史
電泳（Electrophoresis）是指帶電荷的粒子或分子在電場中移動的現象稱為電泳。大分子的蛋白質，多肽，病毒粒子，甚至細胞或小分子的氨基酸，核苷等在電場中都可作定向泳動。1937年Tiselius成功地研制了界面電泳儀進行血清蛋白電泳，它是在一U型管的自由溶液中進行的，電泳后用光學系統使各種蛋
雙向凝膠電泳技術應用
凝膠中蛋白的檢測凝膠染色的目的是使其中的蛋白質能夠被觀察到。目前還沒有通用的染色方法，只能在考慮多種因素如需要的靈敏度、線性范圍、方便程度、費用、以及成像設備類型等基礎上，結合實際進行選擇。有時也可以將蛋白轉膜后通過免疫印跡的方法來進行檢測。圖像采集和分析成像設備可以攝人圖像，對凝膠圖像以數字形式保
凝膠電泳技術的特點
以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質的區帶電泳法稱為凝膠電泳。 聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）除了濃縮效應、電荷效應外，還包括分子篩效應，普遍用于分離蛋白質及較小分子核酸。 瓊脂糖凝膠電泳適用于分離同工酶及其亞型、大分子核酸等。
凝膠電泳技術的特點
以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質的區帶電泳法稱為凝膠電泳。聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）除了濃縮效應、電荷效應外，還包括分子篩效應，普遍用于分離蛋白質及較小分子核酸。瓊脂糖凝膠電泳適用于分離同工酶及其亞型、大分子核酸等。
電泳技術(electrophoretic－techniques)簡介1
電泳法，是指帶電荷的供試品（蛋白質、核苷酸等）在惰性支持介質（如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等）中，于電場的作用下，向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動，使組分分離成狹窄的區帶，用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。電泳技術的基本原理和分類在電場中，推動帶電質點運
凝膠電泳技術的特點
以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質的區帶電泳法稱為凝膠電泳。聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）除了濃縮效應、電荷效應外，還包括分子篩效應，普遍用于分離蛋白質及較小分子核酸。瓊脂糖凝膠電泳適用于分離同工酶及其亞型、大分子核酸等。
電泳技術(electrophoretic－techniques)簡介2
⒈材料與試劑 醋酸纖維素膜一般使用市售商品，常用的電泳緩沖液為pH8.6的巴比妥緩沖液，濃度在0.05-0.09mol/L。⒉操作要點⑴膜的預處理：必須于電泳前將膜片浸泡于緩沖液，浸透后，取出膜片并用濾紙吸去多余的緩沖液，不可吸得過干。⑵加樣：樣品用量依樣品濃度、本身性質、染色方法及檢測方法等因素決
電泳技術(electrophoretic－techniques)簡介5
三、瓊脂糖凝膠電泳法1.儀器裝置電泳室及直流電源同紙電泳。2.試劑(1)醋酸－鋰鹽緩沖液(pH3.0)取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氫氧化鋰調節pH至3.0，再加水至1000ml。(2)甲苯胺藍溶液取甲苯胺藍0.1g，加水100ml使溶解。3.操作法(1)制膠取瓊脂糖約0.2g，加水10
電泳技術(electrophoretic－techniques)簡介4
各電泳法，除另有規定外，照下述方法操作。一、紙電泳法1.儀器裝置包括電泳室及直流電源兩部分。常用的水平式電泳室裝置如圖，包括兩個電泳槽A和一個可以密封的玻璃(或相應材料)蓋B；兩側的電泳槽均用有機玻璃（或相應材料）板C分成兩部分；外格裝有鉑電極(直徑0.5～0.8cm)D；里格為可放濾紙E的有機玻璃
電泳技術(electrophoretic－techniques)簡介3
（三）等電聚焦電泳技術等電聚焦（isoelectric focusing，IEF）是60年代中期問世的一種利用有pH梯度的介質分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。由于其分辨率可達0.01pH單位，因此特別適合于分離分子量相近而等電點不同的蛋白質組分。⒈IEF的基本原理 在IEF的電泳中，具有pH梯
影響電泳技術的因素介紹
1．電泳介質的pH值溶液的pH值決定帶電物質的解離程度，也決定物質所帶凈電荷的多少。對蛋白質，氨基酸等類似兩性電解質，pH值離等電點越遠，粒子所帶電荷越多，泳動速度越快，反之越慢。因此，當分離某一種混合物時，應選擇一種能擴大各種蛋白質所帶電荷量差別的pH值，以利于各種蛋白質的有效分離。為了保證電泳過
關于電泳技術的應用介紹
1．聚丙烯酰胺凝膠電泳可用做蛋白質純度的鑒定。聚丙烯酰胺凝膠電泳同時具有電荷效應和分子篩效應，可以將分子大小相同而帶不同數量電荷的物質分離開，并且還可以將帶相同數量電荷而分子大小不同的物質分離開。其分辨率遠遠高于一般層析方法和電泳方法，可以檢出10-9～10-12g的樣品，且重復性好，沒有電滲作用。
電泳技術的現狀和發展
?? 早期的電泳技術是由瑞典Uppsala大學物理化學系Svedberg教授提出了荷電的膠體顆粒在電場中移動的現象稱其為電泳（electrophoresis）。于1937年，收Arne Tiselius教授---諾貝爾獎金獲得者，利用些電泳現象，發明了最早期的界面電泳（moving
免疫電泳技術的優點
（一）加快了沉淀反應的速度； （二）電場規定了抗原抗體的擴散方向，使其集中，提高了靈敏度； （三）可將某些蛋白組分根據其帶電荷的不同而將其分開，再分別與抗體反應。
蛋白質電泳技術2
Decrease toxicity of destain even more!The destain procedure can be made even less toxic by replacing the destaining solution completely with MilliQ w
電泳技術RNA電泳操作步驟
試劑： 瓊脂糖（Agarose）、甲醛、甲酰胺、MOPS、EDTA、DEPC水。 步驟 一 、5 x MOPS-EDTA Buffer的配制（0.1 M MOPS pH7； 5mM EDTA； 10mM NaAc） 1. 稱量20.9g的MOPS，置于1L燒杯中。 2. 加700mL
雙向凝膠電泳技術的原理
1、根據蛋白質的等電點（第一向）和分子量（第二向）的不同進行分離。2、電泳后根據蛋白質的上樣量對膠進行考馬斯亮蘭染色、銀染或熒光染色，然后用相關軟件對電泳圖象進行分析。
雙向凝膠電泳技術的概念
雙向凝膠電泳由O'Farrel以及Klose和Scheele等人于1975年發明的，原理是第1向基于蛋白質的等電點不同用等電聚焦分離，具有相同等電點的蛋白質無論其分子大小，在電場的作用下都會用聚焦在某一特定位置即等電點處；第2向則按分子量的不同用SDS-PAGE分離，把復雜蛋白混合物中的蛋白
免疫分析法的電泳技術
基本原理：免疫擴散與電泳技術相結合。 類型：對流免疫電泳、火箭免疫電離、免疫電泳、雙向免疫電泳（交叉免疫電泳） 對流免疫電泳 基本原理：多數蛋白質抗原在堿性緩沖液中帶負電荷，在電泳時從負極向正極移動。抗體在堿性緩沖液只帶微弱的負電 荷，且相對分子質量較大，電泳力較小，在瓊脂電滲力作用 下由
電泳技術的基本原理
生物大分子如蛋白質，核酸，多糖等大多都有陽離子和陰離子基團，稱為兩性離子。常以顆粒分散在溶液中，它們的靜電荷取決于介質的H+濃度或與其他大分子的相互作用。在電場中，帶電顆粒向陰極或陽極遷移，遷移的方向取決于它們帶電的符號，這種遷移現象即所謂電泳。如果把生物大分子的膠體溶液放在一個沒有干擾的電場中，使
電泳技術的基本原理
生物大分子如蛋白質，核酸，多糖等大多都有陽離子和陰離子基團，稱為兩性離子。常以顆粒分散在溶液中，它們的靜電荷取決于介質的H+濃度或與其他大分子的相互作用。在電場中，帶電顆粒向陰極或陽極遷移，遷移的方向取決于它們帶電的符號，這種遷移現象即所謂電泳。如果把生物大分子的膠體溶液放在一個沒有干擾的電場中，使
瓊脂糖凝膠電泳技術
一、瓊脂糖凝膠的特點 天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，
什么是等電聚焦電泳技術？
等電聚焦（IEF）是利用有pH梯度的介質分離等電點不同的蛋白質的電泳技術，特別適合于分離分子量相近而等電點不同的蛋白質組分，在區帶電泳中分辨率最好。常用的pH梯度支持介質有聚丙烯酰胺凝膠、瓊脂糖凝膠、葡聚糖凝膠等。
瓊脂糖電泳技術的特點
天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，加之硫酸根可與某些蛋白質作用而影響
對流免疫電泳技術(CIET)
一、原理在pH8.6的瓊脂凝膠中，抗體球蛋白只帶有微弱的負電荷，在電泳時，由于電滲作用的影響，抗體球蛋白不但不能抵抗電滲作用向正極移動，反而向負極倒退。而一般抗原蛋白質帶負電荷，將抗原置于負極，將血清抗體置于正極，電泳后則在兩孔之間相遇，并在比例適當的部位形成肉眼可見的沉淀線。本法由于抗原抗體分子在
電泳技術在醫學中的應用
目前,該技術已廣泛用于蛋白質、多肽、氨基酸、核苷酸、有機物、無機離子等的分離和鑒定,甚至病毒與細胞的研究。特別是電泳所用支持介質由流動相改為固相支持物后,各種各樣的電泳分析裝置不斷推出以適應不同教學、臨床和科研工作的需要。當今,電泳技術與質譜技術聯用在后基因組學研究中,正發揮者著巨大的作用,為臨床檢
電泳技術基本知識和種類
電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時，該蛋白質帶負電荷，在電場中向正極移動，相反則帶正電荷，在電場中向負極移動，只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零，在電場中不向任何一極移動。電泳現象早在1890年就
電泳設備及電泳技術應用范圍
電泳：在直流電場中，帶電荷的粒子向帶符號相反的電極移動，稱為電泳。電泳也是一種分離的方法和技術，就是分離和鑒定混合物中帶電粒子（包括離子、高分子多電解質、膠體粒子、病毒顆粒以致活的細胞，如細菌和紅細胞等）的技術。 ? 電泳裝置：由電泳儀（電源）和電泳槽（混合樣品電泳時的支持物）組成。 ? 電泳儀（電
電泳設備及電泳技術應用范圍
電泳：在直流電場中，帶電荷的粒子向帶符號相反的電極移動，稱為電泳。電泳也是一種分離的方法和技術，就是分離和鑒定混合物中帶電粒子（包括離子、高分子多電解質、膠體粒子、病毒顆粒以致活的細胞，如細菌和紅細胞等）的技術。?電泳裝置：由電泳儀（電源）和電泳槽（混合樣品電泳時的支持物）組成。 電泳儀（電源）：為