免疫熒光技術
基本原理 將熒光素標記在相應的抗體上，直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高，非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低；而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。試劑與儀器l 磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）：0.01mol/L，pH7.4l 熒光標記的抗體溶液：以0.01mol/L，pH7.4的PBS進行稀釋l 緩沖甘油：分析純無熒光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸鹽緩沖液1份配制l &nbs......閱讀全文
免疫熒光技術——間接法
實驗方法原理基本原理是先用特異性抗體與細胞內相應抗原結合，再用熒光素標記的二抗與特異性抗體相結合，形成抗原-特異性抗體-標記熒光抗體的復合物。因為在復合物上帶有比直接法更多的熒光標記物，所以比直接法更敏感。實驗材料抗體試劑、試劑盒PBS伊文氏蘭儀器、耗材顯微鏡實驗步驟1. ?標本固定后，PBS洗滌3
免疫熒光技術——直接法
免疫熒光技術可應用于：（1）研究特異蛋白抗原在細胞內分布；（2）對抗原進行細胞定位；（3）對特定抗原進行定量檢測。內容來源：組織培養和分子細胞學技術。（北京出版社）實驗方法原理直接法是以熒光素標記的抗體直接與標本內的抗原反應，形成抗原—熒光素標記抗體復合物。根據熒光的分布位置及強度，確定相應抗原的存
免疫熒光技術的應用
一、標本的制作免疫熒光技術在實際應用上主要有直接法和間接法。直接法是在檢測樣品上直接滴加已知特異性熒光標記的抗血清，經洗滌后在熒光顯微鏡下觀察結果。免疫熒光直接法可清楚地觀察抗原并用于定位標記觀察。間接法是在檢測樣品上滴加已知的細菌特異性抗體，待作用后經洗滌，再加入熒光標記的第二抗體。如研制成的抗沙
免疫熒光層析技術
免疫層析技術因其簡單、方便、易操作、快速，價格相對低廉，已廣泛應用于即時檢測（POCT）。隨著POCT檢測項目的增多和對已有項目檢測定量、靈敏度、特異度等要求提高。 １免疫層析技術簡介 免疫層析技術是在20世紀60年代在發達國家興起并被用于檢測血清蛋白的一種結合了免疫技術和色譜層析技術的快速
雙層免疫熒光技術的概念
中文名稱雙層免疫熒光技術英文名稱double layer immunofluorescence定 義即用未標記的第一抗體結合特異性抗原，再以熒光標記的第二抗體與之反應，用于檢測未知抗原或抗體的技術。應用學科免疫學（一級學科），應用免疫（二級學科），免疫學檢測和診斷（三級學科）
直接免疫熒光的技術特點
中文名稱直接免疫熒光英文名稱direct immunofluorescence定 義直接用熒光標記抗體來研究特異性抗原在細胞內定位的方法。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞生物學技術（二級學科）
免疫熒光技術的應用特點
該技術的主要特點是：特異性強、敏感性高、速度快。主要缺點是：非特異性染色問題尚未完全解決，結果判定的客觀性不足，技術程序也還比較復雜。熒光免疫法按反應體系及定量方法不同，還可進一步分做若干種。與放射免疫法相比，熒光免疫法無放射性污染，并且大多操作簡便，便于推廣。國外生產的TDM用試劑盒，有相當一部分
免疫熒光細胞化學技術3
四、熒光圖像的記錄方法 熒光顯微鏡所看到的熒光圖像，一是具有形態學特征，二是具有熒光的顏色和亮度，在判斷結果時，必須將二者結合起來綜合判斷。結果記錄根據主觀指標，即憑工作者目力觀察。作為一般定性觀察，基本上可靠的。隨著技術科學的發展，在不同程度上采用客觀指標記錄判斷結果，如用細胞分光光度計，圖像
免疫熒光技術(immunofluorescence－technique)2
實驗材料 1. 40 孔酶標板 ? 2. 1:300 乙肝表面抗原溶液 ? 3. 1:10 待測血清 ? 4. 健康人血清 ? 5. HBsAg 診斷血清 ? 6. 辣根過氧化物酶標記羊抗人 IgG 抗體（酶標二抗） ? 7. 抗原稀釋液（ pH9
免疫熒光技術(immunofluorescent－technique)簡介
1、熒光免疫測定技術的概念將試劑抗原或試劑抗體用熒光素進行標記，試劑與標本中相應的抗體或抗原反應后，測定復合物中的熒光素，這種免疫技術，稱為免疫熒光素技術。2、技術分類（1）熒光抗體技術（熒光顯微鏡技術）：抗原抗體反應后，利用熒光顯微鏡判定結果的檢測方法。（2）免疫熒光測定技術：抗原抗體反應后，利用
免疫熒光細胞化學技術2
四、熒光抗體的保存 以0～4℃或-20℃低溫保存，防止抗體活性降低和蛋白變性。最好加入濃度為1：5000～10000的硫柳汞或1：1000～5000的疊氮鈉防腐，小量分裝如0.1～1ml，真空干燥后更易長期保存。[NextPage] 第三節 免疫熒光細胞化學染色方法 一、標本制作 可制作涂片
免疫熒光技術的方法原理
免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性，所以當抗原抗體發生反應時，只要知道其中的一個因素，就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體（或抗原）上，與其相應的抗原（或抗體）結合后，在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。直接法將標記的特異性
免疫熒光標記技術
．原理免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性，所以當抗原抗體發生反應時，只要知道其中的一個因素，就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體（或抗原）上，與其相應的抗原（或抗體）結合后，在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。直接法：將標記
免疫熒光技術(immunofluorescence－technique)3
思考題 1. 酶聯免疫吸附實驗的基本原理是什么？常用方法有那些？ ? 2. 間接法和直接法相比各有什么優缺點？ ? 放射免疫測定法—— 125 I 標記技術 放射免疫測定 (radioimmunoassay, RIA) 是將同位分析的高靈敏度與抗原抗體反應的特異性相結合，
免疫熒光技術的優缺點
優點：靈敏，操作簡便，安全，無致癌物質，可以多種顏色顯色缺點：對儀器的要求比較高，在液相中，可以用來檢測的分光光度計很貴，結果不能長期保存
免疫熒光技術的優缺點？
免疫熒光技術的優缺點（與其它酶標技術的比較） 固有抗原保存較好。 較好的避免了血液里的抗原的污染。 避免了內源性生物素的干擾。 不便長期保存。
免疫熒光技術的優缺點
優點：靈敏，操作簡便，安全，無致癌物質，可以多種顏色顯色缺點：對儀器的要求比較高，在液相中，可以用來檢測的分光光度計很貴，結果不能長期保存
免疫熒光技術(immunofluorescence－technique)1
免疫熒光技術(immunofluorescence technique)是一種以熒光物作為標記物的免疫分析技術，熒光物質分子在特定條件下吸收激發光的能量后，分子呈激發態而極不穩定，其迅速回到基態時，可以電磁輻射形式釋放出所有的光能，發射出波長較照射光長的熒光。用熒光素與已知的抗體（或抗原，較少用
免疫熒光技術的優缺點
優點：靈敏，操作簡便，安全，無致癌物質，可以多種顏色顯色缺點：對儀器的要求比較高，在液相中，可以用來檢測的分光光度計很貴，結果不能長期保存
免疫熒光技術的分類相關介紹
1、 熒光抗體技術 抗原抗體反應后，利用熒光顯微鏡判定結果的檢測方法。 2、 免疫熒光測定 抗原抗體反應后，利用特殊儀器測定熒光強度而推算被測物濃度的檢測方法 ⑴熒光物質 1）熒光色素 許多物質都可產生熒光現象，但并非都可用作熒光色素。只有那些能產生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化
免疫熒光技術的特點有哪些？
該技術的主要特點是：特異性強、敏感性高、速度快。主要缺點是：非特異性染色問題尚未完全解決，結果判定的客觀性不足，技術程序也還比較復雜。 熒光免疫法按反應體系及定量方法不同，還可進一步分做若干種。與放射免疫法相比，熒光免疫法無放射性污染，并且大多操作簡便，便于推廣。國外生產的TDM用試劑盒，有相
間接免疫熒光術的技術特點
中文名稱間接免疫熒光英文名稱indirect immunofluorescence定 義直接免疫熒光技術的改進。待檢細胞首先用未標記的抗體處理，使之與特異的抗原形成復合物，然后再用抗抗體的熒光標記抗體著色，即可檢測出特異抗原在細胞中的存在部位，具有熒光增強效應。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞
免疫熒光技術的起源和原理
免疫熒光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantibodytechnique)。用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的熒
什么時候使用免疫熒光技術
檢測水平不一樣 免疫電鏡技術是免疫化學技術與電鏡技術結合的產物，是在超微結構水平研究和觀察抗原、抗體結合定位的一種方法學。它主要分為兩大類：一類是免疫凝集電鏡技術，即采用抗原抗體凝集反應后，再經負染色直接在電鏡下觀察；另一類則是免疫電鏡定位技術。免疫電鏡的應用，使得抗原和抗體定位的研究進入到亞細胞的
什么是時間分辨免疫熒光技術
什么是時間分辨免時間分辨熒光免疫測定（TRFIA）是一種非同位素免疫分析技術，它用鑭系元素標記抗原或抗體，根據鑭系元素螯合物的發光特點，用時間分辨技術測量熒光，同時檢測波長和時間兩個參數進行信號分辨，可有效地排除非特異熒光的干擾，極大地提高了分析靈敏度。疫熒光技術
免疫熒光技術基本原理
免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。直接法將標記的特異性
直接免疫熒光抗體法的技術特點
中文名稱直接免疫熒光抗體法英文名稱direct immunofluorescence antibody method定 義直接用熒光素標記的抗體檢測抗原的一種免疫標記技術。應用學科免疫學（一級學科），應用免疫（二級學科），免疫學檢測和診斷（三級學科）
關于免疫熒光技術的基本內容
免疫熒光技術（Immunofluorescence technique ）又稱熒光抗體技術，是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合，利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。 免疫
免疫熒光標記技術是什么
．原理免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性，所以當抗原抗體發生反應時，只要知道其中的一個因素，就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體（或抗原）上，與其相應的抗原（或抗體）結合后，在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。直接法：將標記
抗核抗體與間接免疫熒光技術
在自身免疫性疾病中，人體組織細胞細胞核的核膜、核內的染色質、非組蛋白，以及核糖核酸（RNA）和相關的蛋白質等都可成為自身免疫反應攻擊的靶子，產生抗核抗體（ANA）。其中有不少抗體因對疾病的診斷有高度的特異性，已成為診斷某一類疾病的血清標志性抗體，如抗雙鏈DNA抗體、抗Sm抗體之于SLE，抗SSB抗體