核酸序列分析
【實驗目的】1、 掌握已知或未知序列接受號的核酸序列檢索的基本步驟;2、 掌握使用BioEdit軟件進行核酸序列的基本分析;3、 熟悉基于核酸序列比對分析的真核基因結構分析(內含子/外顯子分析);4、 了解基因的電子表達譜分析。【實驗原理】針對核酸序列的分析就是在核酸序列中尋找基因,找出基因的位置和功能位點的位置,以及標記已知的序列模式等過程。在此過程中,確認一段DNA序列是一個基因需要有多個證據的支持。一般而言,在重復片段頻繁出現的區域里,基因編碼區和調控區不太可能出現;如果某段DNA片段的假想產物與某個已知的蛋白質或其它基因的產物具有較高序列相似性的話,那么這個DNA片段就非常可能屬于外顯子片段;在一段DNA序列上出現統計上的規律性,即所謂的"密碼子偏好性",也是說明這段DNA是蛋白質編碼區的有力證據;其它的證據包括與"模板"序列的模式相匹配、簡......閱讀全文
核酸序列分析
【實驗目的】1、?掌握已知或未知序列接受號的核酸序列檢索的基本步驟;2、?掌握使用BioEdit軟件進行核酸序列的基本分析;3、?熟悉基于核酸序列比對分析的真核基因結構分析(內含子/外顯子分析);4、?了解基因的電子表達譜分析。【實驗原理】針對核酸序列的分析就是在核酸序列中尋找基因,找出基因的位置和
核酸序列分析實驗
實驗方法原理針對核酸序列的分析就是在核酸序列中尋找基因,找出基因的位置和功能位點的位置,以及標記已知的序列模式等過程。在此過程中,確認一段 DNA 序列是一個基因需要有多個證據的支持。一般而言,在重復片段頻繁出現的區域里,基因編碼區和調控區不太可能出現;如果某段 DNA 片段的假想產物與某個已知的蛋
核酸序列分析的一般流程
1.1 核酸序列的檢索?http://www.ncbi.nlm.nih.gov:80/entrez/query.fcgi?db=Nucleotide?1.2 核酸序列的同源性分析?1.2.1 基于NCBI/Blast軟件的核酸序列同源性分析?http://www.ncbi.nlm.nih.gov/b
核酸序列的一般分析流程
核酸序列的一般分析流程1.1 核酸序列的檢索http://www.ncbi.nlm.nih.gov:80/entrez/query.fcgi?db=Nucleotide 1.2 核酸序列的同源性分析 1.2.1 基于NCBI/Blast軟件的核酸序列同源性分析 http://www.nc
核酸和蛋白質序列分析1
在獲得一個基因序列后,需要對其進行生物信息學分析,從中盡量發掘信息,從而指導進一步的實驗研究。通過染色體定位分析、內含子/外顯子分析、ORF分析、表達譜分析等,能夠闡明基因的基本信息。通過啟動子預測、CpG島分析和轉錄因子分析等,識別調控區的順式作用元件,可以為基因的調控研究提供基礎。通過蛋白質基本
核酸序列的一般分析流程
1.1 核酸序列的檢索?http://www.ncbi.nlm.nih.gov:80/entrez/query.fcgi?db=Nucleotide?1.2 核酸序列的同源性分析?1.2.1 基于NCBI/Blast軟件的核酸序列同源性分析?http://www.ncbi.nlm.nih.gov/b
核酸和蛋白質序列分析2
(2)輸出:除了以文本形式外,還可以通過JalView顯示和編輯結果。此外,還可以另外使用GeneDoc(常見于文獻)及DNAStar軟件等顯示結果。多序列比對的結果還用于進一步繪制進化樹。3、ORF(Open Reading Frame)分析從核酸序列翻譯得到蛋白質序列,需要進行ORF分析,每個生
核酸序列的檢索實驗
實驗方法原理掌握核酸序列檢索的操作方法;熟悉GenBank數據庫序列格式及其主要字段的含義;了解EMBL數據庫序列格式及其主要字段的含義;熟悉GenBank數據庫序列格式的FASTA序列格式顯示與保存;實驗材料電腦儀器、耗材筆記本筆實驗步驟1. ?使用Entrez信息查詢系統檢索核酸序列BC0608
什么是標準核酸序列?
標準核酸序列系指供藥品標準中要求的種屬源性鑒別或鑒定的核酸序列,其具有確定的堿基排列順序,是實施核酸檢測的基礎,用于藥品檢驗、藥品質量控制中涉及的動物、植物、微生物以及重組生物制品的種屬鑒別或鑒定。
標準核酸序列的分類
標準核酸序列可分為植物來源、動物來源、微生物來源及重組生物制品的鑒別或鑒定用標準核酸序列等。 1.植物來源 植物來源的標準核酸序列系指用種屬來源明確的植物樣本按DNA測序技術指導原則測定得到的標準序列,可用于植物來源的物種如中藥材、中藥飲片或提取物等的原植物鑒別或鑒定。 2.動物來源 動
核酸序列擴增法的定義
中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點,將結合位點序列與靶序列相連,然后產生靶分子的RNA拷貝,形成反轉錄和RN
細胞組分的分析方法——核酸序列的原位雜交
一.基本原理 核酸分子雜交技術是目前分子生生物學、細胞生物學和生物化學研究中應用最廣泛的技術之一,是定性、定量和定位檢測兩條來源不同的聚核苷酸鏈上堿基順序同源性的一種手段。DNA分子是高度有序的雙鍵分子。一條鏈的堿基與另一條鏈的堿基以氫鍵配對相連.形成腺嘌呤與胸腺嘧啶(A.T),鳥嘌呤與胞嘧啶(G
依賴核酸序列的擴增技術簡述
該技術的檢測反應有賴于AMV逆轉錄酶、噬菌體T7RNA多聚酶、核糖核酸酶H、兩種特別設計的特異性寡核苷酸引物和分子信標探針共同協作而完成。 NASBA全稱是nucleic acid sequence-based amplification,即依賴核酸序列的擴增技術。 依賴核酸序列的擴增技術,是
依賴核酸序列的擴增技術相關
NASBA的簡要過程如下:1.RNA模板鏈進入反應混合物后,第一個引物首先與模板鏈的3'端結束。2. 反轉錄酶,合成反義的補償的DNA鏈。3. RNA 酶H(一種核糖核酸內切酶,能夠特異性地水解雜交到DNA鏈上的RNA磷酸二酯鍵,分解RNA/DNA雜交體系中的RNA鏈,但不能消化單鏈或雙
依賴核酸序列的擴增技術檢測
1 核酸提取 NASBA 方法的核酸提取可按照常規的RNA提取方法進行,根據實際需要可以采取不同的方法。 2 核酸擴增 將純化的RNA 加到標準的NASBA 反應體系中后,先在65 ℃條件下作用5 min 去除RNA 的二級結構,然后在恒溫的42 ℃條件下開始擴增反應。 3 產物的檢測
依賴核酸序列的擴增技術敘述
國內外的研究結果均表明,草莓組織中富含多糖等物質,分離優質核酸較困難,核酸巾的雜質影響taq DNA聚合酶的活性,從而影響PCR技術在草莓病毒檢測中的應用。為了提高利用PCR技術草莓病毒檢測的穩定性,國內外的學者在草莓核酸提取方法做了較多的研究,利用OIAGEN公司生產的植物RNA提取試劑盒(P
核酸序列擴增法的技術特點
中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點,將結合位點序列與靶序列相連,然后產生靶分子的RNA拷貝,形成反轉錄和RN
標準核酸序列的使用和維護
標準核酸序列的使用 將按DNA測序技術指導原則測定得到的供試品DNA序列與標準核酸序列進行計算比對,進而結合判定標準進行種屬鑒別或鑒定。判定標準的制定應考慮不同物種的變異范圍,并在相應通則或品種項下予以明確。核酸序列比對方法一般建議根據樣品特點從以下三種方法中選擇采用。 1.BLAST法
依賴核酸序列的擴增技術解析
1.概述:依賴核酸序列的擴增(Nucleic acid sequence-basedamplification,NASBA),又稱自主序列復制系統(self-sustainedsequence replication,3SR)或再生長序列復制技術。1990年Guatelli等首先報道了這一技術.NA
核酸序列的擴增技術優勢
相對于免疫學方法或其他基因檢測法,NASBA在試驗的快速、敏感性、特異性方面有更多的優勢。 特異性強:NASBA是一種快速、等溫的RNA擴增技術,通過AMV逆轉錄酶和T7 RNA聚合酶進行的擴增反應,因為反應條件溫和以及比PCR短的反應時間,因此轉錄更加忠實于模板,錯配率很低,因而特異性更強。
核酸和蛋白質序列分析的內容和方法有哪些
核酸和蛋白質序列分析的內容和方法有哪些蛋白質結構分析方法:X射線晶體衍射分析和核磁共振x 射線衍射法的分辨率可達到原子的水平,使它可以測定亞基的空間結構、各亞基間的相對拓撲布局,還可清楚的描述配體存在與否對蛋白質的影響。多維核磁共振波譜技術已成為確定蛋白質和核酸等生物分子溶液三維結構的唯一有效手段。
核酸和蛋白質序列分析的內容和方法有哪些
核酸和蛋白質序列分析的內容和方法有哪些蛋白質結構分析方法:X射線晶體衍射分析和核磁共振x 射線衍射法的分辨率可達到原子的水平,使它可以測定亞基的空間結構、各亞基間的相對拓撲布局,還可清楚的描述配體存在與否對蛋白質的影響。多維核磁共振波譜技術已成為確定蛋白質和核酸等生物分子溶液三維結構的唯一有效手段。
遴選標準核酸序列的工作流程
遴選標準核酸序列的工作流程包括:品種的確定、候選品種核酸物質原料的選擇、候選標準核酸序列的建立和審核批準。 1.品種的確定 除另有規定外,根據藥品標準制修訂中擬采用待測物核酸序列進行質量控制的需要,確定需制備的品種。藥品標準中采用核酸序列進行鑒定的品種,都應建立標準核酸序列。 2.候選品種
核酸序列擴增法的定義和原理
中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點,將結合位點序列與靶序列相連,然后產生靶分子的RNA拷貝,形成反轉錄和RN
依賴核酸序列的擴增的基本方法
基本方法為:將引物,標本加入擴增反應液,65℃1min使RNA分子二級結構打開,降溫至37℃加入逆轉錄酶,T7rna聚合酶和RNaseH,并在37℃反應1——1.5小時,其產物經瓊脂 糖電泳,溴乙錠染色即可在紫外儀下看到條帶.NASBA的特點為操作簡便,不需特殊儀器,不需溫度循環.整個反應過程由三種
DNA-序列分析技術
DNA序列分析技術可用于:(1)分析物種的遺傳多樣性;(2)鑒定新的物種;(3)用于比較基因組學。實驗方法原理本節描述運用Perkin-Elmer 公司的373 和377 型全自動DNA 測序儀進行雙鏈DNA 測序的方法。熱循環測序反應使用 Applied Biosystems Inc.的DyeDe
DNA-序列分析技術
試劑、試劑盒 瓊脂糖TE 水飽和酚無水乙醇70%乙醇TEMED測序酶溴化乙錠儀器、耗材 電泳儀離心管離心機冰浴箱恒溫板DNA 測序儀
DNA-序列分析技術
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本節描述運用Perkin-Elmer 公司的373 和377 型全自動DNA 測序儀進行雙鏈DNA 測序的方法。熱循環測序反應使用 Applied Biosystems Inc.的DyeDeoy TM Terminator
依賴核酸序列的擴增技術的定義和原理
1.概述:依賴核酸序列的擴增(Nucleic acid sequence-based amplification,NASBA),又稱自主序列復制系統(self- sustainedsequence replication,3SR)或再生長序列復制技術。1990年Guatelli等首先報道了這一技術.
DNA序列分析技術2
3)電泳電極緩沖液 1 倍TBE(pH 值8.0)預電泳 30 分鐘至1 小時恒溫方式 測序膠板上夾蓋鋁恒溫板電泳溫度 50℃左右電泳條件 恒功率 90~110W電泳時間 2.5 小時至5 小時4)干膠制備和壓片電泳結束后取下膠板,用工具撬開玻璃板,使膠留在其中一塊板上。將裁剪好的新華3 號濾紙在膠