液相色譜在線凈化電噴霧串聯質譜應用（一）
液相色譜在線凈化-電噴霧串聯質譜測定水產品中大環內酯和林可胺類藥物殘留 摘 要：建立了水產品中大環內酯類抗生素[紅霉素（ERM）、羅紅霉素（ROM）、替米卡星（TIL）、泰樂菌素（T Y L ） 、北里霉素（K I T ） 、交沙霉素（JOS）、竹桃霉素（OLM）、螺旋霉素Ⅰ（SPM-Ⅰ）和林可胺類（林可霉素(LIN)和氯林可霉素（CLD））的高效液相色譜－電噴霧串聯質譜(LC-ESI-MS/MS)檢測方法。樣品經提取后、反相液相色譜分離凈化后進行質譜分析, 在選擇反應監測模式(SRM) 下進行特征母-子離子對信號采集。根據保留時間和母離子及兩個特征子離子信息進行定性分析，以基峰離子進行定量。大環內酯類殘留的檢測限( S/N = 3) 為 0.1-0.2 μg/Kg，定量限為 1.0 μg/Kg，在1.0～200 ng/ mL時峰強度與質量濃度的線性關系良好( R2 > ......閱讀全文
液相色譜流動相不過濾
因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥，因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾，而常用的方法是濾過，可采用Millipore濾膜（0.2μm或0.45μm）等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒（或片）。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。
高效液相色譜流動相選擇
流動相選擇1）由強到弱：一般先用90％的乙腈（或甲醇）／水（或緩沖溶液）進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況調整有機溶劑（乙腈或甲醇）的比例。2）三倍規則：每減少10％的有機溶劑（甲醇或乙腈）的量，保留因子約增加３倍，此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中，注意觀察
液相色譜流動相走空
泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完，否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環，最終產生漏液。
液相色譜流動相的貯存
液相色譜流動相的貯存流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內，不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑，導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統，可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴，防止溶劑揮發引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸
高效液相色譜流動相選擇
?????? 流動相的性質要求 ?????? 一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。?????? 流動相選擇 ?????? 1：由強到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況
液相色譜維護誤區
??關于標示 1、色譜柱的流向不能改變 在我們常規思維中，色譜柱上標示的流向是不可改變的，每次使用都要遵循。可是，大家有沒有想過這個方向的作用是什么呢？為什么要標示一個使用方向呢？ 其實色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的，標示方向的目的就是讓我們在使用中記住流動相從哪個方向流
waters液相色譜學校
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液相色譜維護誤區
?? 關于標示 1、色譜柱的流向不能改變 在我們常規思維中，色譜柱上標示的流向是不可改變的，每次使用都要遵循。可是，大家有沒有想過這個方向的作用是什么呢？為什么要標示一個使用方向呢？ 其實色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的，標示方向的目的就是讓我們在使用中記住流動相從哪個方向流入色譜柱，那
液相色譜保養知識
1、? 色譜柱長時間不用，存放時，柱內應充滿溶劑，兩端封死(如ACN適于反相色譜柱，正相色譜柱用相應的有機相)2、? 對于手動進樣器，當使用緩沖溶液時，要用水沖洗進樣口，同時搬動進樣閥數次，每次數毫升。3、流動相使用前必須過濾，不要使用多日存放的蒸餾水(易長菌)。4、帶seal-wash的1100，
如何使用液相色譜
1．電源準備打開穩壓器電源開關，須待電壓指示至220V后，才能開啟其他有關設備。2．LC-600高效液相色譜儀的準備試劑：三氟乙酸乙腈超純水（Millipore超純水）冰乙酸溶液配置：貯液瓶與流動相的準備A液0.1%三氟乙酸（三氟乙酸1ml，超純水999ml）室溫保存B液60%乙腈（乙腈600ml，
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
簡述液相色譜理論
液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相，稱為經典液相色譜法，此方法柱效低、時間長（常有幾個小時）。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在經典液相色譜法的基礎上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜柱再生
1、色譜柱的使用說明： （1）色譜柱使用前注意事項：色譜柱的儲存液無特殊說明，均為評價報告所示的流動相。在使用前，一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應先用10％左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜保養知識
1、? 色譜柱長時間不用，存放時，柱內應充滿溶劑，兩端封死(如ACN適于反相色譜柱，正相色譜柱用相應的有機相)2、? 對于手動進樣器，當使用緩沖溶液時，要用水沖洗進樣口，同時搬動進樣閥數次，每次數毫升。3、流動相使用前必須過濾，不要使用多日存放的蒸餾水(易長菌)。4、帶seal-wash的1100，
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜的用途
高效液相色譜應用很廣泛，基本能對有機化合物中百分之七十到百分之八十的化合物進行分離與檢測，下面以安捷倫液相色譜技術做為舉例：應用液相色譜用途廣泛，已經成為大多數化學行業和生命科學行業中的標準配置。安捷倫液相色譜和液－質聯用系統正為各種客戶群服務，如藥物研制和生產、蛋白質、食品安全、環境、國土安全和石
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
高壓液相色譜簡述
Martin 和Synge在1941年就提出高效相色譜的設想，然而直到六十年代后期，由于各種技術的發展，高效液相色譜才付諸實現。這種色譜技術曾被稱為高速液相色譜（HighSpeed Liquid Chromatography），高壓液相色譜（High Parss-ure Lipuid C
高效液相色譜柱
一、怎樣選擇色譜柱現代高效液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬，要做合適的選擇，必須對此有一定的認識和了解。（1）硅膠基質填料：1、正相色譜正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica），以及其他具有極性官能團，如胺基團（NH2，APS）和氰基團（CN，C
現代液相色譜進展
? 色譜法最初僅僅是作為一種分離手段，是根據混合物中不同組分在流動相和固定相間具有不同的分配系數，當兩相作相對運動時，這些組分在兩相間進行反復多次的分配，從而得到分離。直到五十年代，人們才開始把這種分離手段與檢測系統連接起來，成為一種獨特的分析方法，是幾十年來分析化學中最富活力的領域之一，也是生命科
液相色譜工作原理
系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動時，經過反復多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被
液相色譜工作原理
系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動時,經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被
反相高效液相色譜
實驗材料 蛋白質標樣試劑、試劑盒 乙睛（HPLC級）去離子水（HPLC級） 三氟乙酸（TFA)儀器、耗材 HPLC 色譜系統 反相柱實驗步驟 1.進行空白或對照層析譜分析（即在步驟①中不加樣）。一般這是進行一天層析工作的開始。下面是推薦使用的用于 RP-HPLC 系統評估的標準色譜條件。（1）線性梯
液相色譜小知識
高效液相經常使用粒徑5um?的色譜柱，用過一段時間后，柱壓會略有升高，尤其是做中藥。常用來洗色譜柱的溶劑為甲醇，當色譜柱用甲醇洗過之后，再用含乙腈的流動相平衡，會使柱壓迅速升高，色譜柱滴漏，這是由于甲醇和乙腈匯合產生局部高壓。因此，這種情況下，應慢慢升高流速，可以從0.6ml/min開始，一步步的平
高效反相液相色譜
反相色譜（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液
高效液相色譜分類
按照分離原理分類，大概可以分為：1.吸附色譜：基于各組分對固定相的吸附能力不同而實現分離的方法。比較常見的色譜柱是火星硅膠、氧化鋁、活性炭、聚乙烯、聚酰胺等。用于測定結構異構體。2.分配色譜：基于樣品在流動相和固定相之間溶解度不同的原理實現分離。比較常見的正相氰基柱（正相）和極為普遍的C18色譜柱（
液相色譜柱通論
選擇液相色譜柱簡單思路1. 確定分離目的 ? ? ?確定你的應用是否要求高分離度、短分析時間、高靈敏度、長柱壽命，低的操作成本等等。2. 評估分析物的化學性質 ? ? ?評估分析物的化學性質. . 諸如化學結構、溶解性、穩定性等等。3. 選擇合適的色譜柱 ? ? ?了解色譜填料的物理和化學性