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  • 噬菌體檢查

    病原體是許多疾病的主要誘因,對人類健康構成了嚴重威脅。近年來,食品、水源和環境中致病微生物已造成世界上許多流行病的爆發。因此,為了控制病原體的傳播并減少流行病的發生,檢測致病微生物的技術的成熟可行性顯得尤為重要。 培養物細菌分離和鑒定是實驗室檢測病原體的“金標準”方法。該檢測方法雖然足夠靈敏,但耗時較長。目前,后續開發的許多快速檢測方法已克服了這個問題。這些快速檢測方法可分為核酸、抗體和適配體層面檢測,雖然這些快速檢測法在時效上優于培養物檢測法。但是,也有各自的優缺點(表1),仍需要對其進行改進。表1 各種快速病原細菌檢測法的優劣點和敏感度 提高檢測精確度和縮短檢測時間是研發快速檢測的目標。目前,生物傳感策略可以實現這一目標。根據國際純粹與應用化學聯合會(IUPAC)提出的生物傳感器的定義,“生物傳感器是一種自我控制的設備,它包含生物識別原件(生物探針/生物受體),該傳感器與換能器相連,將生物信號轉換為計算機可讀信號,然......閱讀全文

    噬菌體生物性狀

      噬菌體的體積小,其形態有蝌蚪形、微球形和細桿形,以蝌蚪形多見。噬菌體是由核酸和蛋白質構成。蛋白質起著保護核酸的作用,并決定噬菌體的外形和表面特征。其核酸只有一種類型,即DNA或RNA,雙鏈或單鏈,環狀或線狀。

    噬菌體的臨床應用

    (1)細菌的鑒定與分型噬菌體的作用具有高度特異性。一種噬菌體只能裂解一種或與該種相近的細菌,故可用于細菌的鑒定和分型。目前已利用噬菌體將金黃色葡萄球菌分為四個群數百個型,這種用噬菌體分型的方法,在流行病學調查上,對追查和分析這些細菌性感染的傳染源很有幫助。(2)檢測標本中的細菌應用噬菌體效價增長試驗

    Lambda(噬菌體)DNA-Miniprep

    David HarryInstitute of Forest GeneticsUSDA Forest ServicePacific Southwest Research StationAugust 26, 1993Background :There are many published method

    噬菌體的臨床應用

    (1)細菌的鑒定與分型噬菌體的作用具有高度特異性。一種噬菌體只能裂解一種或與該種相近的細菌,故可用于細菌的鑒定和分型。目前已利用噬菌體將金黃色葡萄球菌分為四個群數百個型,這種用噬菌體分型的方法,在流行病學調查上,對追查和分析這些細菌性感染的傳染源很有幫助。(2)檢測標本中的細菌應用噬菌體效價增長試驗

    噬菌體展示技術簡介

    噬菌體展示技術是一種將外源肽或蛋白基因與噬菌體特定蛋白基因在其表面進行融合表達的新技術。該技術實現了表型與基因型的統一。隨著噬菌體展示技術的進一步發展,其優越性被越來越多的實驗室所認識,使得該技術的使用范圍不斷擴展,也使該技術得以不斷的完善和發展。

    噬菌體的核酸特點

    ss RNA:噬菌體中所含的核酸是單鏈RNA。ds RNA:噬菌體中所含的核酸是雙鏈RNA。ss DNA:噬菌體中所含的核酸是單鏈DNA。ds DNA:噬菌體中所含的核酸是雙鏈DNA。

    噬菌體顆粒的分類

    噬菌體顆粒在結構上有很大差別,一般可分成三種類型,即無尾部結構的二十面體,有尾部結構的二十面體和線狀體,迄今已知的噬菌體大多數是有尾部結構的二十面體。噬菌體有毒(烈)性噬菌體和溫和噬菌體兩種類型。侵入宿主細胞后,隨即引起宿主細胞裂解的噬菌體稱作毒性噬菌體。毒性噬菌體被看作正常表現的噬菌體。溫和噬菌體

    λ噬菌體DNA提取方法

    成功走出第一步:DNA提取 λ噬菌體是最早使用的克隆載體 ? ,λ噬菌體的基因組是一長度約為50kb的雙鏈DNA分子,它在宿主細胞有兩種生活途徑,其一是裂解生長,環狀DNA分子在細胞內多次復制,合成大量噬菌體基因產物,裝配成噬菌體顆粒,裂解宿主菌再進行下一次感染;其二是溶源性生長,即感染細胞

    噬菌體展示技術介紹

    噬菌體展示技術(phage display technology)是將多肽或蛋白質的編碼基因或目的基因片段克隆入噬菌體外殼蛋白結構基因的適當位置,在閱讀框正確且不影響其他外殼蛋白正常功能的情況下,使外源多肽或蛋白與外殼蛋白融合表達,融合蛋白隨子代噬菌體的重新組裝而展示在噬菌體表面。被展示的多肽或

    噬菌體侵染細菌實驗

    原理:噬菌體T2有一個蛋白質的外殼,DNA裹在其中。當噬菌體T2感染大腸桿菌時,它的尾部吸附在菌體上。然后,菌體內形成大量噬菌體,菌體裂解后,釋放出幾十個乃至幾百個與原來感染細菌一樣的噬菌體T2。材料:大腸桿菌,LB培養基,恒溫箱,T2噬菌體過程:第一階段(感染階段 ) 噬菌體侵染寄主細胞的第一步是

    M13噬菌體

    ·?????????M13 Phage?(Michael Blaber)Very useful background information about M13: its infection, replication, packing, cloning. If you are new to phag

    λ噬菌體DNA的制備

    實驗概要本實驗介紹了λ噬菌體DNA的制備、操作步驟和注意事項。實驗原理λ噬菌體是最早使用的克隆載體,λ噬菌體的基因組是一長度約為50kb的雙鏈DNA分子,它在宿主細胞有兩種生活途徑:其一是裂解生長,環狀DNA ? 分子在細胞內多次復制,合成大量噬菌體基因產物,裝配成噬菌體顆粒,裂解宿主菌再進行下一次

    什么是DNA噬菌體?

    中文名稱DNA噬菌體英文名稱DNA phage定  義能感染細菌并在細菌內復制自身的DNA病毒。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)

    烈性噬菌體的簡介

      噬菌體的繁殖一般分為5個階段,即吸附、侵入、增殖(復制與生物合成)、成熟(裝配)和裂解(釋放)。凡在短時間內能連續完成以上5個階段而實現其增殖的噬菌體,稱為烈性噬菌體(virulent phage),反之則稱為溫和噬菌體(temperate phage)。

    噬菌體的繁殖特點

    1.毒性噬菌體指在宿主菌體內復制增殖,產生許多子代噬菌體,并最終裂解細菌。毒性噬菌體的增殖方式是復制,其增殖過程經歷吸附穿入、生物合成和成熟釋放3個階段。進入菌細胞內的噬菌體核酸首先經早期轉錄產生早期蛋白質,并復制子代核酸,再進行晚期轉錄產生噬菌體的結構蛋白。子代噬菌體達到一定數量時,由于噬菌體合成

    噬菌體都有哪些種類

      蛋白質結構  無尾部結構的二十面體:這種噬菌體為一個二十面體,外表由規律排列的蛋白亞單位——衣殼組成,核酸則被包裹在內部。  有尾部結構的二十面體:這種噬菌體除了一個二十面體的頭部外,還有由一個中空的針狀結構及外鞘組成的尾部,以及尾絲和尾針組成的基部。  線狀體:這種噬菌體呈線狀,沒有明顯的頭部

    噬菌體侵染細菌實驗

    這種說法有點偏頗。1、當噬菌體的DNA用32磷標記后,它吸附到大腸桿菌表面,然后把DNA注入到大腸桿菌里面,利用其中的原料復制子代的DNA。離心后,較輕的噬菌體懸浮在上清液中,大腸桿菌及一些較重的顆粒沉淀在底部,由于噬菌體中含有32磷的DNA都注入到大腸桿菌里面,所以上清液放射性很低,底部的沉淀物放

    溫和噬菌體的定義

    噬菌體侵入宿主細胞后,噬菌體的DNA只整合在宿主的核染色體上,并可長期隨宿主DNA的復制而進行同步復制,一般情況下不進行增殖,不引起宿主細胞裂解的噬菌體,稱溫和噬菌體或溶源噬菌體。

    噬菌體的侵染過程

    一個典型的噬菌體的侵染細菌的過程,可以分為三個階段:感染階段、增殖階段和成熟階段。感染階段:噬菌體侵染寄主細胞的第一步是“吸附”,即噬菌體的尾部附著在細菌的細胞壁上,然后進行“侵入”。噬菌體先通過溶菌酶的作用在細菌的細胞壁上打開一個缺口,尾鞘像肌動球蛋白的作用一樣收縮,露出尾軸,伸入細胞壁內,如同注

    M13-噬菌體衣殼蛋白改造在改良噬菌體展示技

    M13 噬菌體衣殼蛋白改造在改良噬菌體展示技術中的應用 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 羧芐青霉素 氯霉素 大腸桿菌 CJ2

    用噬菌體ElISA快速鑒定噬菌體展示蛋白的結合親和性

    單價噬菌體展示系統能使一個單獨的蛋白質(或多肽)分子呈遞在噬菌體顆粒表面,這樣的蛋白質與野生型pⅢ衣殼蛋白相連,作為融合蛋白在輔助噬菌體感染的大腸桿菌細胞中,由噬菌粒載體翻譯表達出來。這種展示系統能實現單價展示,是由于這種融合蛋白極少替代來自輔助噬菌體基因組的野生型pⅢ蛋白。這種展示可以是高度可變的

    一種靶向控制噬菌體來對抗細菌的方法:噬菌體療法

      有人的地方就有江湖?微觀世界其實也一樣殘酷。研究人員發現:假單胞菌會利用自己產生的信號分子,選擇性操縱競爭菌株中的噬菌體來擊敗敵人。這個結果或許提示了一種靶向控制噬菌體來對抗細菌的方法:噬菌體療法。    噬菌體仍然是人類微生物群中一個相對未知的組成部分。然而,它們可以在細菌的生命周期中發揮強大

    噬菌體中和試驗的特點

    中文名稱噬菌體中和試驗英文名稱bacteriophage neutralization test;phage neutralization test定  義一種檢測低水平抗噬菌體抗體的敏感試驗。即將噬菌體與特異性抗體共溫育,以抑制該噬菌體感染宿主,通過觀察噬菌斑數量變化,可對中和作用進行定量。應用學

    細胞化學詞匯DNA噬菌體

    中文名稱:DNA噬菌體英文名稱:DNA phage定  義:能感染細菌并在細菌內復制自身的DNA病毒。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)

    噬菌體展示技術的應用

    噬菌體展示可用于蛋白質-蛋白質相互作用的研究。

    噬菌體裂菌的原理

    噬菌體吸附在目標細胞表面,破壞其膜結構,使細胞裂解死亡。(噬菌體是病毒,無細胞結構。)

    什么是噬菌體展示技術?

    噬菌體展示技術是一種將外源肽或蛋白基因與噬菌體特定蛋白基因在其表面進行融合表達的新技術。該技術實現了表型與基因型的統一。隨著噬菌體展示技術的進一步發展,其優越性被越來越多的實驗室所認識,使得該技術的使用范圍不斷擴展,也使該技術得以不斷的完善和發展。

    噬菌體展示技術的原理

    噬菌體展示技術是將多肽或蛋白質的編碼基因或目的基因片段克隆入噬菌體外殼蛋白結構基因的適當位置,在閱讀框正確且不影響其他外殼蛋白正常功能的情況下,使外源多肽或蛋白與外殼蛋白融合表達,融合蛋白隨子代噬菌體的重新組裝而展示在噬菌體表面。被展示的多肽或蛋白可以保持相對獨立的空間結構和生物活性,以利于靶分子的

    血清學篩選噬菌體

    1. 準備 NZY agar plates(至少用前 24 小時倒好) ,用前在37℃培養箱中烘烤1-2 小時以去除水滴。2. 將過夜培養的 XL1-blueMRF' 細菌 2000 轉/ 分,離心10 分鐘,將細菌溶解在10mMMgSO4 中,調整細菌濃度為 OD600=0.5。3. 融化

    噬菌體克隆的純化實驗

    實驗材料 噬菌體試劑、試劑盒 LB頂層瓊脂糖氯仿SMMgSO4儀器、耗材 培養箱牙簽硝酸纖維素膜實驗步驟 1. ?在直徑82 mm LB平極上倒入含200 μl 宿主菌的3 ml 0.7%頂層瓊脂糖,放置10 min。?2. ?通過放射自顯影膠片上的雜交斑點確定陽性噬斑在原平板上的位置,用牙簽輕輕插

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