原代細胞甲基綠哌咯寧法顯示DNA和RNA
基本原理：甲基綠（methyl green）和哌咯寧（pyronin）均為堿性染料，因此可與帶負電荷的磷酸根形成鹽。甲基綠分子有2個正電荷，易與雙鏈DNA分子結合使原代細胞核內的DNA呈藍綠色。哌咯寧分子有一個正電荷，易與單鏈RNA分子結合使原代細胞質和核仁內的RNA顯示紅色。也有人認為染色原理與核酸分子的空間構型有關。 配制試劑：1. 0.2mol/L pH4.8的乙酸緩沖液的配制將1.2ml冰乙酸加蒸餾水定容至100ml，在使用時再加2.72g乙酸鈉（NaAc·3H2O），待完全溶解后，即可使用；2. 甲基綠-哌咯寧染色液配制A液：取2g甲基綠加入100ml pH4.8的0.2mol/L的乙酸緩沖液中即可；B液：取1g哌咯寧加入100ml pH4.8的0.2mol/L的......閱讀全文
甲基綠的計算化學數據
1、疏水參數計算參考值（XlogP）：無可用2、氫鍵供體數量：03、氫鍵受體數量：34、可旋轉化學鍵數量：55、拓撲分子極性表面積（TPSA）：6.36、重原子數量：327、表面電荷：08、復雜度：6459、同位素原子數量：010、確定原子立構中心數量：011、不確定原子立構中心數量：012、確定化
甲基綠災害處理措施
滅火劑1、用水霧、干粉、泡沫或二氧化碳滅火劑滅火。2、避免使用直流水滅火，直流水可能導致可燃性液體的飛濺，使火勢擴散。滅火注意事項及防護措施1、消防人員須佩戴攜氣式呼吸器，穿全身消防服，在上風向滅火。2、盡可能將容器從火場移至空曠處。3、處在火場中的容器若已變色或從安全泄壓裝置中發出聲音，必須馬上撤
甲基綠使用安全措施
1、操作人員應經過專門培訓，嚴格遵守操作規程。2、操作處置應在具備局部通風或全面通風換氣設施的場所進行。3、避免眼和皮膚的接觸，避免吸入蒸汽。4、遠離火種、熱源，工作場所嚴禁吸煙。5、使用防爆型的通風系統和設備。6、如需罐裝，應控制流速，且有接地裝置，防止靜電積聚。7、避免與氧化劑等禁配物接觸。8、
甲基綠儲存注意事項
1、儲存于陰涼、通風的庫房。2、庫溫不宜超過37°C。3、應與氧化劑、食用化學品分開存放，切忌混儲。4、保持容器密封。5、遠離火種、熱源。6、庫房必須安裝避雷設備。7、排風系統應設有導除靜電的接地裝置。8、采用防爆型照明、通風設置。9、禁止使用易產生火花的設備和工具。10、儲區應備有泄漏應急處理設備
甲基綠的理化性質
甲基綠是具有金屬光澤的綠色微結晶或亮綠色粉末。溶于水，顯藍綠色。為堿性染料，它易與聚合程度高的DNA結合呈現綠色。又稱雙綠SF。綠色晶體，具金黃色光澤，或淡綠色粉末。溶于水，呈藍綠色。微溶于乙醇，不溶于乙醚、戊醇。
原代細胞的培養和維持
一、原代細胞的培養與維持1、靜置貼壁細胞（包括半貼壁細胞的培養）凡經消化液處理實體組織來源的細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性，細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L,培養基可用 Eagle（MEM）或DNEM培養，小牛血清濃度為10%~80%。在起始的2天中盡量減少振蕩，以
真菌DNA和RNA提取方法
真菌DNA和RNA提取方法一、真菌DNA的提取(方法一)實驗試劑(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1％SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(p
RNA和DNA病毒的區別
DNA病毒和RNA病毒的區別，主要是病毒核酸的類型不同，DNA病毒的病毒核酸是DNA，RNA病毒的病毒核酸是RNA。RNA病毒的復制過程比較獨特，由于遺傳信息直接保存在RNA上，因此復制過程通常發生在細胞質內。RNA病毒是用它們自己的RNA復制酶來對基因組進行復制，但是DNA病毒基因組的復制發生在細
DNA的誘變和甲基化
·?????????In Vitro Mutagenesis Using Altered Sites?(Bowtell Lab)?In vitro Mutagenesis with dut ung single stranded DNA?(Hahn Lab)·?????????Site-direct
用一步法從細胞和組織中同時制備DNA、RNA和蛋白質
實驗方法原理 同 Chomczynski 和 Sacchi 兩人于 1987 年報道的 RNA 快速提取法一樣，這種方法包括用含異硫氰酸胍和酚的一種單相液來裂解細胞。加入氯仿產生了第二相（有機相），DNA 和蛋白質在有機相中被抽提，RNA 則被留在上層水相中。實驗材料 源細胞或組織試劑、試劑盒 氯仿
用一步法從細胞和組織中同時制備DNA、RNA和蛋白質
同 Chomczynski 和 Sacchi 兩人于 1987 年報道的 RNA 快速提取法一樣，這種方法包括用含異硫氰酸胍和酚的一種單相液來裂解細胞。加入氯仿產生了第二相（有機相），DNA 和蛋白質在有機相中被抽提，RNA 則被留在上層水相中。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方
用一步法從細胞和組織中同時制備DNA、RNA和蛋白質
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 同 Chomczynski 和 Sacchi 兩人于 1987 年報道的 RNA 快速提取法一樣，這種方法包括用含異硫氰酸胍和酚的一種單相液來裂解細胞。加入氯仿產生了第二相（有機相），DNA 和蛋白質在有機相中被抽提，RNA
Ⅰ型免疫母細胞性淋巴腺病的發病機制
本病發病機制還不清楚，病人T細胞亞群分析發現本病為T細胞病變，有的病例以抑制性T細胞(TS)增多為主，有的以輔助性T細胞(TH)增多為主，亦有二者都增多，這些T細胞可能產生B細胞刺激因子，促使B細胞增殖，并分泌免疫球蛋白。 1.體內免疫球蛋白產生異常增多，病人發病年齡大，易發生感染，常伴有自身
組織和細胞RNA的制備——（異硫氰酸胍法）
[試劑主要]1．CSB緩沖液：42mM檸檬酸鈉；0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基，N甲基甘氨酸鈉)；0.2 mM β-巰基乙醇。2．變性液：異硫氰酸胍（終濃度 4 M）25g、CSB緩沖液 33ml，混合直至完全溶解，可在65℃助溶。4℃保存備用。3．2 M乙酸鈉：pH 4
概述慢性多潛能性免疫增生綜合征的發病機制
慢性多潛能性免疫增生綜合征發病機制還不清楚。病人T細胞亞群分析發現本病為T細胞病變，有的病例以抑制性T細胞（TS）增多為主，有的以輔助性T細胞（TH）增多為主，亦有二者都增多。這些T細胞可能產生B細胞刺激因子，促使B細胞增殖，并分泌免疫球蛋白。 1.體內免疫球蛋白產生異常增多，病人發病年齡大，
慢性多潛能性免疫增生綜合征的發病機制
慢性多潛能性免疫增生綜合征發病機制還不清楚。病人T細胞亞群分析發現本病為T細胞病變，有的病例以抑制性T細胞（TS）增多為主，有的以輔助性T細胞（TH）增多為主，亦有二者都增多。這些T細胞可能產生B細胞刺激因子，促使B細胞增殖，并分泌免疫球蛋白。 1.體內免疫球蛋白產生異常增多，病人發病年齡大，
研究發現N6甲基腺苷調節人體細胞RNA:DNA雜交的穩定性
近日，英國諾丁漢大學等科研機構的研究人員在Nature Genetics上發表了題為“N6-methyladenosine regulates the stability of RNA:DNA hybrids in human cells”的文章，發現N6-甲基腺苷可以調節人體細胞RNA:DNA
原代細胞的取材和分類方法
將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。 原代細胞培養的步驟一般是：取材→分離→培養和維持，今天我們重點介紹原代細胞的取材和分離方法。 一、取材 人和動
DNA甲基化的定義和作用
DNA甲基化（DNA methylation）為DNA化學修飾的一種形式，能夠在不改變DNA序列的前提下，改變遺傳表現。所謂DNA甲基化是指在DNA甲基化轉移酶的作用下，在基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5號碳位共價鍵結合一個甲基基團。大量研究表明，DNA甲基化能引起染色質結構、DNA構象、DNA穩定性
DNA甲基化的原理和應用
DNA甲基化（DNA methylation）為DNA化學修飾的一種形式，能夠在不改變DNA序列的前提下，改變遺傳表現。所謂DNA甲基化是指在DNA甲基化轉移酶的作用下，在基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5號碳位共價鍵結合一個甲基基團。大量研究表明，DNA甲基化能引起染色質結構、DNA構象、DNA穩定性
DNA甲基化的概念和原理
DNA甲基化是最早被發現、也是研究最深入的表觀遺傳調控機制之一。廣義上的DNA甲基化是指DNA序列上特定的堿基在DNA甲基轉移酶（DNA methyltransferase，DNMT）的催化作用下，以S—腺苷甲硫氨酸（S—adenosyl methionine，SAM）作為甲基供體，通過共價鍵結合的
DNA甲基化的概念和方式
DNA甲基化（methylation）是真核細胞正常而普遍的修飾方式，也是哺乳動物基因表達調控的主要表觀遺傳學形式。DNA甲基化后核苷酸順序及其組成雖未發生改變，但基因表達受影響。盡管甲基化修飾有多種方式，被修飾位點的堿基可以是腺嘌呤的N-6位、胞嘧啶的N-4位、鳥嘌呤的N-7位和胞嘧啶的C-5位，
DNA甲基化的原理和影響
DNA甲基化（DNA methylation）為DNA化學修飾的一種形式，能夠在不改變DNA序列的前提下，改變遺傳表現。所謂DNA甲基化是指在DNA甲基化轉移酶的作用下，在基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5號碳位共價鍵結合一個甲基基團。大量研究表明，DNA甲基化能引起染色質結構、DNA構象、DNA穩定性
RNA－和－DNA－提取的降解問題
降解問題是RNA制備中常常到的問題。因為在 RNA 提取過程中,樣品儲存不當或裂解效率低等情況都會導致降解。對于 DNA 提取,降解不是一個大問題,因為對于 PCR,DNA 可以被剪切并且工作正常,如果不希望有較多剪切的 DNA,可以使用弱裂解的方法。
dna病毒和rna病毒的區分
這兩種病毒的遺傳物質是不一樣的，DNA病毒以DNA作為遺傳物質，而RNA病毒以RNA作為遺傳物質，其次這兩種病毒的結構也是不一樣的，DNA病毒一般是雙螺旋結構的，而RNA病毒一般是單鏈結構的，除此之外，RNA病毒的復制過程要比DNA病毒的更復雜一些，因此在治療上多半也是更困難一點，比如由艾滋病毒引起
真菌的DNA和RNA提取方法
一、真菌DNA的提取(方法一)1.實驗試劑(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1％SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(pH8.0):氯仿:異戊
真菌的DNA和RNA提取方法
搞真菌基因功能研究的不可避免的總要涉及到DNA和RNA提取，由于真菌中有較多的多糖成分影響到所提DNA和RNA的質量和后續的分析。因此一個高質量的、實惠的提取方法是我們的優先選擇，在此分享一下我一直在用的提取方法，供大家參考。真菌DNA的提取（方法一）1.取真菌菌絲0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉2
真菌的DNA和RNA提取方法
一、真菌DNA的提取(方法一)1.實驗試劑(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1％SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(pH8.0):氯仿:異戊
DNA和RNA定量利器：Qubit－4
新一代測序（NGS）實驗中，我們需要將精確量的DNA文庫分子上樣到測序儀中。如果測序運行時的文庫分子過多或過少，都會使數據質量受損。這不僅浪費寶貴的樣本和試劑，也浪費我們和儀器的時間。對于芯片分析（Microarray）和實時定量PCR（qPCR）而言，精確測定樣本中的DNA或RNA也是必需的。以往
真菌的DNA和RNA提取方法
搞真菌基因功能研究的不可避免的總要涉及到DNA和RNA提取，由于真菌中有較多的多糖成分影響到所提DNA和RNA的質量和后續的分析。因此一個高質量的、實惠的提取方法是我們的優先選擇，在此分享一下我一直在用的提取方法，供大家參考。真菌DNA的提取（方法一）1.取真菌菌絲0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉2