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實驗材料 動物組織試劑、試劑盒 PBS乙酸銨乙醇酚氯仿異戊醇TE儀器、耗材 離心機搖床研缽實驗步驟 1. 切下組織并立即剪成小塊，置于液氮中凍結。 2. 將200 mg~1 g 的組織用預冷的研缽和研杵研碎，或用錘子將其搗為細粉末，每100 mg 組織用1. 2 ml 消化緩沖液懸浮。 3. 500 g 離心細胞5 min，棄上請。貼壁生長細胞先用胰酶消化。4. 細胞用1~10 ml 冰冷的PBS重懸，500 g 離心5 min，棄上清，重復1次。5. 用1體積 的消化緩沖液重懸細胞。 6. 將樣品在蓋緊的管中于50℃搖蕩下溫育12~18 h。 7. 用等體積的酚/氯仿/異戊酵抽提樣品，1 700 g 離心10 min。8. 如果樣品溶解得不好， 再加1體積不含蛋白酹K的消化緩沖液，并重復離心。......閱讀全文
DNA甲基化作為重要表觀遺傳機制調控基因的表達，從而影響一系列的生物學過程，如細胞命運決定、發育和組織、器官的穩態維持。醫學上，DNA甲基化失調與人類疾病密切相關，如腫瘤。DNA甲基化以多種修飾方式[5-methylcytosine (5mC), N6-methyladenine (6mA) 和
這一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法（Blin and Stanfford 1976)。 當需要大量哺乳動物 DNA，如用于 Somhern 雜交或者用噬菌體 λ 載體構建基因組文庫時，應選用這一方法。從 5X107 培養的非整倍體細胞 ( 如 HeLa 細
實驗方法原理 這一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法（Blin and Stanfford 1976)。 當需要大量哺乳動物 DNA，如用于 Somhern 雜交或者用噬菌體 λ 載體構建基因組文庫時，應選用這一方法。從 5X107 培養的非整倍體細胞 ( 如
一、 概述： 生物芯片這一名詞最早是在80年代初提出的，主要指分子電子器件。美國海軍實驗室研究員Carter 等試圖把有機功能分子或生物活性分子進行組裝，想構建微功能單元，實現信息的獲取、貯存、處理和傳輸等功能。用以研制仿生信息處理系統和生物
實驗概要 生物芯片這一名詞最早是在80年代初提出的，主要指分子電子器件。美國海軍實驗室研究員Carter 等試圖把有機功能分子或生物活性分子進行組裝，想構建微功能單元，實現信息的獲取、貯存、處理和傳輸等功能。用以研制仿生信
實驗方法原理 這一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法（Blin and Stanfford 1976)。 當需要大量哺乳動物 DNA，如用于 Somhe
雖然這些最初的納米孔實驗并沒有獲得預期結果，但它們至少顯示出納米孔在單分子技術方面的應用優勢，例如高度的敏感性，同時也帶動了納米孔核酸分析技術的研究熱潮，并在理論及實驗方面取得了一些成果。自從發現在電場力作用下，長達1000個堿基的單鏈DNA分子也能通過納米孔之后，人們就更加堅信， 廉價的納米孔
進化遺傳學具有兩個并列的研究方向：系統發育的重建和種群分析。自1962年， Zuckerkandl和Pauling提出蛋白質序列和基因序列的比較可以象分子種一樣用于標志 現存物種分化的時間以來，各種生化方法被用于系統發育的研究。在最初二十年內， 同功酶的電泳分析、免疫學比較和蛋白質序列分析被廣泛地應
轉錄后基因沉默，也稱為RNA干擾，是指雙鏈RNA分子阻斷或者降低同源基因的表達的現象。這種現象可能是作為一種抑制病毒感染和轉座子跳躍的細胞防御機制(Ketting et. al., 1999; Tabara et. al., 1999; Jensenet. al., 1999; Ratc
DNA甲基化修飾是表觀遺傳研究的熱點之一，我們通常認為DNA甲基化就是胞嘧啶甲基化（5-methylcytosine, 5mC），卻不知道隨著測序技術的快速發展，科研者們已經在真核生物中（果蠅 、真菌、萊茵衣藻、秀麗隱桿線蟲等）發現了一種新的DNA甲基化修飾—DNA-6mA甲基化，且DNA-6m
1.PCR反應的最適條件4．1 TaqDNA聚合酶在早期進行的PCR反應中，使用的是大腸桿菌DNA聚合酶1的大片段，，即Klenow片段。也曾有人用噬菌體T4 DNA聚合酶。這兩種酶的共同弱點是對熱不穩定性，DNA合成反應只能在370C進行。PCR時每一循環的解鏈溫度都在90C以上進行，故在每兩個循
根據本方案制備的哺乳動物 DNA 約 20~50 kb，適于作 PCR 反應的模板。DNA 產量在 0.5 到 3.0 μg/mg 組織之間變化，或者是 5~15 μg/300μl 全血。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理根據本方案制備的哺乳動物 DNA 約 20~50 k
實驗方法原理 根據本方案制備的哺乳動物 DNA 約 20~50 kb，適于作 PCR 反應的模板。DNA 產量在 0.5 到 3.0 μg/mg 組織之間變化，或者是 5~15 μg/300μl 全血。實驗材料 無 DNase 的 RNase蛋白酶 K哺乳動物組織或全血試劑、試劑盒 細胞裂解緩沖液乙
7位專家預測了2019年將推動他們各自所在的領域向前發展的技術進展，包括高分辨率成像和從頭構建基因組大小的DNA分子等。對生命科學技術來說，2019年看起來非常令人期待。 1.Sarah Teichmann：擴展單細胞生物學 Sarah Teichmann是英國韋爾科姆基金會桑格研究所細胞遺
7位專家預測了2019年將推動他們各自所在的領域向前發展的技術進展，包括高分辨率成像和從頭構建基因組大小的DNA分子等。對生命科學技術來說，2019年看起來非常令人期待。 1.Sarah Teichmann：擴展單細胞生物學 Sarah Teichmann是英國韋爾科姆基金會桑格研究所細胞遺
實驗方法原理 根據本方案制備的哺乳動物 DNA 約 20~50 kb，適于作 PCR 反應的模板。DNA 產量在 0.5 到 3.0 μg/mg 組織之間變化，或者是 5~15 μg
（1）CaCl2處理以后的轉化: 當細菌處于0℃、二價陽離子（如Ca2+、Mg2+等）低滲溶液中時，細菌細胞膨脹成球形，處于感受態；此時轉化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羥基-鈣磷酸復合物粘附于細胞表面，重組DNA在42℃短時間熱沖擊后吸附在細胞表面，在豐富培養基中生長數小時后，球狀細胞恢復原
DNA甲基化修飾是表觀遺傳研究的熱點之一，我們通常認為DNA甲基化就是胞嘧啶甲基化（5-methylcytosine, 5mC），卻不知道隨著測序技術的快速發展，科研者們已經在真核生物中（果蠅 、真菌、萊茵衣藻、秀麗隱桿線蟲等）發現了一種新的DNA甲基化修飾—DNA-6mA甲基化，且DNA-
時間總是過得很快，2016年馬上就要過去了，迎接我們的將是嶄新的2017年，2016年，我國有很多優秀科研機構的科學家們都做出了意義重大、影響深遠的研究成果，發表在國際頂級期刊上。本文中小編盤點了2016年我國科學家發表的一些重磅級研究，以饕讀者。 --結構生物學 -- 1.清華大學 施一
(二輪通知 2017年7月10~19日，北京） 中國醫學科學院基礎醫學研究所∕北京協和醫學院基礎學院在醫學領域具有國內一流的影響力和知名度，以尖端的醫學研究及出色的理論和實驗教學成為著名的醫學科學研究與教育基地。為了培養生物醫學領域創新人才，現推出一年一度的，以尖端儀器和實戰訓練為特色的“大型儀器
4 建立病原作基因的表達模型 由于病原體的基因組規模相對較小，可用包含其全部基因的DNA 芯片鑒定那些對人產生毒害作用的基因。異煙肼（isoniazid，INH）是治療肺結核的常用藥物，其治療結核病的機制是它阻斷了分枝茵酸的生物合成途徑。Wilson等根據已測序的肺結核桿菌基因組序列，用PCR
DNA甲基化在哺乳動物基因表達中扮演了重要角色。盡管通過線粒體遺傳且隨時間穩定，但是細胞分化、疾病或環境影響都會改變DNA甲基化的模式。近年來，科學家們開發出多種新方法，試圖在基因組范圍定位DNA甲基化。 盡管從理論上來說，全基因組亞硫酸氫鹽測序能讓研究人員全面觀察甲基化組，但它還是面臨技
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒（堿裂解法） 實驗材料
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒（堿裂解法） 實驗材料
染色質（Chromatin）最早是1879年Flemming提出的用以描述核中染色后強烈著色的物質。現在認為染色質是細胞間期細胞核內能被堿性染料染色的物質。染色質的基本化學成分為脫氧核糖核酸核蛋白，它是由DNA、組蛋白、非組蛋白和少量RNA組成的復合物。染色質是真核生物基因組DNA存在的主要形式。因
鈷/氧化鈷雜化二維超薄結構電催化還原CO2為液體燃料01 1、研制出將二氧化碳高效清潔轉化為液體燃料的新型鈷基電催化劑 將二氧化碳在常溫常壓下電還原為碳氫燃料，是一種潛在的替代化石原料的清潔能源策略，并有助于降低二氧化碳排放對氣候造成的不利影響。實現二氧化碳電催化還原的關鍵瓶頸問題是將二氧化
2月20日，科學技術部基礎研究司與高技術研究發展中心聯合召開“2016年度中國科學十大進展解讀會”，發布了2016年度中國科學十大進展。中國科學院相關單位獨立或合作取得的7項重大科學成果入選，包括：研制出將二氧化碳高效清潔轉化為液體燃料的新型鈷基電催化劑；開創煤制烯烴新捷徑；揭示水稻產量性狀雜
實驗方法原理 本方法由 Bowtell 法（1987) 改進而成，可同時從許多不同細胞或者組織樣品中制備 DNA。本方案中的主要步驟包括將 DNA 沉淀在細胞裂解液和乙醇的交界面上，接著將沉淀的 DNA 纏繞到一個 Shepherd 氏鉤上。纏在鉤上的 DNA 從乙醇溶液中轉出溶于所選擇
七、桿狀病毒表達載體的新一代昆蟲細胞宿主最早的鱗翅類昆蟲細胞的遺傳轉化技術出現在1990年（Jarvisetal.，1990)。那時，研發該技術的初衷在于構建一個穩定轉化的昆蟲細胞系，它旨在能夠持續生產目標重組蛋白而無需使用桿狀病毒進行感染。然而, 構建這個生產用細胞系所用的載體及方法也為構建具有新
實驗常見問題解答匯集(一) BSP甲基化擴增得到的PCR產物可否直接測序，為什么需要構建TA克隆后測序？ 由于基因組DNA的每個CG位點甲基化程度各不相同，未發生甲基化的C會被重亞硫酸鹽修飾成為U，而C若發生甲基化則不變，這樣如果進行PCR產物測序就有可能在原有的C位點得到雙峰圖，