λ噬菌體臂與外源基因組DNA片段的連接實驗
實驗方法原理 當 λ 噬菌體臂與外源基因組 DNA 片段相連時，必須考慮到兩個參數：噬菌體臂與潛在插入片段的摩爾比，以及在反應混合物中各類 DNA 的濃度。實驗材料 噬菌體 T4 DNA 連接酶基因組 DNAλ 噬菌體包裝混合物λ 噬菌體臂 DNA試劑、試劑盒 ATPSM 和 SM+ 明膠儀器、耗材 瓊脂糖凝膠LB 或 NZCYM 瓊脂平板水浴實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液ATP ( 10 mmol/L)SM 和 SM+ 明膠2. 酶和緩沖液噬菌體 T4 DNA 連接酶3. 凝膠瓊脂糖凝膠（0.7%）, 用 0.5X TBE, 含 0.5 μg/ml 溴化乙錠4. 核酸和寡核苷酸適當大小的基因組 DNA，用于載體克隆5. 培養基LB 或 NZCYM 瓊脂平板LB 或 NZCYM 頂層瓊脂糖6. 專用設備預置于 47℃ 的加熱儀或水浴（用于頂層瓊脂糖)預置于 16℃ 的水浴7. 載體和菌株λ 噬菌體包裝混合物λ 噬菌體臂 D......閱讀全文
λ噬菌體的局限性λ噬菌體
實驗方法原理 本實驗以含原λ噬菌體和缺陷噬菌體λdg的雙重溶原菌gal+作為供體,經紫外線誘導后,獲取能轉導半乳糖發酵基因的高頻轉導噬菌體裂解液,然后讓這些轉導噬菌體將gal+基因轉移到受體菌gal-中去。實驗材料 供體菌 : Escherichia coli K12 F2 gal + (帶有原噬菌
Lambda噬菌體
·?????????Lambda DNA Preparation?(Stanford DNA Sequence & Technology Center)Detailed protocol for lambda DNA preparation with recipes·?????????Isolati
通過噬菌體ELISA鑒定得到的噬菌體克隆
經過3～4輪的篩選后，應該能夠富集到能與受體特異性結合的噬菌體群體。通常而言，在后幾輪的篩選中，每次獲得的噬菌體總量都會增加，但是單就這個現象并不一定能說明已經篩選到了受體特異性結合的肽段。能與靶分子非特異性結合或者能與篩選基質的噬菌體克隆也會造成這一現象。噬菌體ELISA可以說是最靈敏的鑒定所獲取
烈性噬菌體（virulent phage）和溫和噬菌體（temperate phage）
噬菌體(bacteriaphage or phage)是病毒的一類，結構很簡單，基本上由一個蛋白質外殼包裹著一些核酸組成的。噬菌體的多樣性來自于組成其外殼的蛋白質的種類，以及其染色體的類型和結構的不同。（一）烈性噬菌體（ virulent phage）遺傳學上應用最廣泛的烈性噬菌體是大腸桿菌（ E.
λ噬菌體DNA提取
???λ噬菌體是最早使用的克隆載體，λ噬菌體的基因組是一長度約為50kb的雙鏈DNA分子，它在宿主細胞有兩種生活途徑，其一是裂解生長，環狀DNA分子在細胞內多次復制，合成大量噬菌體基因產物，裝配成噬菌體顆粒，裂解宿主菌再進行下一次感染；其二是溶源性生長，即感染細胞內λ噬菌體DNA整合到宿主菌染色體D
噬菌體的介紹
噬菌體(bacteriophage, phage)是感染細菌、真菌、藻類 、放線菌或螺旋體等微生物的病毒的總稱，因部分能引起宿主菌的裂解，故稱為噬菌體。本世紀初在葡萄球菌和志賀菌中首先發現。作為病毒的一種，噬菌體具有病毒的一些特性：個體微小；不具有完整細胞結構；只含有單一核酸。可視為一種“捕食”
噬菌體的概述
噬菌體(bacteriophage, phage)是感染細菌、真菌、藻類 、放線菌或螺旋體等微生物的病毒的總稱，因部分能引起宿主菌的裂解，故稱為噬菌體。本世紀初在葡萄球菌和志賀菌中首先發現。作為病毒的一種，噬菌體具有病毒的一些特性：個體微小；不具有完整細胞結構；只含有單一核酸。可視為一種“捕食”
噬菌體抗體ELISA
實驗概要噬菌體ELISA是一種快速而便捷的方法，尤其是因為pⅧ有多拷貝會導致信號的擴增。主要試劑1. 2％MPBS2. PBS/Tween3. 辣根過氧化物酶(HRP)標記的小鼠抗噬菌體單克隆抗體(mAb)(Amer Sham BiOSCiences)4. 3，3’，5，5’-四甲基聯苯胺(TMB)
噬菌體抗體ELISA
噬菌體抗體ELISA 噬菌體ELISA快速而便捷，尤其是因為pⅧ有多拷貝會導致信號的擴增。不過，后續的抗體檢測總是要以其可溶性形式進行。 [器材和試劑] ● 96孔ELISA板，例如Nunc maxisorb442404(可自VWR購得) ● 2％M ● /Tw
噬菌體的特點
噬菌體（phage）是侵襲細菌的病毒，也是賦予宿主菌生物學性狀的遺傳物質。噬菌體必須在活菌內寄生，有嚴格的宿主特異性，其取決于噬菌體吸附器官和受體菌表面受體的分子結構和互補性。噬菌體是病毒中最為普遍和分布最廣的群體。通常在一些充滿細菌群落的地方，如：泥土、動物的腸道里，都可以找到噬菌體。噬菌體(ba