Southernblot實驗
實驗方法原理 互補的核苷酸序列通過Walson-Crick堿基配對形成穩定的雜合雙鏈分子DNA分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的，可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。雜交的雙方是所使用探針和要檢測的核酸。該檢測對象可以是克隆化的基因組DNA，也可以是細胞總DNA 或總RNA。根據使用的方法被檢測的核酸可以是提純的，也可以在細胞內雜交, 即細胞原位雜交。分子雜交是通過各種方法將核酸分子固定在固相支持物上，然后用放射性或非放射性標記的探針與被固定的模板雜交，經顯影或現色后檢測出目的DNA 或RNA 分子所處的位置。實驗材料 基因組DNAPCR產物試劑、試劑盒 EcoR l 反應bufferTBEDNA landing buffer變性液SSC轉移液Washing bufferdetection buffermaleic acid buffer儀器、耗材 ep......閱讀全文
實驗室實驗器材使用實驗
1、了解化學試劑的等級和保管原則2、掌握玻璃器械的規范使用3、明確各玻璃器械的功用試劑、試劑盒純水儀器、耗材量筒容量瓶吸管移液管吸球天平溫度什移液瓶實驗步驟一、實驗材料：不同等級的化學試劑 量材 量筒 容量瓶 吸管（移液管 無分度兩標線管 有分度吸管 微量吸管）吸球二、實驗步驟：1. 根據試劑瓶上的
實驗動物實驗標本的采集實驗
(1) 大鼠、小鼠的采血方法：①剪尾采血：適用于少量采血，如制作血涂片、白細胞計數等。動物麻醉后，將尾尖剪去約 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾動脈或尾靜脈，讓血液自行流出。小鼠可每次采血約 0. 1 ml, 大鼠約 0.4 ml。②眼眶后靜脈叢采血：一手拇指及食指抓住鼠兩耳之
實驗室實驗器材使用實驗
試劑、試劑盒 純水儀器、耗材 量筒 容量瓶 吸管移液管 吸球天平溫度什 移液瓶實驗步驟 一、實驗材料：不同等級的化學試劑 量材 量筒 容量瓶 吸管（移液管 無分度兩標線管 有分度吸管 微量吸管）吸球二、實驗步驟：1. 根據試劑瓶上的標志說明該試劑的等級及保管方法2，玻璃量器的使用：按照玻璃量器上的標
實驗動物實驗標本的采集實驗——實驗動物腦脊液采集
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒消毒液儀器、耗材注射器實驗步驟(1) 狗、兔腦脊液的采集：通常采取脊髓穿刺法，穿刺部位在兩髂連線中點稍下方第七腰椎間隙。動物麻醉后側臥位固定，頭尾部盡量彎向腰部，去被毛。消毒后一手固定穿刺部位的皮膚，腰穿針垂直刺入，當有落空感及動物的后肢跳動時，針已達椎管內，抽去針芯，即
實驗動物實驗標本的采集實驗——實驗動物尿液采集
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒水儀器、耗材收集器實驗步驟尿液的采集 常用的采集方法較多，一般在實驗前需給動物灌服一定量的水。(1) 代謝籠法：此法較常用，適用于大、小鼠。將動物放在特制的籠內。一般需收集 5 小時以上的尿液，最后取平均值。(2) 導尿法：常用于雄性兔、狗。動物輕度麻醉后，固定于手術臺上
實驗動物實驗標本的采集實驗——實驗動物腹水的采集
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒消毒液儀器、耗材注射器實驗步驟抽取大鼠、小鼠的腹水時，抓取固定動物，使動物腹部朝上，消毒皮膚，針頭在腹股溝和腹中線之間刺人腹腔，腹壓高時腹水自然流出，腹水少時可用注射器抽取。
雜交實驗的實驗目的
了解用聚乙二醇PEG方法誘異同種植物原生質體融合的技術，并能根據新本原生質體的形態樗來鑒別雜種細胞。
雜交實驗的實驗原理
不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合，所產生的雜種細胞，即異核體經過培養可再生新壁，分裂形成愈傷組織，進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞，故該項技術也叫體細胞雜交。原生質體融合能使有性雜交不親合的植物種間進行廣泛的遺傳重組，因而在農業育種上具有巨大的潛力。在植物遺傳操作研究
細胞劃痕實驗實驗步驟
一.準備：所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺內）二.流程：1.先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻得劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。2.在空中加入約5X105個細胞，具體數量因細胞不同而不同，掌握為過一夜能鋪
實驗動物標記實驗
實驗材料 兔子 小鼠試劑、試劑盒 3%～5%苦味酸 0.5%中性品紅 2%硝酸銀實驗步驟 1. 染色法 適用于小動物，如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是將化學藥品涂在動物的被毛上，以不同顏色來區分動物。常用的化學藥品有：3%～5%苦味酸溶液（黃色）、0.5%中性品紅（紅色）、2%硝酸銀（咖啡色）
實驗動物標記實驗
實驗材料兔子 小鼠試劑、試劑盒3%～5%苦味酸 0.5%中性品紅 2%硝酸銀實驗步驟1.?染色法 適用于小動物，如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是將化學藥品涂在動物的被毛上，以不同顏色來區分動物。常用的化學藥品有：3%～5%苦味酸溶液（黃色）、0.5%中性品紅（紅色）、2%硝酸銀（咖啡色）。標記的原則是
實驗動物實驗標本的采集實驗——動物采血方法
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒消毒液儀器、耗材注射器實驗步驟(1) 大鼠、小鼠的采血方法：①剪尾采血：適用于少量采血，如制作血涂片、白細胞計數等。動物麻醉后，將尾尖剪去約 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾動脈或尾靜脈，讓血液自行流出。小鼠可每次采血約 0. 1 ml, 大鼠約 0.4 ml。
雜交實驗的實驗材料儀器
1．實驗材料：煙草或其它植物無菌苗的葉片。胡蘿卜肉質根誘導的松軟愈傷組織或懸浮培養細胞。2．試劑2.1酶液及洗滌液，同植物原生質體的分離和培養實驗。2.2PEG溶液2.3高pH高鈣稀釋液2.4DPD培養基同植物原生質體的分離和培養實驗。
細胞轉染實驗的實驗原理
外源基因進入細胞主要有四種方法：電擊法、磷酸鈣法、脂質體介導法和病毒介導法。電擊法是在細胞上短時間暫時性的穿孔讓外源質粒進入；磷酸鈣法和脂質體法是利用不同的載體物質攜帶質粒通過直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因進入細胞；病毒法是利用包裝了外源基因的病毒感染細胞的方法使得其進入細胞。但是由于電擊法和
克爾效應實驗的實驗原理
各向同性的介質如玻璃，石蠟，水，硝基苯等，在強電場作用下會表現出各向異性的光學性質，表現出雙折射現象。折射率差與電場強度的平方成正比，稱為克爾效應。在兩平行平板之間加上高電壓，在電場作用下，由于分子的規律排列，這些介質就表現出象單軸晶體那樣的光學性質，光軸的方向就與電場的方向對應。當線偏振光沿著與電
克爾效應實驗的實驗原理
各向同性的介質如玻璃，石蠟，水，硝基苯等，在強電場作用下會表現出各向異性的光學性質，表現出雙折射現象。折射率差與電場強度的平方成正比，稱為克爾效應。在兩平行平板之間加上高電壓，在電場作用下，由于分子的規律排列，這些介質就表現出象單軸晶體那樣的光學性質，光軸的方向就與電場的方向對應。當線偏振光沿著與電
PCR實驗如實預防實驗污染
進行PCR操作時，操作人員應該嚴格遵守一些操作規程，zui大程度地降低可能出現的PCR污染或杜絕污染的出現。1.劃分操作區：目前，普通PCR尚不能做到單人單管，實現完全閉管操作，但無論是否能夠達到單人單管，均要求實驗操作在三個不同的區域內進行，PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區內進行：(1)標本
PCR實驗如實預防實驗污染
進行PCR操作時，操作人員應該嚴格遵守一些操作規程，最大程度地降低可能出現的PCR污染或杜絕污染的出現。劃分操作區：目前，普通PCR尚不能做到單人單管，實現完全閉管操作，但無論是否能夠達到單人單管，均要求實驗操作在三個不同的區域內進行，PCR的前處理和后處理要在不同的隔離區內進行：(1)標本處理區，
細菌細胞的制備實驗實驗
細胞抽提物的制備 核糖體及多核糖體的分離 70S核糖體的純化 多核糖體的純化 將核糖體解離為大亞基和小亞基 ? ? ? ? ? ? 實驗材料
細胞轉染實驗的實驗目的
學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法—脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法，觀測外源蛋白的表達（綠色熒光蛋白），為染色準備實驗材料。
雜交實驗的實驗結果分析
1．在倒置顯微鏡下觀察異源融合。在培養3天以內，可根據雙新原生質體的形態特征來鑒別異核體。因為來自葉肉組織的原生質體具有明顯綠色葉綠粒，而來自培養細胞的原生質體無色，但具濃密原生質絲，并可看到顯示的核區。2．統計異源融合的頻率
細菌細胞的制備實驗實驗
細胞抽提物的制備核糖體及多核糖體的分離70S核糖體的純化多核糖體的純化將核糖體解離為大亞基和小亞基實驗材料細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒弗氏破碎緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
細胞計數實驗——細胞計數實驗
實驗方法原理平板菌落計數法是將待測樣品經適當稀釋之后，其中的微生物充分分散成單個細胞，取一定量的稀釋樣液接種到平板上，經過培養，由每個單細胞牛長繁殖而形成肉眼可見的菌落，即一個單菌落應代表原樣品中的一個單細胞。統計菌落數，根據其稀釋倍數和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數。但是，由于待測樣品往往不易
克爾效應實驗的實驗原理
各向同性的介質如玻璃，石蠟，水，硝基苯等，在強電場作用下會表現出各向異性的光學性質，表現出雙折射現象。折射率差與電場強度的平方成正比，稱為克爾效應。在兩平行平板之間加上高電壓，在電場作用下，由于分子的規律排列，這些介質就表現出象單軸晶體那樣的光學性質，光軸的方向就與電場的方向對應。當線偏振光沿著與電
細胞轉染實驗的實驗步驟
細胞傳代(1)試驗準備：200ul/1mlTip頭各一盒（以上物品均需高壓滅菌），酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養皿，離心管。(2)棄掉培養皿中的培養基，用1ml的PBS溶液洗滌兩次。(3)用Tip頭加入1mlTrypsin液，消化1分鐘（37。C，5%CO2)。用手輕拍培養瓶壁，
細菌細胞的制備實驗實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 弗氏破碎緩沖液勻漿緩沖液儀器、耗材 弗氏破碎器實驗步驟 1. 將 5~10 g 新鮮或凍存的細胞沉淀物垂懸于弗氏破碎緩沖液中或者適當的勻漿緩沖液中。通常 4L 的大腸桿菌培養物可以獲得大約 7.5 g 的細胞沉淀。2. 懸液中加入無 RNase 的 DNase 至終濃度為
雜交實驗的實驗方法
所有操作均在超凈工作臺上進行。1．原生質體的分離和收集。2．將收集的兩種不同材料的原生質體分別懸浮在0.16mol/L的CaCl2·2H2O（pH5.8~6.2）原生質體密度調整為2×105/ml左右（用血細胞計數板統計原生質體密度）。3．將兩種原生質體懸液等量混合。4．用刻度吸管將混合的原生質體懸
MTT實驗原理和實驗步驟
MTT原理：MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，是一種黃顏色的染料。活細胞線粒體中琥珀酸脫氫酶能夠代謝還原MTT，同時在細胞色素C的作用下，生成藍色（或藍紫色）不溶于水的甲臜（Formaza
ELISA實驗原理及實驗過程
實驗原理ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。在實際應用中，通
核酶實驗——錘頭型核酶實驗
核酶（ribozyme ) 是一類具有酶特性的 RNA 分子，通過催化靶位點 RNA 鏈中磷酸二酯鍵的斷裂，特異性地剪切底物 RNA 分子，從而阻斷基因的表達。核酶廣泛存在于從低等到高等的多種生物中，參細胞內 RNA 及其前體的加工和成熟過程。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗方法