從實體組織中制備粗微體實驗
實驗材料 雄大鼠試劑、試劑盒 蔗糖蔗糖HM儀器、耗材 玻璃板實驗步驟 1. 用斷頸法殺死約 150 g 重的雄大鼠，大鼠的數量取決于要制備的粗微體的數量。由于一個 150 g 重的大鼠肝（6 g）大約每克肝蛋白含有 10 mg 粗微體，所以大鼠的數量可以以回收率為 50% 來進行估計。2. 流干血液后，打開腹部和胸腔，切取肝，將它們放在盛有冰冷勻漿介質的燒杯中：勻漿介質（HM）：0.5 mol/L 蔗糖1 mmol/L DTT3. 用冰冷 HM 沖洗大鼠肝，將它們放在紙巾上，如果有結締組織去掉之，迅速稱重。4. 將肝放在干凈的玻璃板上，用剃須刀片將其切成盡可能小的碎片，直到形成漿糊樣稠狀物。當肝在小燒杯里用剪刀剪碎時，不加HM 要容易些，因為 HM 妨礙剪切。5. 將切碎的肝放入盛有 4~5 倍體積冰冷 HM 的燒杯中，輕輕混旋，等碎片沉到底部后去掉液體以去除血液。6. 4 倍體積的 HM 在配套寬松的 Dounce 勻漿器......閱讀全文
從實體組織中制備粗微體實驗_從狗的胰臟中制備粗微體
實驗材料胰臟試劑、試劑盒HM 緩沖液蔗糖-緩沖液三乙基氨基乙酸緩沖液實驗步驟1. 從動物身體切下胰臟，立即用大約 50 ml 冷 HM 緩沖液沖洗，放置于干凈的紙巾上，去除結締組織：勻漿介質（HM）0.25 mol/L 蔗糖-緩沖液A緩沖液A：50 mmol/L 三乙基氨基乙酸緩沖液（TEA），pH
從實體組織中制備粗微體實驗_從大鼠肝臟制備微體
實驗材料雄大鼠試劑、試劑盒蔗糖蔗糖HM儀器、耗材玻璃板實驗步驟1. 用斷頸法殺死約 150 g 重的雄大鼠，大鼠的數量取決于要制備的粗微體的數量。由于一個 150 g 重的大鼠肝（6 g）大約每克肝蛋白含有 10 mg 粗微體，所以大鼠的數量可以以回收率為 50% 來進行估計。2. 流干血液后，打開
從實體組織中制備粗微體實驗
從大鼠肝臟制備微體從狗的胰臟中制備粗微體實驗材料雄大鼠 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒蔗糖 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
從實體組織中制備粗微體實驗
實驗材料 雄大鼠試劑、試劑盒 蔗糖蔗糖HM儀器、耗材 玻璃板實驗步驟 1. 用斷頸法殺死約 150 g 重的雄大鼠，大鼠的數量取決于要制備的粗微體的數量。由于一個 150 g 重的大鼠肝（6 g）大約每克肝蛋白含有 10 mg 粗微體，所以大鼠的數量可以以回收率為 50% 來進行估計。2. 流干血液
從實體組織中制備粗微體實驗
從大鼠肝臟制備微體 從狗的胰臟中制備粗微體 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 雄大鼠 試
從組織培養細胞中制備粗微體實驗
實驗材料細胞試劑、試劑盒環己酰亞胺勻漿緩沖液儀器、耗材培養皿實驗步驟1. 培養基中加入環己酰亞胺（溶于蒸餾水，貯存液濃度 0.1 mol/L，-20℃ 保存。如果不溶，試著加熱到 40℃ 以幫助溶解）（終濃度 10 μmol/L)，37℃ 保溫 5~10 分鐘。2. 培養皿從 37℃ 轉移到冷室，立
從組織培養細胞中制備粗微體實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑、試劑盒 環己酰亞胺 勻漿緩沖液
從組織培養細胞中制備粗微體實驗
實驗材料細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒環己酰亞胺 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?勻漿緩沖液 ? ?
利用－Trizol－從植物組織中制備－RNA－實驗
下述方案是經修改過的 Trizol 方案，用于從植物組織中分離 RNA，其中增加了一個高鹽異丙酵沉淀步驟，以選擇性地沉淀 RNA，而將多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗材料植物組織試劑、試劑盒Trizol氯仿異丙醇乙醇DEPC處理過的水液態
利用－Trizol－從植物組織中制備－RNA－實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 植物組織 試劑、試劑盒 Trizol 氯仿 異丙醇 乙醇
利用－Trizol－從植物組織中制備－RNA－實驗
實驗材料 植物組織試劑、試劑盒 Trizol氯仿異丙醇乙醇DEPC處理過的水液態N2NaCl檸檬酸鈉儀器、耗材 轉子-定子均化器研缽和杵圓錐形管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑Trizol(Invitrogen)氯仿異丙醇乙醇，70%，用焦碳酸二乙酯（DEPC) 處理過的水配制DEPC 處
從石蠟包埋固定的組織中制備－RNA－實驗
實驗材料 石蠟包埋的組織樣品試劑、試劑盒 甲酰胺消化緩沖液乙醇肝糖異丙醇苯酚 氯仿蛋白酶 KTrizol二甲苯儀器、耗材 微量離心管恒溫箱實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑去離子化的甲酰胺焦碳酸二乙酯（DEPC) 處理過的水消化緩沖液（lmol/L 異硫氰酸胍,25 mmol/Lβ-巰基乙醇
從肝臟組織中制備細胞核實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 大鼠 試劑、試劑盒 裂解緩沖液 濃蔗糖溶液
從石蠟包埋固定的組織中制備－RNA－實驗
該方案是由 Godfrey 等改進 Fisher 的方案發表的。此前已有從固定組織中純化 RNA 的方案發表。Ambion 和 Roche 發明了從石蠟包埋的組織中純化 RNA 的商品化試劑盒。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗材料石蠟包埋的組織樣品試劑、試劑盒甲酰胺
從肝臟組織中制備細胞核實驗
實驗材料大鼠試劑、試劑盒裂解緩沖液濃蔗糖溶液儀器、耗材超速離心機組織研磨器實驗步驟1. 配制裂解緩沖液和濃蔗糖溶液（PMSF 在使用前添加），冰上放置。裂解緩沖液：0.25 mol/L 蔗糖網織紅細胞標準緩沖液（RSB）0.25 mol/L 蔗糖（超級純）10 mmol/ Tris-HCl (pH7
從石蠟包埋固定的組織中制備－RNA－實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 石蠟包埋的組織樣品 試劑、試劑盒 甲酰胺 消化緩沖液 乙醇 肝糖
細胞核連綴分析實驗_從組織中制備細胞核
實驗材料動物組織試劑、試劑盒PBS蔗糖儀器、耗材電動勻漿器特氟隆研杵實驗步驟一、用超速離心法從組織中分離細胞核1. 切下動物組織，放入置于冰上的平皿中，用冰冷的 PBS 沖洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液，用剪刀或剃須刀片將組織切碎，轉入一個干凈試管中，加蔗糖Ⅰ溶液至終體積為每克組織 10 ml。3. 用
從組織和培養細胞中制備輕線粒體組分
試劑和器材：?1.?勻漿介質：0.25mol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4；2.?按要求向溶液加入蛋白酶抑制劑；3.?磷酸鹽緩沖液；4.?低速冷凍離心機，配有30—40ml離心管的吊桶式離心轉子；5.?高速離心機，配有30—40ml離心管
新鮮實體組織樣本的制備（機械法）
剪碎法網搓法研磨法實驗方法原理機械法分散實體組織。用手術剪刀剪碎組織、用鋒利的解剖刀剁碎組織或用勻漿器制成組織勻漿，再用細注射針頭抽吸細胞或用 300 日尼龍網濾出單細胞懸液；采用網搓法也能獲得大量細胞。機械法易造成細胞碎片和細胞團塊，所以常與其他方法配合使用。實驗材料組織 ? ? ? ? ?
新鮮實體組織樣本的制備（酶消化法）
實驗方法原理對實體組織分散的作用原理主要有3個方面：① 可以破壞組織間的膠原纖維、彈性纖維等；② 可以水解組織間的黏多糖等物質；③ 可以水解組織細胞間的緊密聯結裝置的蛋白質物質。實驗材料組織酶儀器、耗材試管離心管尼龍網實驗步驟1. 將適合于酶消化的組織置于離心管中。2. 將選好的酶溶掖 1~2 ml
新鮮實體組織樣本的制備（酶消化法）
實驗方法原理對實體組織分散的作用原理主要有3個方面：① 可以破壞組織間的膠原纖維、彈性纖維等；② 可以水解組織間的黏多糖等物質；③ 可以水解組織細胞間的緊密聯結裝置的蛋白質物質。實驗材料組織 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
如何制備新鮮實體組織單細胞懸液
流式細胞術對細胞的各種參數分析必須基于單細胞的基礎上，根據不同實體組織成分的特點可選擇不同的分散細胞的方 法，以期達到單細胞產量高、細胞損傷小的目的。在實體組織分散為單細胞的過程中，解離的方法有可能瞬間或持久地影響細胞的性質，比如，形態上顯而易見的細 胞膜破損，細胞表面上可出現泡狀特征，還有一些是難
新鮮實體組織樣本的制備（酶消化法）
實驗方法原理 對實體組織分散的作用原理主要有3個方面：① 可以破壞組織間的膠原纖維、彈性纖維等；② 可以水解組織間的黏多糖等物質；③ 可以水解組織細胞間的緊密聯結裝置的蛋白質物質。實驗材料 組織酶儀器、耗材 試管離心管尼龍網實驗步驟 1. 將適合于酶消化的組織置于離心管中。2. 將選好的酶溶掖 1~
純化RNA實驗——從組織中純化總RNA
實驗材料組織試劑、試劑盒RNA 抽提緩沖液氯仿實驗步驟1. 從動物取下組織，直接進行第 2 步或在液氮中快速冷凍新鮮解剖的組織。冷凍后的組織可以貯存在 -70℃。2. 組織（0.05~0.3 g）在 2.0 ml RNA 抽提緩沖液中勻漿。3. 每管加 200 μl 氯仿，混合均勻，冰浴 15 分鐘
桿狀病毒儲液制備實驗——從單層培養中制備
實驗材料單層培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒（野生型的或重組）試劑、試劑盒含10％胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材150 mm 培養瓶27℃ 培養箱倒置顯微鏡帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐500 ml 旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺實驗步驟1
桿狀病毒儲液制備實驗——從懸浮培養中制備
實驗材料懸浮培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒（野生型的或重組）試劑、試劑盒含10％胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材150 mm 培養瓶27℃ 培養箱倒置顯微鏡帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐500 ml 旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺實驗步驟1
新鮮實體組織樣本的制備（機械法）——研磨法
實驗方法原理機械法分散實體組織。用手術剪刀剪碎組織、用鋒利的解剖刀剁碎組織或用勻漿器制成組織勻漿，再用細注射針頭抽吸細胞或用 300 日尼龍網濾出單細胞懸液；采用網搓法也能獲得大量細胞。機械法易造成細胞碎片和細胞團塊，所以常與其他方法配合使用。實驗材料組織試劑、試劑盒生理鹽水儀器、耗材研磨器尼龍網實
新鮮實體組織樣本的制備（化學處理法）
實驗方法原理化學處理法是將組織細胞間起黏著作用的鈣、鎂離子置換出來，從而使細胞分散開來。實驗材料胰酶組織試劑、試劑盒EDTA儀器、耗材尼龍網實驗步驟一、試劑的配制1. 0.2% EDTA 配制：稱 EDTA 0.2 g，加入 Hank 液 100 ml，封裝高壓消毒。置 0~4℃ 保存。2. 胰酶加
新鮮實體組織樣本的制備（化學處理法）
實驗方法原理化學處理法是將組織細胞間起黏著作用的鈣、鎂離子置換出來，從而使細胞分散開來。實驗材料胰酶 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?組織 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
利用－ConcertPlant－試劑從植物組織中純化－RNA－實驗
實驗材料 植物組織試劑、試劑盒 Concert Plant RNA試劑NaCl氯仿異丙醇乙醇DEPC處理過的水實驗步驟 一、材料1.緩沖液、溶液和試劑ConcertPlantRNA試劑(Invitrogen)，4°C預冷NaCl,5mol/L(無RNA酶）氯仿異丙醇乙醇，75%,用DEPC處理過的水