用異硫氰酸胍(guanidiniumisothiocyanate)和有機溶劑提取RNA
收集細胞，離心5000r/min ，5分鐘，棄上清，加入異硫氰酸胍變性液（異硫氰酸胍4mol/L；檸檬酸鈉25mmol/L，Sarkosy10.5%,β-巰基乙醇0.1mol /L）500ml，混勻，振蕩10秒，加2 mol/L醋酸鈉50ml，水飽和酚500m l和氯仿/異戊醇（49：1）100m l顛倒混合數秒鐘，冰浴15分鐘，4℃離心10,000 r/min，15分鐘，吸取上清，加入等體積異丙醇或2倍體積無水乙醇，4℃離心10,000 r/min，10分鐘，棄上清，70%酒精洗滌一次，抽干，加35mlDEPC處理水溶解，取5ml經稀釋后紫外測定RNA提取量，其余30ml分裝，-20℃保存備用。mRNA的分離與rRNA和tRNA不同的是，哺乳動物細胞的絕大部分mRNA在其3’端均有一 poly(A)尾，因此可以用oligo(dT)－纖維素親和層析法從大量的細胞RNA中分離mRNAdmonds等，1971;A......閱讀全文
用異硫氰酸胍(guanidinium－isothiocyanate)和有機溶劑提取RNA
收集細胞，離心5000r/min ，5分鐘，棄上清，加入異硫氰酸胍變性液（異硫氰酸胍4mol/L；檸檬酸鈉25mmol/L，Sarkosy10.5%,β-巰基乙醇0.1mol /L）500ml，混勻，振蕩10秒，加2 mol/L醋酸鈉50ml，水飽和酚500m l和氯仿/異戊醇（49：1）1
用異硫氰酸胍和有機溶劑提取ＲＮＡ
收集細胞，離心5000r/min ，5分鐘，棄上清，加入異硫氰酸胍變性液（異硫氰酸胍4mol/L；檸檬酸鈉25mmol/L，Sarkosy10.5%,β-巰基乙醇0.1mol/L）500ml，混勻，振蕩10秒，加2 mol/L醋酸鈉50ml，水飽和酚500m?l和氯仿/異戊醇（49：1）100m?l
動物組織細胞總RNA的提取（異硫氰酸胍法和TRIzol法）1
一、實驗原理RNA是基因表達的中間產物，存在于細胞質與核中。對RNA進行操作在分子生物學中占有重要地位。獲得高純度和完整的RNA 是很多分子生物學實驗所必需的，如Northern雜交、cDNA合成及體外翻譯等實驗的成敗，在很大程度上取決于RNA的質量。由于細胞內的大部分RNA是以核蛋白復合體的形
動物組織細胞總RNA的提取（異硫氰酸胍法和TRIzol法）2
（二）TRIzol試劑提取RNA1.取新鮮動物組織0.1～0.2g置于組織勻漿器中，加入預冷的Trizol液 1ml 于玻璃勻漿器中，在冰浴中迅速勻漿15～30s，以充分研碎組織。然后將細胞懸浮液吸入另一1.5ml Ep管中，于室溫下靜置5min。2.加入200μl氯仿，劇烈振搖15s混勻后，室溫靜
組織和細胞RNA的制備——（異硫氰酸胍法）
[試劑主要]1．CSB緩沖液：42mM檸檬酸鈉；0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基，N甲基甘氨酸鈉)；0.2 mM β-巰基乙醇。2．變性液：異硫氰酸胍（終濃度 4 M）25g、CSB緩沖液 33ml，混合直至完全溶解，可在65℃助溶。4℃保存備用。3．2 M乙酸鈉：pH 4
RNA提取心得（組織RNA提取和培養細胞的RNA提取）
一.組織RNA提取 1.最好新鮮組織，這樣RNA提取的效果比較好，這是肯定的。 2. 如果不是新鮮的（最好在半年之內，-80℃或者液氮中凍存的）組織，注意不要反復凍融，從冰凍狀態拿到0-4℃，注意不要拿到常溫，待組織解凍后，用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織，稱重后，放到預冷的勻漿器中，然后
關于異硫氰酸胍的提取介紹
異硫氰酸胍法提取制備模板核酸此法主要用于RNA的提取.標本為組織細胞及血清等. 1、異硫氰酸胍消化液 異硫氰酸胍4mol/L 檸檬酸鈉(PH7.0)25mmol/L 十二烷基肌酸鈉0.5% β-巰基乙醇0.1mol/L 2、消化方法：用50～100ul細胞懸液及血清，加等體積的異硫氰
蛋白質提取（水溶液提取法和有機溶劑提取法）
蛋白質的提取工作是將經過處理或破碎的細胞，置于一定的條件和溶液中，讓被提取物充分釋放出來的過程。影響提取的因素主要是被提取物質在提取的溶液中溶解度的大小及由固相擴散到液相的難易程度。某一物質在溶劑中溶解度大小與該物質的分子結構及溶劑理化性質有關，一般遵守“相似相溶”的原則。擴散作用對蛋白質的提取有一
DNA和RNA提取原理
TRIzol試劑有多組分分離作用,與其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚／SDS法、鹽酸胍法、硫氰酸胍法等相比，最大特點是可同時分離一個樣品的RNA\DNA\蛋白質．TRIzol使樣品勻漿化，細胞裂解，溶解細胞內含物，同時因含有RNase抑制劑可保持RNA的完整性。在加入氯仿離心后，溶液分為水相和有機相，R
RNA－和－DNA－提取：洗脫
DNA 提取方案的還剩余IDE步驟步就是從硅膠中釋放純 DNA 或 RNA。對于 DNA 制備,通常使用 pH 值為 8-9 的 10 mM Tris。DNA 在弱堿性 pH 值下更穩定,在緩沖液中溶解得更快。即使對于 DNA 顆粒也是如此。水的 pH 值往往較低,低至 4-5,并且高分子量 DNA
RNA提取
RNA提取（主要內容如下）Tips for Handing RNA?Total RNA IsolationmRNA IsolationrRNA IsolationOthersQ & A posted in the Method Forum??Basic Procedures for Handing
RNA提取和RTPCR
真核生物的基因組是DNA，為什么不直接從DNA?PCR得到我們需要的基因呢？因為真核生物的基因含有大量的非編碼區，稱為內元（intron），真正編碼蛋白的區段是被這些內元隔開的，這些編碼區叫做外元（exon）。真核生物的DNA轉錄成為RNA之后，經過剪切和拼接，去掉這些非編碼區，才形成成熟的mRNA
RNA－的提取和純化實驗
試劑、試劑盒 氯仿焦碳酸二乙酯乙醇異丙醇苯酚-胍鹽單相溶液磷酸鹽緩沖液儀器、耗材 離心機和轉頭移液器離心管錐形管平板勻漿器實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑氯仿焦碳酸二乙酯（DEPC) 處理過的 H20(GenHimterR105)乙醇70% 乙醇洗液（用 DEPC 處理過的 H20 配制）
RNA－的提取和純化實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 氯仿 焦碳酸二乙酯 乙醇 異丙醇 苯酚-胍鹽單相溶液 磷酸鹽緩沖液
RNA提取和RTPCR
在做Northern等雜交實驗、構建cDNA文庫、獲取能夠編碼真核生物蛋白的基因、獲得RNA病毒基因時，會用到RNA提取和RT-PCR技術。真核生物的基因組是DNA，為什么不直接從DNA PCR得到我們需要的基因呢？因為真核生物的基因含有大量的非編碼區，稱為內元（intron），真正編碼蛋白的區段是
RNA－的提取和純化實驗
雖然 FDD 利用了真核 mRNA 的多聚腺苷酸 [poly(A)+] 位點，但并不推薦使用 poly(A)+RNA，因為在反轉錄反應中可能污染寡核苷酸，并因此增加假陽性的概率。所以建議使用總 RNA 做 FDD 分析。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試劑、試劑盒氯仿焦
真菌DNA和RNA提取方法
真菌DNA和RNA提取方法一、真菌DNA的提取(方法一)實驗試劑(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1％SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(p
異硫氰酸胍酚法植物組織總RNA的制備
異硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下：GIT與β－巰基乙醇共同作用抑制RNase的活性；GIT與 十二烷基肌氨酸鈉 （Sarcosyl）作用使蛋白質變性，從而釋放RNA；酸性條件下DNA極少發生解離，同蛋白質一起變性被離心下來，RNA則溶于上清中。該法所提 RNA純度高完整性好較適合純化mR
植物組織總RNA的制備：異硫氰酸胍—酚法
異硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下：GIT與β－巰基乙醇共同作用抑制RNase的活性；GIT與 十二烷基肌氨酸鈉 （Sarcosyl）作用使蛋白質變性，從而釋放RNA；酸性條件下DNA極少發生解離，同蛋白質一起變性被離心下來，RNA則溶于上清中。該法所提RNA純度高完整性好較適合純化mRNA，
RNA－和－DNA－提取的降解問題
降解問題是RNA制備中常常到的問題。因為在 RNA 提取過程中,樣品儲存不當或裂解效率低等情況都會導致降解。對于 DNA 提取,降解不是一個大問題,因為對于 PCR,DNA 可以被剪切并且工作正常,如果不希望有較多剪切的 DNA,可以使用弱裂解的方法。
真菌的DNA和RNA提取方法
一、真菌DNA的提取(方法一)1.實驗試劑(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1％SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(pH8.0):氯仿:異戊
真菌的DNA和RNA提取方法
搞真菌基因功能研究的不可避免的總要涉及到DNA和RNA提取，由于真菌中有較多的多糖成分影響到所提DNA和RNA的質量和后續的分析。因此一個高質量的、實惠的提取方法是我們的優先選擇，在此分享一下我一直在用的提取方法，供大家參考。真菌DNA的提取（方法一）1.取真菌菌絲0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉2
真菌的DNA和RNA提取方法
一、真菌DNA的提取(方法一)1.實驗試劑(1)DNA提取液:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1％SDS(2)3M NaAc(3)TE:10 mmol/L Tris-HCl pH8.0,1 mmol/L EDTA(4)酚(pH8.0):氯仿:異戊
卵和胚胎細胞總RNA提取
試劑、試劑盒 Triton X-100勻漿緩沖液 酚氯仿乙酸鈉 乙醇 氯化鋰實驗步驟 一 材料與設備1)5%TritonX-1002) 勻漿緩沖液：50 mmol/LNaCl,50 mmol/LTris-Cl,(PH7.5),5 mmol/LEDTA(pH8.0),0.5%SDS,200ug/ml
信使RNA的提取、分離和純化
真核細胞的mRNA分子最顯著的結構特征是具有5’端帽子結構（m7G）和3’端的Poly(A)尾巴。絕大多數哺乳類動物細胞mRNA的3’端存在20-30個腺苷酸組成的Poly（A）尾，通常用Poly（A+）表示。這種結構為真核mRNA的提取，提供了極為方便的選擇性標志，寡聚（dT）纖維素或寡聚（U）瓊
卵和胚胎細胞總RNA提取
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 Triton X-100 勻漿緩沖液 酚 氯仿 乙酸鈉 乙醇 氯化鋰
真菌的DNA和RNA提取方法
搞真菌基因功能研究的不可避免的總要涉及到DNA和RNA提取，由于真菌中有較多的多糖成分影響到所提DNA和RNA的質量和后續的分析。因此一個高質量的、實惠的提取方法是我們的優先選擇，在此分享一下我一直在用的提取方法，供大家參考。真菌DNA的提取（方法一）1.取真菌菌絲0.5g, 在液氮中迅速研磨成粉2
總RNA提取（Trizol提取）
在收集到生物材料之后，最好能即刻進行RNA 制備工作。若需暫時儲存，則應以液氮將生物材料急速冷凍后，儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA 時，將儲存于冷凍柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破細胞，不可以先行解凍，以避免RNase 的作用。1. 提取組織RNA 時，每50～100mg 組織用1ml
動植物組織總RNA提取(Trizol法)和mRNA提取
一、材料 水稻葉片或小鼠肝組織。 二、設備 研缽，冷凍臺式高速離心機，低溫冰箱，冷凍真空干燥器，紫外檢測儀，電泳儀，電泳槽。 ? ?三、試劑 1、無RNA酶滅菌水：用將高溫烘烤的玻璃瓶（180℃ 2小時）裝蒸餾水，然后加入0.01%的DEPC（體積/體積），處理過夜后高
動物RNA提取實驗原理
RNA提取技術不僅是分子生物學技術的重要組成部分，也是功能基因組 學科研技術的重要基礎。從RNA水平研究生物體內基因的調控機制，已成為分子生物學研究的一個重要手段。對某一生物或組織進行性狀研究，首先要獲得該性狀基因，從組織細胞中分離完整的RNA對于分子克隆 和基因表達分析等實驗是至關