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    基因組DNA的快速純化

    第 1 天1. 大約 1.5 cm 長的尾部活檢樣品放在一個 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部緩沖液的小離心管中,加 35 μl 10 mg/ml蛋白酶 K,在 55℃ 振搖溫育過夜。尾部緩沖液(配 25 ml)50 mmol/L Tris,pH 8 1.25 ml 1 mol/L Tris,pH 8100 mmol/L EDTA,pH8 &......閱讀全文

    微陣列中期分裂相染色體的比較基因組雜交(CGH) 實驗

    實驗方法原理 實驗材料 高分子質量基因組DNA EcoR I 或 Dpn II試劑、試劑盒 SSCcDNA陣列dNTP 混合液 dCTP 酵母 tRNADNA 聚合酶 I儀器、耗材 Qiaquick PCR 純化試劑盒 BioPrime 標記試劑盒Micrcon 30 濾器雜交爐Maxiprep D

    采用Agilent Femto Pulse系統對不同基因組DNA提取進...(一)

    采用Agilent Femto Pulse系統對不同基因組DNA提取進行質量評估作者Chava Pocernich,Jolita Uthe,Steve Siembieda 安捷倫科技有限公司摘要Agilent Femto Pulse 系統采用革命性設計,是唯一一款能夠自動進行高分子量 (HMW)

    單細胞的可靠全基因組擴增

    目前多種新型分析技術,如新一代測序和芯片,都是為細胞群體而設計的,需要一定的樣本量。對于一些臨床或法醫樣本,如腫瘤細胞或循環胎兒細胞等,它們的細胞數量有限,直接限制了其下游應用。例如,在分析腫瘤細胞中的體細胞DNA突變或單個細菌基因組時,單細胞中的DNA無法滿足測序的mg級樣品量需求。為了從少量樣品

    分子生物學常用實驗技術(八)

    第五章重組質粒的連接、轉化及篩選第一節概述  質粒具有穩定可靠和操作簡便的優點。如果要克隆較小的DNA 片段(<10kb)且結構簡單,質粒要比其它任何載體都要好。在質粒載體上進行克隆,從原理上說是很簡單的,先用限制性內切酶切割質粒DNA 和目的DNA 片段, 然后體外使兩者相連接, 再用所得

    核酸提取產品的市場概況和主要品牌

    市場概況:2019年,全球核酸分離和純化市場規模估計為24億美元,預計在預測期內(2020 - 2027)復合年增長率為7.2%。幾個RNA物種代表了一個廣泛的、未被開發的生物分子類別,在疾病發展過程中發揮著至關重要的作用。這增強了RNA治療的渠道,反過來,又推動了核酸分離和純化方法在藥物開發中的應

    盤點全基因組檢測CRISPR脫靶位點的幾種重要技術

      在2013年,來自麻省總醫院的研究人員發現使用CRISPR-Cas RNA引導性核酸酶的一個重要局限:會在預期靶點以外的位點上生成多余的DNA突變。此后陸續有研究直接說明了CRISPR/Cas9存在嚴重的脫靶性,即該技術可以發生非特異性切割,引起基因組非靶向位點的突變,這樣會造成研究結果的不確定

    微陣列中期分裂相染色體的比較基因組雜交(CGH) 實驗

    染色體 CGH 的獨特優點在于它的全基因篩查功能,與檢測單一靶 DNA 劑量改變的低通量方法,如 Southern 分析、PCR 和熒光原位雜交(FISH) 相比,速度顯著提高且省力。目前染色體 CGH 是一種比較完善的分子細胞遺傳學方法,但是它的兩個缺陷限制其作為一種綜合性篩查工具的應用。來源:《

    從全血中純化基因組 DNA 實驗方法

    用于從全血(10 ml) 中分離基因組 DNA 的 Wizard 基因組 DNA 純化試劑盒建立在一個四步程序基礎上的。純化程序的第一步包括血紅細胞的裂解、可溶部分的棄除,隨后是白細胞及其細胞核的裂解。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒乙醇異丙醇RNA 酶 A

    用于PCR的植物基因組DNA快速制備方法(二)

    2 結果與討論2.1 PCR模板DNA的快速制備本方法是將少量植物葉片在TE溶液或去離子水中,經鎢合金珠在離心管內的振蕩破碎,直接獲得DNA溶液。用多功能組織細胞研磨器(MTM-60)一次可操作60個樣品。瓊脂糖凝膠電泳表明,用TE和去離子水都可獲得分子量較大的DNA片段(圖1A)。用TE制備的DN

    消減 cDNA 或基因組 DNA 文庫的制備實驗

    一次雙向消減,需要總量為 2ug 的基因組 DNA 或 cDNA。大多數分離 RNA 和基因組DNA 的方法都適用于本實驗(Sambrooketal.1989;ChomczynskiandSacchi1987;Farrell1993)。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試

    單細胞全基因組擴增技術大比武

    2013年,權威技術期刊《Nature Methods》將年度技術授予了單細胞測序。正如社論中所說,每個細胞都是獨一無二的--它占據了獨特的空間位置,它的復制基因組中攜帶了獨特的錯誤。然而,過去以細胞群體為對象的研究只獲得了平均值,而忽略了異質性。目前多種新型分析技術,如NGS,都是為細胞群

    GenStar基因組DNA提取純化產品選擇指南

    基因組DNA相對穩定,故其提取方法也相對簡單。通常細胞通過表面活性劑處理,釋放出基因組DNA,經過蛋白酶和RNA酶消化后,經有機溶劑抽提和乙醇沉淀或過柱純化即可獲得一定量的基因組DNA。目前商品化的基因組DNA提取試劑盒分為溶液型和離心吸附柱型兩種。溶液型產品價格經濟,產率高,可獲取適用于建立文庫的

    目的基因的獲取-1

    基因工程的主要目的是使優良性狀相關的基因聚集在同一生物體中,創造出具有高度應用價值的新物種。為此必須從現有生物群中,根據需要分離出用于克隆的此類基因。這類基因稱之為目的基因,即準備要分離、改造、擴增或表達的基因。目前目的基因的獲取方法主要有以下2類:(1)已知基因的獲得:PCR分離法和化學合成法等(

    磁珠法DNA甲基化方案—高效特異的DNA亞硫酸鹽轉化與純化

    DNA甲基化是基因組DNA的一種主要表觀遺傳修飾形式。近年來,大量研究表明DNA甲基化修飾對于維持正常細胞功能、傳遞基因組遺傳印記、胚胎發育以及人類腫瘤發生,起著至關重要的作用,由此甲基化研究成為表觀遺傳學,乃至生命科學研究的熱點領域。那么如何檢測單個基因或者全基因組的甲基化水平或者甲基化位點呢?當

    RAPD標記技術

    實驗概要運用隨機引物擴增尋找多態性DNA片段可作為分子標記。這種方法即為RAPD(randomly  amplifiled polymorphic  DNA,隨機擴增的多態性DNA.)該RAPD技術建立于PCR基礎上,它是利用一系列(通常數百個)不同的隨機排列堿基順序的寡聚核苷酸

    RNA提取和RT-PCR

    真核生物的基因組是DNA,為什么不直接從DNA PCR得到我們需要的基因呢?因為真核生物的基因含有大量的非編碼區,稱為內元(intron),真正編碼蛋白的區段是被這些內元隔開的,這些編碼區叫做外元(exon)。真核生物的DNA轉錄成為RNA之后,經過剪切和拼接,去掉這些非編碼區,才形成成熟

    分子雜交

    一、雜交通過堿基對之間非共價鍵(主要是氫鍵)的形成即出現穩定的雙鏈區,這是核酸分子雜交的基礎。雜交分子的形成并不要求兩條單鏈的堿基順序完全互補,所以不同來源的核酸單鏈只要彼此之間有一定程度的互補順序(即某種程度的同源性)就可以形成雜交雙鏈。分子雜交可在DNA與DNA、RNA與RNA或RNA與DNA的

    分子雜交技術(一)

    一、概述  前面已經介紹了核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,通過堿基對之間非共價鍵(主要是氫鍵)的形成即出現穩定的雙鏈區,這是核酸分子雜交的基礎。雜交分子的形成并不要求兩條單鏈的堿基順序完全互補,所以不同來源的核酸單鏈只要彼此之間有一定程度的互補順序(即某種程度的同源性)就可以形成雜交雙鏈。分子雜交

    分子雜交技術(一)

    一、概述  前面已經介紹了核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,通過堿基對之間非共價鍵(主要是氫鍵)的形成即出現穩定的雙鏈區,這是核酸分子雜交的基礎。雜交分子的形成并不要求兩條單鏈的堿基順序完全互補,所以不同來源的核酸單鏈只要彼此之間有一定程度的互補順序(即某種程度的同源性)就可以形成雜交雙鏈。分子雜交

    以磁珠為基礎分離基因組 DNA 的實驗方法

    Wizard Magne Sil 基因組 DNA 純化系統是使用一種固相順磁性硅質顆粒來純化基因組 DNA。該技術取代了以真空過濾和離心為基礎的 DNA 純化形式,而且還使樣本處理更加經濟、高效。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒全血口腔涂片或樣品污染物二硫蘇

    消減 cDNA 或基因組 DNA 文庫的制備實驗

                試劑、試劑盒 緩沖液、溶液和試劑 酶和酶緩沖液 核酸和寡核苷酸 放射性化合物 酚

    交聯染色質免疫共沉淀(X-ChIP)實驗設計

    ChIP是一種強大的確定蛋白或者組蛋白修飾在基因組上定位的實驗方法。染色質被分離出來后采用抗體與抗原的結合來判定目的蛋白是否結合在特定的DNA序列上或者判定目的蛋白結合位點在全基因組范圍的分布(微陣列或DNA序列)。這種方法具有空間性與時效性。該實驗設計為如何在細胞中進行ChIP實驗提供了詳細的步驟

    安捷倫科技公司推出新一代人拷貝數變異基因芯片

      該芯片由WTCCC設計,應用在全球規模最大的CNV研究項目     安捷倫同期推出了標記試劑盒和純化組件,以提高通量、降低成本   2009年4月15日,北京—安捷倫科技公司(NYSE:A)日前推出了由維康信托病例控制協會(WTCCC)設計的2x105K CNV基因芯片

    如何選擇最佳的全血DNA、RNA提取方法?

    從全血中提取DNA和RNA應該說是最基本的工作了,提取的DNA和RNA質量的好壞直接影響了下游的實驗和分析,可供選擇的方法非常多,亂花漸欲迷人眼,如何選擇最適合的方法,成了很多人實驗開始前最難以抉擇的事情。我們從兩個方面,層層剝繭,分析最佳的實驗方法。 1、全血的采集保存和DNA的提取I. 用含抗凝

    消減 cDNA 或基因組 DNA 文庫的制備實驗

    試劑、試劑盒 緩沖液、溶液和試劑酶和酶緩沖液核酸和寡核苷酸放射性化合物酚儀器、耗材 熱循環儀水浴箱瓊脂糖凝膠電泳所需的試劑與設備實驗步驟 第1階段:RNA和DNA的分離一次雙向消減,需要總量為2ug的基因組DNA或cDNA。大多數分離RNA和基因組DNA的方法都適用于本實驗(Sambrooketal

    賠款也要拒絕126億美元收購 凱杰是家什么樣的公司?

    2020年8月13日,賽默飛宣布,其對診斷測試制造商凱杰(QIAGEN)每股43歐元(總額126億美元)的經修訂報價不再有效。此項收購就此終止,按合同條款的規定,賽默飛世爾將從QIAGEN收到9500萬美元賠償。原定的交易最后期限是8月10日,收購結果要視贊成凱杰出售的股票能否超過三分之二。但最終結

    核酸純化儀 應用領域

    幾乎在每個實驗室,與生物分子相關的分離純化工作都是十分重要,且必不可少的。但要對多個樣品進行純化還是相當困難的,不僅需要選擇合適的純化技術,而且工作量也特別大,很難滿足當前飛速發展對高通量樣品進行提取純化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取純化系統是使用磁珠法技術,可同時操作1-32個樣品,

    細菌基因組DNA提取實驗

    細菌基因組DNA提取可應用于:(1)獲得細菌基因組DNA;(2)作為PCR模板;(3)用于測序、遺傳信息分析等。實驗方法原理本試劑盒采用獨特的細胞裂解和相分離技術,結合DNA 制備膜選擇性地吸附DNA 的方法達到純化基因組DNA 的目的。適合于從1.0x109 細菌中獲得多至20 ug 的

    甲基化檢測方法(亞硫酸氫鹽修飾后測序法)-1

    第一部分 基因組DNA的提取。這一步沒有懸念,完全可以購買供細胞或組織使用的DNA提取試劑盒,如果實驗室條件成熟,自己配試劑提取完全可以。DNA比較穩定,只要在操作中不要使用暴力,提出的基因組DNA應該是完整的。此步重點在于DNA的純度,即減少或避免RNA、蛋白的污染很重要。因此在提取過程中需使用蛋

    DNA提取儀應用領域

    幾乎在每個實驗室,與生物分子相關的分離純化工作都是十分重要,且必不可少的。但要對多個樣品進行純化還是相當困難的,不僅需要選擇合適的純化技術,而且工作量也特別大,很難滿足當前飛速發展對高通量樣品進行提取純化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取純化系統是使用磁珠法技術,可同時操作1-32個樣

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