氣相色譜儀和液相色譜儀的異同點
氣相色譜儀與液相色譜儀的區別主要體現在分離、應用的范圍以及儀器的構造上不同。一、分離原理:1.氣相:氣相色譜是一種物理的分離方法。利用被測物質各組分在不同兩相間分配系數(溶解度)的微小差異,當兩相作相對運動時,這些物質在兩相間進行反復多次的分配,使原來只有微小的性質差異產生很大的效果,而使不同組分得到分離。2.液相:高效液相色譜法是在經典色譜法的基礎上,引用了氣相色譜的理論,在技術上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9′107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經典液相色譜(每米塔板數可達幾萬或幾十萬);同時柱后連有高靈敏度的檢測器,可對流出物進行連續檢測。二、應用范圍:1.氣相:氣相色譜法具有分離能力好,靈敏度高,分析速度快,操作方便等優點,但是受技術條件的限制,沸點太高的物質或熱穩定性差的物質都難于應用氣相色譜法進行分析。一般對500℃以下不易揮發或受熱易分解的物質部分可采用衍生化法......閱讀全文
液相色譜流動相的選擇
在化學鍵合相色譜法中,溶劑的洗脫能力直接與它的極性相關。在正相色譜中,溶劑的強度隨極性的增強而增加;在反相色譜中,溶劑的強度婕緣腦鑾慷躒酢?BR>正相色譜的流動相通常采用烷烴加適量極性調整劑。反相色譜的流動相通常以水作基礎溶劑,再加入一定量的能與水互溶的極性調整劑,如甲醇、乙腈、四氫呋喃等。極性
液相色譜流動相的貯存
液相色譜流動相的貯存流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內,不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑,導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統,可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴,防止溶劑揮發引起組成變化,也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸
液相色譜流動相的特點
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點: (1)流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。 (2)流動相與樣品不產生化學反應 (3)流動相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長泵的
液相色譜流動相走空
泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完,否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環,最終產生漏液。
液相色譜流動相的貯存
流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內,不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑,導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統,可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴,防止溶劑揮發引起組成變化,也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉,應
液相色譜維護誤區
??關于標示 1、色譜柱的流向不能改變 在我們常規思維中,色譜柱上標示的流向是不可改變的,每次使用都要遵循。可是,大家有沒有想過這個方向的作用是什么呢?為什么要標示一個使用方向呢? 其實色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的,標示方向的目的就是讓我們在使用中記住流動相從哪個方向流
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液相色譜維護誤區
?? 關于標示 1、色譜柱的流向不能改變 在我們常規思維中,色譜柱上標示的流向是不可改變的,每次使用都要遵循。可是,大家有沒有想過這個方向的作用是什么呢?為什么要標示一個使用方向呢? 其實色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的,標示方向的目的就是讓我們在使用中記住流動相從哪個方向流入色譜柱,那
液相色譜保養知識
1、? 色譜柱長時間不用,存放時,柱內應充滿溶劑,兩端封死(如ACN適于反相色譜柱,正相色譜柱用相應的有機相)2、? 對于手動進樣器,當使用緩沖溶液時,要用水沖洗進樣口,同時搬動進樣閥數次,每次數毫升。3、流動相使用前必須過濾,不要使用多日存放的蒸餾水(易長菌)。4、帶seal-wash的1100,
如何使用液相色譜
1.電源準備打開穩壓器電源開關,須待電壓指示至220V后,才能開啟其他有關設備。2.LC-600高效液相色譜儀的準備試劑:三氟乙酸乙腈超純水(Millipore超純水)冰乙酸溶液配置:貯液瓶與流動相的準備A液0.1%三氟乙酸(三氟乙酸1ml,超純水999ml)室溫保存B液60%乙腈(乙腈600ml,
簡述液相色譜理論
液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相,稱為經典液相色譜法,此方法柱效低、時間長(常有幾個小時)。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在經典液相色譜法的基礎上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
液相色譜保養知識
1、? 色譜柱長時間不用,存放時,柱內應充滿溶劑,兩端封死(如ACN適于反相色譜柱,正相色譜柱用相應的有機相)2、? 對于手動進樣器,當使用緩沖溶液時,要用水沖洗進樣口,同時搬動進樣閥數次,每次數毫升。3、流動相使用前必須過濾,不要使用多日存放的蒸餾水(易長菌)。4、帶seal-wash的1100,
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
反相高效液相色譜
實驗材料 蛋白質標樣試劑、試劑盒 乙睛(HPLC級)去離子水(HPLC級) 三氟乙酸(TFA)儀器、耗材 HPLC 色譜系統 反相柱實驗步驟 1.進行空白或對照層析譜分析(即在步驟①中不加樣)。一般這是進行一天層析工作的開始。下面是推薦使用的用于 RP-HPLC 系統評估的標準色譜條件。(1)線性梯
液相色譜柱通論
選擇液相色譜柱簡單思路1. 確定分離目的 ? ? ?確定你的應用是否要求高分離度、短分析時間、高靈敏度、長柱壽命,低的操作成本等等。2. 評估分析物的化學性質 ? ? ?評估分析物的化學性質. . 諸如化學結構、溶解性、穩定性等等。3. 選擇合適的色譜柱 ? ? ?了解色譜填料的物理和化學性
液相色譜的應用
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合,HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體中的
反相高效液相色譜
方案1 蛋白質 RP-HPLC 的標準色譜條件 方案2 填充 RP-HPLC 毛細管微柱 方案3 不易分離的大分子量多肽的純化實驗 方案4 用 RP-HPLC 對固相合成的多肽進行純化實驗 方案5 用 RP-HPLC 技術對多肽和蛋白質混合
高效液相色譜柱
一、怎樣選擇色譜柱?現代高效液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,必須對此有一定的認識和了解。?(1)硅膠基質填料:?1、正相色譜?正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團,如胺基團(NH2,APS)和氰基團(
高效液相色譜技術
高效液相色譜(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是化學、生物化學與分子生物學、醫藥學、農業、環保、商檢、藥檢、法檢等學科領域與專業最為重要的分離分析技術,是分析化學家、生物化學家等用以解決他們面臨的各種實際分離分析課題必不可缺少的工具。國際市場
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
高效液相色譜原理
以高壓下的液體為流動相,并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。構造可分為高壓輸液泵,色譜柱,進樣器,檢測器以及數據獲取與處理系統等部分。與氣相色譜法相比,液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制,只要求把樣品制成溶液即可,非常適合于分離生物大分子、離子型化合物,不穩定的天然產物以
高效液相色譜原理
液相色譜儀是一款以用戶為核心的智能化的色譜儀,具有常規HPLC的基本性能,并擴展了更多智能化的功能,能很好的滿足用戶的各類不同的應用要求,使用戶能更加輕松的使用,并獲得準確的分析數據。一、原理:高效液相色譜法的原理是在原始的經典色譜法基礎上面引用氣象色諧的理論,色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成
液相色譜的用途
高效液相色譜應用很廣泛,基本能對有機化合物中百分之七十到百分之八十的化合物進行分離與檢測,下面以安捷倫液相色譜技術做為舉例:應用液相色譜用途廣泛,已經成為大多數化學行業和生命科學行業中的標準配置。安捷倫液相色譜和液-質聯用系統正為各種客戶群服務,如藥物研制和生產、蛋白質、食品安全、環境、國土安全和石
高效液相色譜原理
以高壓下的液體為流動相,并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。構造可分為高壓輸液泵,色譜柱,進樣器,檢測器以及數據獲取與處理系統等部分。與氣相色譜法相比,液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制,只要求把樣品制成溶液即可,非常適合于分離生物大分子、離子型化合物,不穩定的天然產物以
Waters液相色譜教程
本資料來自于Waters中國有限公司培訓中心 包括4個文件: 液相色譜教程(一)液相色譜基礎知識A 液相色譜教程(一)液相色譜基礎知識B 液相色譜教程(三)液相色譜實驗操作 液相色譜教程(四)液相色譜柱基礎知識 ? 下載:Waters液相色譜教程
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類 ①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrow bore),內徑1~2mm,柱長10~20cm; ③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm; ④半制備柱,內徑>5mm; ⑤實驗室制備柱,內徑20~4
高效反相液相色譜
反相色譜(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高,在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式,在生物大分子的反相液
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱